木薯叶培养中胚状体的诱导及植株再生

以木薯试管苗幼叶为材料,在 MS 附加8毫克/升2.4—D 培养基上培养一周后,在主叶脉周围产生胚性愈伤组织,进而形成胚状体.胚性愈伤组织的形成与木著品种和外植体发育状况有关.胚状体数目可通过不断继代培养得到增殖.在MS 附加0.1毫克/升 BA、0.01毫克/升2.4—D 和1毫克/升 GA3培养基上,胚状体可发育成完整植株。     

柑桔球形合子胚的离体培养

以雪柑、芦柑和柚为母本,分别用芦柑、福桔、枳壳和柚的花粉进行授粉,观察合子胚的发育.结果表明授粉后50—55d,胚囊只有1个球形合子胚,珠心胚尚未侵人胚囊,可以单独分离培养.将合子胚接种于改良White基本培养基及其附加物。蔗糖浓度为10％.待子叶胚分化明显时,移入MT培养基。即可抽芽.芽长2—3cm,再转入诱导长根培养基,便发育成为正常的植株.试验自1986年获得雪柑与福桔和芦柑授粉的合子胚苗之后,1988—1989年又先后获得雪柑与枳壳,柚与枳壳,芦柑与柚授粉的合子胚苗.小苗的GOT基因酶和过氧化物同工酶测定,证明其杂种性,通过多次杂交试验,探索柑桔球形合子胚离体培养技术,有效地排除了珠心胚的干扰.     

柑桔花粉植株的诱导(摘要)

<正> 目前在国内外已有数十种植物利用花药培养获得单倍体植株,但在木本果树花药培养方面的研究,至今尚未见到诱导出花粉单倍体植株的报道。我们于1979年春,采用四季桔(Citrus microcarpa Bunge)进行试验,将花蕾经5℃低温处理,在无菌条件下取出花药,接种于N6等基本培养基,附加激动素(2mg/l)和2,4—D(0.5—2mg/l)进行培养。经过十周培养之后,从开裂的花药内直接产生绿色胚状体。将胚状体转移于改良的MS基本培养基,附加BA0.25毫克/升,IAA0.1毫克/升和LH500毫克/升的培养基上,进一步分化出具有根、茎、叶的完整植株。目前有大量胚状体正在发育成苗。小苗根尖(或胚状体)细     

爬山虎体细胞胚的发生及组织学研究

该文以爬山虎子叶的叶片和叶柄为试验材料 ,对爬山虎体细胞胚发生进行了研究 .结果表明 :爬山虎子叶在MS附加 6 BA 0 3mg L和NAA 0 1mg L培养基上或 1/ 2MS附加 6 BA 0 5mg L和NAA 0 1mg L培养基上都能诱导产生体细胞胚 ,子叶叶柄在 1/ 2MS附加 6 BA 0 3mg L的培养基上也产生了体细胞胚 .胚性愈伤组织转移到无植物生长调节剂的MS或B5培养基上均能发育成正常植株 .组织学观察表明 ,爬山虎体细胞胚的形成经历了球形胚、心形胚、鱼雷胚、子叶胚等几个阶段 ,逐渐发育成正常植株 ,这与合子胚的发育途径相似 .体细胞胚在发育过程中出现了连体胚、芽端畸形胚、超度含水状胚等几种畸形胚     

滇黄芩体胚诱导与植株再生

以附加2%蔗糖的MS为基本培养基,添加不同的植物激素,进行滇黄芩体胚诱导与植株再生。结果表明:叶柄及不带腋茎段在含NAA 0.2~1 mg/L的培养基中可诱导愈伤组织;茎尖及带腋茎段在6-BA(或KT)0.5 mg/L IBA 0.5 mg/L培养基中诱导胚状体和芽丛,在6-BA(或KT)0.05 mg/L IBA 0.1 mg/L培养基中增殖小植株;在1/2 MS IAA 1 mg/L 3%蔗糖培养基中能产生带2~3级根的壮根;所有培养需附加1%琼脂粉,克服玻璃化现象。     

2个甘蓝F1小孢子培养中高出胚率的诱导技术研究

以2个优良的F1甘蓝为试材,探讨了高温热激、蔗糖浓度、添加和更换培养液培养、激素种类与浓度配比等因素对提高甘蓝小孢子诱导胚产量的影响.结果表明,2个F1甘蓝材料经24 h 、33℃高温热激处理对小孢子胚胎发生是必要的;小孢子在13%蔗糖浓度培养基(NLN-13)中培养胚产量最高,为1.89胚/蕾;高浓度蔗糖的培养基(NLN-17)培养3 d后添加低浓度蔗糖培养基(NLN-10)培养能大幅度提高胚产量,比一直在13%蔗糖的培养基(NLN-13)培养的胚状体增加255.2%;NLN-13培养基中添加0.1 mg/L 6-BA和0.05 mg/L NAA能够诱导出高胚产量.     

金花茶及其远缘杂种末成熟胚离体培养的初步研究

金花茶授粉(包括杂交授粉)后4个月以上(子叶大于1mm)的未成熟胚(包括生理落果)在修改的MS(HCl—B_11mg/l、烟酸1mg/l)附加NAA0.01、ZT_1、IBA0.5、谷氨酰胺20、丝氨酸2、LH500、琼脂0.76～0.8％、蔗糖6—8％,pH=5.8的培养基上,能发育成幼株。不带子叶的未成熟胚亦能成长,但生长较慢。未成熟胚在离体培养过程中,子叶增长很慢,增大甚少。     

荔枝愈伤组织诱导及其体细胞胚胎发生研究初报

分别取元红荔枝盛花后45d未败育的幼胚、一个月龄的实生苗叶片、成龄树叶片、未受精子房接种在愈伤组织诱导培养基上,均能诱导出愈伤组织,但仅有幼胚能诱导出胚性愈伤组织。幼胚在含5% 蔗糖的MS基本培养基附加2,4-D2mg/L+水解乳蛋白500mg/L的培养基上诱导率最高。幼胚愈伤组织在含5% 蔗糖的基本培养基附加10% 椰乳的培养基上,白色胚状体发生率最高。胚状体易提前萌发,仅抽生根不抽生茎。健壮的未生根胚状体在含5% 蔗糖的培养基附加BA1mg/L的培养基上生根率最低,为理想的萌发培养基。随着BA浓度的降低,生根率提高,呈负相关。同浓度BA抑制生根的效果好于KT。在萌发培养基上生长一段时期后,少数较成熟的胚状体抽生出茎叶,长成完整植株。     

湿地松体胚增殖与成熟培养研究

以湿地松未成熟合子胚为试验材料,诱导获得胚性胚柄细胞团(Embryogenic Suspensor Mass-ESM),通过培养基的优化,开展湿地松ESM维持与增殖及体胚成熟培养的研究。研究结果表明:基本培养基与植物生长调节剂组合影响ESM的增殖速率及质量,DCR+NAA1.0mg·L-1+6-BA0.32mg·L-1+KT0.30mg·L-1为湿地松ESM的最佳增殖培养基;在无植物生长调节剂培养基上的预培养是湿地松体胚发育、成熟的必要程序,ABA、PEG、AC和高浓度蔗糖的组合进一步促进了体胚的发育成熟,体胚在培养基LP+ABA50mg·L-1+PEG600020%+6%蔗糖+AC2.5g·L-1上获得了近子叶期体胚,但未能获得完全成熟的体胚。     

葡萄未成熟胚诱导体细胞胚发生和植株再生与遗传鉴定

以二倍体和四倍体葡萄杂交获得的未成熟合子胚为材料,诱导体细胞胚发生。采用的初生胚诱导培养基(SE培养基)为:NN69+1.80 mg.L-1NAA+0.4 mg.L-1水解酪蛋白+2 g.L-1活性炭+30 g.L-1蔗糖+6 g.L-1琼脂;次生胚诱导培养基分别为:3/4MS+0.35 mg.L-1IBA+30 g.L-1蔗糖+6 g.L-1琼脂(扩繁培养基)和MS+1.5 g.L-16-BA+0.2 g.L-1IBA+30 g.L-1蔗糖+6 g.L-1琼脂(胚状体萌发培养基)。结果表明:初生胚诱导率为11.11%和16.67%,体细胞胚在扩繁培养基上再生植株。利用流式细胞仪和SSR标记检测源自同一未成熟合子胚(胚珠)的不同株系的遗传稳定性,结果显示,所测植株均为三倍体,且都来自杂交所得的未成熟合子胚。本研究所建立的体细胞胚诱导方法及遗传稳定性检测技术,能够为植物材料保存、扩繁,转基因应用和研究植物发育及极性建成等提供途径。     

湿地松器官性愈伤组织诱导与增殖

以湿地松成熟合子胚、胚苗顶芽、下胚轴、胚根为外植体,选用DCR,LP,TX3种培养基,与不同浓度NAA,2,4-D及6-BA组合,研究其器官性愈伤组织诱导、增殖培养的最适条件．结果表明：成熟合子胚、胚苗顶芽是诱导器官性愈伤组织理想的外植体,最佳诱导培养基为TX＋BA0．5mg／L＋NAA2．0mg／L＋30g／L蔗糖,诱导率达50％以上;最佳增殖培养基为TX＋BA0．3mg／L＋NAA 1．0mg／L＋CH 400mg／L＋30g／L蔗糖,继代周期25-30d,增殖率达3．46．     

花生再生体系的建立

取4 d龄花生(鲁花14)的胚轴、小叶和成熟子叶为外植体,对其进行离体组织培养研究。结果表明:在培养1个月后,胚轴在MS+8.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/LNAA培养基上可以诱导产生丛生芽,诱导率达到80%,平均每个外植体可以产生10~20个芽点;小叶在MS+5.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/LNAA培养基上能诱导出胚性愈伤组织,进一步诱导分化形成芽点并伸长;诱导出的丛生芽接种在MS+5mg/L6-BA+1.0 mg/LNAA+50.0 mg/LAD的培养基上可以扩繁和伸长;花生成熟种子的子叶在MS+20 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L KT+1.0mg/LAgNO3培养基上可直接诱导形成颗粒状、表面光滑、干燥的体细胞胚,每个外植体可以诱导出8个左右的体细胞胚。     

濒危植物珙桐的组织培养技术研究

以珙桐成熟胚为试材,研究了不同生长调节剂组合对珙桐成熟胚离体分化的影响,并获得了完整的植株。结果表明:诱导愈伤组织的最佳培养基组合为1/2MS+0.5 mg/L 6-BA+3 mg/L IBA+1 mg/L GA3+蔗糖30 g/L;诱导不定芽的最佳培养基组合为1/2MS+1.0mg/L6-BA+蔗糖20 g/L;最有利于不定芽的增殖与伸长的培养基组合为MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L GA3+蔗糖20 g/L;诱导生根的最佳培养基组合为1/2MS+0.8 mg/L IBA+0.2 mg/L NAA+蔗糖10 g/L。     

木豆不定芽再生途径的高效快繁体系

以木豆成熟胚为外植体,通过探讨不同培养条件对不定芽的诱导、增殖及生根等能力的影响,以建立高效的快繁体系。结果表明：适合胚生长的培养基为MS附加0.5 mg/L BA和0.1 mg/L IBA;不定芽增殖培养基以EC6附加0.4 mg/LBA与0.2 mg/L IBA效果最佳;生根培养基以MS附加0.1 mg/L IBA效果最好,生根率为82.4%,移栽成活率为85%。     

桃遗传转化再生体系的建立与优化

以桃不同胚龄胚为外植体,建立桃遗传转化再生体系.结果表明:花后50 d的胚均能诱导出愈伤组织,并可分化出不定芽.胚愈伤组织诱导培养基以MS+6-BA0.25 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L的效果最好,平均诱导率可达99.8%.将胚愈伤组织接种在培养基MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L上,愈伤组织转变为致密型,不定芽分化率为37.5%.将不定芽用100 mg/LIBA浸蘸其基部转移到不含激素的1/2 MS培养基中诱导生根,生根率为82.0%.花后75d的成熟胚不定芽的直接诱导率达到96.1%.     

牡丹‘凤丹’体细胞胚发生技术

为建立牡丹‘凤丹’体细胞胚发生培养体系,以牡丹‘凤丹’的合子胚、胚轴和子叶为外植体进行离体培养,研究了种胚发育时期不同质量浓度蔗糖处理及不同的培养基对牡丹体细胞胚发生的影响,结果表明,花后110 d是体细胞胚直接诱导合适的发育时期,诱导率为33.00%,3种外植体中,种胚的诱导率最高;利用质量浓度为90 g.L-1的蔗糖溶液处理种胚2 h,体细胞胚诱导效果最好,在MS+2,4-D 2.0 mg.L-1+6-BA 2.0 mg.L-1培养基上获得较高的体细胞胚,诱导率为38.33%。     

攸县油茶胚状体发生及其组织学观察

[目的]研究以攸县油茶(Camellia yuhsienensis Hu)成熟子叶为外植体的胚状体发生情况。[方法]以子叶为外植体,接种于MS+2.0mg/L2,4-D+1.0mg/LKT培养基上,诱导胚性愈伤组织。胚性愈伤组织块转接至以MS为基本培养基,添加不同浓度6-BA和NAA的激素组合的培养基上诱导产生胚状体。取不同发育阶段的组织块制作石蜡切片,进行组织学观察。[结果]成熟子叶块接种于诱导培养基MS+2.0mg/L2,4-D+1.0mg/LKT,15d左右开始出现胚性愈伤组织。胚性愈伤组织转接至培养基为MS+2.0mg/L6-BA+0.6mg/LNAA时胚状体诱导率最高,为87.78%;无激素培养基也能诱导胚性愈伤组织产生胚状体,但诱导率极低,仅为6.67%。组织学观察表明,胚性细胞由愈伤组织表面及其内部邻近的若干细胞分化而来,经过球形胚、心形胚、子叶形胚等不同发育阶段直至成熟胚状体。[结论]诱导胚性愈伤组织分化为胚状体的最佳培养基为MS+2.0mg/L6-BA+0.6mg/LNAA。     

棉花体细胞胚萌发及植株再生的研究

对棉花体细胞胚萌发规律及其影响因素进行研究结果,棉花体细胞胚的葫发可分为3种类型:①先出根,后出芽;②先出茅,后出根;③根、芽平衡生长,且3种类型所占的比例不同.不同基础培养基、不同激素种类和浓度,以及不同蔗糖浓度对棉花体细胞胚的萌发和植株再生的影响不同.BT培养基有利于根的发育,MS培养基有利于芽的发育,而SH培养基则有利于根、芽的平衡生长.KT的使用显著降低了棉花体细胞胚的生根率、生芽率、葫发率及再生植株率.低浓度的NAA有利于胚的葫发和再生植株,其最佳浓度为0.1 mg/L;MS培养基中添加0.1mg/L NAA,可使芽的分化率提高83.3%,再生植株率提高50.0%;而高浓度的NAA又抑制了芽的发育.在棉花体细胞胚萌发中蔗糖的最佳使用量为20g/L.