果梅ISSR-PCR反应体系的建立和优化

以果梅品种桃梅为试材, 通过单因子试验分别研究了DNA模板浓度、引物浓度、 Mg2 浓度、 dNTPs浓度、退火温度及循环数等对果梅ISSR-PCR反应的影响. 建立了果梅ISSR-PCR 的最佳反应体系 20 μL反应体系中含10× buffer 2 μL, 2.5 mmol/L MgCl2, 0.2 mmol/L dNTPs, 0.32 μmol/L引物, 20～80 ng模板DNA, 1 U Taq DNA聚合酶. 利用优化的反应体系, 对19个果梅品种进行体系稳定性检测, 结果表明该反应体系的重复性和稳定性良好.     

菊属ISSR反应体系的建立及优化

以菊属野生种和不同类型菊花品种为试验材料,通过正交试验对菊属ISSR-PCR反应体系进行初选,在此基础上对体系中的dNTP、引物、Mg2 、TaqDNA聚合酶、模板DNA等最佳浓度进行了筛选,通过稳定性检测,优化了菊花ISSR-PCR反应体系:总体积20μl,DNA模板量60 ng;引物浓度0.5μmol/L;dNTP浓度100μmol/L;Mg2 浓度1.875 mmol/L;Taq聚合酶1 U。     

安祖花ISSR-PCR反应体系的优化和确立

为建立适宜安祖花DNA的ISSR-PCR扩增体系,采用单因子试验对影响ISSR-PCR反应的各组分(Taq DNA聚合酶、模板DNA、引物、dNTPs、Mg2+浓度)进行了优化,确立了适合安祖花的条带清晰、多态性高、重复性好的最佳ISSR-PCR反应体系,即在20μL PCR反应体系中含有10×PCR Buffer 2.0μL、25 mmol/L MgCl21.2μL、10 mmol/L dNTPs 0.8μL、5 U/μL Taq酶0.2μL、10μmol/L引物3.0μL、20 ng/μL模板2.0μL;并利用2条引物对15个安祖花品种进行了稳定性鉴定,为安祖花的遗传多样性分析及育种工作提供技术支持。     

茶树ISSR-PCR反应体系的正交优化

对茶树ISSR-PCR反应体系中的5因素(Taq酶浓度(U/(20μL))、Mg2+浓度(mmol/L)、模板DNA质量浓度(ng/(20μL))、dNTP浓度(mmol/L)、引物浓度(μmol/L))在4水平上进行正交优化试验,筛选出各因素的最佳水平,建立茶树最佳ISSR-PCR反应体系,即20μL反应体系中,TaqDNA聚合酶为1.0U/(20μL),Mg2+为2.0mmol/L,模板为40ng/(20μL),dNTP为0.20mmol/L,引物为0.25μmol/L.对茶树ISSR-PCR最佳反应体系进行梯度退火试验,确定引物ISSR1、UBC881的最适退火温度分别为52.4、59.0℃.     

长春花ISSR-PCR 反应体系的正交优化

[目的]筛选最适的长春花ISSR-PCR反应体系。[方法]采用正交试验方法,对影响长春花ISSR-PCR反应体系的引物浓度、dNTP浓度、Mg2＋浓度、TaqDNA聚合酶浓度和模板DNA浓度5个因素在4个水平上进行正交试验,建立适合长春花ISSR-PCR的反应体系。[结果]长春花ISSR-PCR反应体系的最佳条件：引物浓度0.50μmol/L,dNTP浓度0.10 mmol/L,Mg2＋浓度3.00 mmol/L,Taq酶浓度0.75U/25μl,DNA模板浓度350 ng/25μl。采用该反应体系筛选出12对适合于长春花ISSR-PCR反应的引物。[结论]利用优化系统进行长春花的ISSR-PCR反应,可获得稳定性高、重复性好、背景清晰的电泳结果。     

单雌蓖麻ISSR-PCR反应体系的建立和优化

以单雌蓖麻提取的基因组DNA为材料,采用单因子试验方法,分别研究了Mg2+浓度、dNTP浓度、引物浓度、Taq DNA聚合酶以及模板DNA用量5种因素对ISSR-PCR反应的影响;建立了适合单雌蓖麻IS-SR-PCR扩增的反应体系,即在20μL反应体系中,10×PCR buffer 2.5μL(Mg2+free),模板DNA 20 ng,2.0mmol/L MgCl2,引物浓度1.0μmol/L,dNTP 0.4 mmol/L,Taq DNA聚合酶1.0 U。     

长柱金丝桃ISSR-PCR反应体系的建立与优化

为筛选可用于长柱金丝桃遗传分析的最适ISSR-PCR反应体系,采用正交试验对影响ISSR-PCR反应的5个重要因素(Taq DNA聚合酶、dNTPs、Mg~(2+)、引物和模板DNA浓度)进行4水平正交优化,并对退火温度、循环次数进行筛选。结果表明,20μL ISSR-PCR最佳反应体系包括Taq DNA聚合酶1.0 U、dNTPs 0.2 mmol·L-1、Mg2+3.0 mmol·L~(-1)、引物0.4μmol·L~(-1)、DNA模板40 ng,对ISSR-PCR反应的影响程度由大到小为:Taq DNA聚合酶、引物、Mg2+、dNTPs、DNA模板;引物UBC822的最佳退火温度52.7℃,最佳循环次数41,利用优化的反应体系从61条引物中筛选出12条稳定性好、多态性高的引物,验证试验表明优化的反应体系具有较高的稳定性。     

雷公藤ISSR反应体系的建立与优化

[目的]建立适合雷公藤的ISSR-PCR反应体系,为雷公藤种质资源的亲缘关系鉴定和遗传多样性分析提供技术支持.[方法]采用单因素试验设计优化影响雷公藤ISSR-PCR扩增效果的Taq DNA聚合酶、dNTPs、Mg2+、引物浓度和DNA模板含量及退火温度,并以32份雷公藤样品对优化的ISSR-PCR反应体系进行验证.[结果]优化的雷公藤种质资源ISSR-PCR反应体系为:20.00μL反应液中含1.50 U Taq DNA聚合酶、0.30 mmol/L dNTPs、2.00 mmol/L Mg2+、0.40μmol/L引物、20 ng DNA模板和2.00μL 10×Buffer.ISSR-PCR扩增程序中最佳退火温度为54.7℃.[结论]建立优化的雷公藤ISSR-PCR反应体系具有较高的稳定性、重现性和适用性,可应用于雷公藤不同地理种源间的遗传多样性鉴定.     

濒危植物珙桐ISSR-PCR反应体系的建立

以珙桐叶片为材料,通过单因子试验分别研究了退火温度、TaqDNA聚合酶用量、dNTP浓度、Mg2 浓度、引物浓度和模板DNA浓度对ISSR-PCR反应的影响,建立了适宜于珙桐ISSR分析的扩增体系,即25μl的反应体系中:模板DNA20 ng,Mg2 1.5 mmol/L,引物0.6μmol/L,dNTP 0.20 mmol/L,TaqDNA聚合酶1.5 U。     

白花蛇舌草ISSR反应体系的建立与优化

通过单因素考察结合正交试验的方法,基于反应体系中Taq DNA聚合酶量、DNA模板用量、d NTPs浓度、引物浓度、Mg2+浓度等5因素4水平条件对ISSR反应体系进行优化。白花蛇舌草ISSR-PCR的20μL最佳反应体系为引物浓度0. 562 5μmol/L,Mg2+浓度2. 75 mmol/L,d NTPs浓度0. 375 mmol/L,DNA模板量60 ng,Taq DNA聚合酶1. 25 U,2. 0μL 10×Taq Buffer,其余用dd H_2O补齐。该试验建立并优化了白花蛇舌草ISSR-PCR反应体系,为白花蛇舌草种质资源遗传多态性的研究提供参考依据。     

枯萎病菌的PCR-RFLP分子检测和早期诊断

采用自行设计的、能对镰刀菌18srDNA进行特异性扩增的1对引物,利用PCR-RFLP对尖孢镰刀菌以不同方式侵染的植株进行跟踪检测。结果表明,应用PCR-RFLP检测程序可检测出处于侵染初期和潜育期的枯萎病菌,说明PCR-RFLP能够快速、灵敏、准确地对枯萎病进行早期诊断。     

廊坊市城镇居民体育消费心理调查与分析

如何针对廊坊市居民高度群居的特点,引导廊坊市居民的体育消费,推动新经济形式下社区体育产业的发展,是社区体育一个重要的研究课题．本文从运动心理学的角度,调查分析了廊坊市有代表性的不同地域居民的体育消费状况,提出了一些完善居民小区体育消费服务的建议,旨在为研究开拓社区体育市场提供一些参考数据．     

Development and Identification of Triticum aestivum L.-Thinopyrum bessarabicum L(o)ve Chromosome Translocations

With ass7istance of chromosome C-banding and genomic in situ hybridization(GISH)combined with meiotic analysis,five germplasms with homozygous wheat-Th. Bessarabicum chromosome translocations were developed and identified among BC1F5 progenies of the cross between T. Aestivum cv. Chinese Spring and Chinese Spring-Th. Bessarabicum amphiploid. These lines included Tj01 and Tj02(2n=44)containing a pair of wheat-Th. Bessarabicum translocation chromosomes besides a pair of added Th. Bessarabicum chromosomes,Tj03(2n=44)with a pair of added interspecific translocation chromosomes,Tj04(2n=44)containing a pair of interspecific translocation chromosomes besides an added pair of Th. Bessarabicum chromosome arms and Tj05(2n=46)containing a pair of interspecific translocation chromosomes besides two pairs of added intact alien chromosomes. The breakpoints of all the translocations were found to be not around centromere. Meanwhile,all the lines showed normal plant growth,development and fertility,while the translocation chromosomes transmitted regularly. The obtained translocations might be of use for transferring elite genes from Th. Bessarabicum into wheat.     

犬精液冷冻与人工授精的研究——Ⅱ稀释液和冻精剂型对犬冻精解冻后活力的影响

从6条公犬采集其浓份精液36次.分别在稀释液Ⅰ和Ⅱ中冷冻成三种剂型的冻精(颗粒0.5ml细管和安瓿),根据解冻后活力比较其优劣.研究表明:稀释液Ⅰ中三种剂型的平均解冻后活力(0.35±0.04)显著高于稀释液Ⅱ(0.23± 0.05;P<0.01);两种稀释液中颗粒冻精的平均冻后活力(0.34±0.08)显著地高于细管(0.26±0.09;P<0.01)和安瓿(0.26±0.08;P<0.01);细管和安瓿之间差异不显著(P>0.05).     

新疆忍冬属（Lonicera L．）新植物

根据现有资料和标本，新疆忍冬属（Ｌｏｎｉｃｅｒａ）共有２０种（包括引入栽培种），其中有３个新纪录种；（１）奥尔忍冬Ｌ．ｏｌｇａｅＲｇｌ．ｅｔＳｃｈｍａｌｈ．；（２）杈枝忍冬（赛小叶忍冬）Ｌ．ｓｉｍｕｌａｔｒｉｘ　Ｐｏｊａｒｋ．；（３）伊犁忍冬Ｌ．ｉｌｉｅｎｓｉｓ　Ｐｏｊａｒｋ．和１个新变种：细叶忍冬Ｌ．ｓｔｅｎａｎｔｈａｖａｒ．ａｎｇｕｓｔｉｆｏｌｉａ　Ｃ．Ｙ．ＹａｎｇｅｔＪ．Ｈ．Ｆａｎ及１新种：圆叶忍冬Ｌ．ｓｕｂｒｏｔｕｎｄａｔａＣ．Ｙ．ＹａｎｇｅｔＪ．Ｈ．Ｆａｎｓｐ．ｎ．等，都是《中国植物志》７２卷没有记载过的，现在此发表。     

大孢指疫霉三个新变种的研究

 本文报道大孢指疫霉Sclerophthora macrospora可区分为3个变种,即大孢指疫霉水稻变种S.macrospora var.oryzae var.nov.,大孢指疫霉小麦变种S.macrospora var.triticina var.nov.和大孢指疫霉玉蜀黍变种S.macrospora var.maydis var.nov.,新变种有汉文和拉丁文描述及形态图,地理分布。     

旋耕埋草机立刀设计功能实现程度的分析

以1GMC-70型船式旋耕埋草机立刀为研究对象,分析立刀设计功能,建立立刀刃口函数曲线,并利用Matlab软件进行立刀运动学分析。结果表明:立刀当前的结构参数不能很好地与其设计功能相匹配,立刀对螺旋横刀切土节距的增加量小于螺旋横刀切土节距的1/3,立刀自身的秸秆切断效应以及辅助螺旋横刀处理秸秆等效应都比较弱;立刀对未耕土壤有破茬作用,但破茬深度约为垡片最大厚度的1/3,破茬效应较小;立刀对刀辊后方已耕土壤几乎没有碎土效应;立刀没有将垡条切断,它只切割了垡条横截面积的40%左右;立刀的4-3-4-3-4焊接排布方式没有增加自身作业机会。田间作业试验表明,旋耕埋草机是否设置立刀对作业效果没有区别,故在当前结构参数下立刀没有实现其设计功能,建议重新设计立刀。     

Oral Insulin Stimulates Intestinal Department and Enzyme Maturation in Newborn Pigs

The effects of oral insulin on intestinal tissue growth and brush border enzyme activities in newborn pigs were examined in this study. Newborn unsuckled pigs were bottle-fed for3 days with artificial milk(M),milk supplemented with 60mIUmL-1 of insulin(IH)or hydrolyzed milk(HM). Compared with newborn unsuckled pigs,piglets bottle-fed for 3 days all gained in intestinal weight and length significantly despite a mild loss in body weight during the experimental period. The activities of lactase and alkaline phosphatase(AKP)in the small intestinal mucosa declined markedly in pigs fed with M,but the activity of maltase increased significantly during the experimental period. Dietary protein pre-hydrolysis had no significant effect on intestinal tissue mass or length,but it moderated the decline of intestinal lactase and AKP activities. Dietary supplementation of insulin significantly increased mucosal protein content and brush border activities of lactase,maltase,AKP and aminopeptidase(AP)in the small intestine.The effect. of insulin treatment was particularly obvious at the distal region of the small intestine. These results demonstrate that oral insulin can stimulate intestinal digestive enzyme activities in newborn pigs. The finding supports the hypothesis that milk-borne insulin plays a role in regulating postnatal gut development in the suckling young.     

中国泡桐属新植物

本文发表了中国泡桐属1新种、2新变型,即山明泡桐Paulownia lamprophylla Z.X.Chang etS.L.Shi,sp.nov.;圆叶山明泡桐P.lamprophylla f.rotanda Z.X.Chang et S.L.Shi.fnov.;白花兰考泡桐P.elongata S.Y.Hu f.alba Z.X.Chang et S.L.Shi.f.nov.除外部形态特征外,并从叶片解剖、生物学、生态学及木材构造等方面论证了新种与邻近种的差异。     

栽培大豆、野生大豆和半野生大豆酯酶同工酶的研究

本文采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法，分析了栽培大豆、野生大豆和半野生大豆的酯酶同工酶．结果表明，栽培大豆幼苗期的酯酶同工酶共出现了１７条酶带。栽培大豆和野生大豆既有共同的酶带，又有各自独特的酶带，是亲缘关系较近的两个种。半野生大豆有类似野生大豆的酶谱，表现了野生种的特点．不同进化类型的大豆酯酶同工酶有明显不同。随着进化程度增高，酶带数目有增多的趋势．研究表明，大豆幼苗酯酶同工酶酶谱比较稳定，酶带明确，具有较为明显的种的专一性，可以做为大豆分类学和研究大豆进化关系的一个生化指标。