花生子叶不定芽的诱导和组织细胞学观察

以MS＋6.79μmol/L2,4-D＋22.19μmol/L6-BA为诱导培养基,以花生成熟种子子叶为外植体,诱导出大量丛生芽和少量体细胞胚;组织细胞学观察发现,子叶外植体不经过愈伤组织,直接诱导分化出丛生芽和体细胞胚,属于直接发生途径;并且子叶丛生芽和体细胞胚起源于外植体表皮或皮层细胞,为外起源方式。     

甜瓜红心脆和早皇后再生体系的建立

为了初步筛选出适宜诱导甜瓜红心脆、早皇后子叶和下胚轴愈伤组织和不定芽的培养基,以及筛选适宜其不定芽伸长和生根的培养基,采用组织培养的方法,以甜瓜红心脆和早皇后种子为材料、子叶和下胚轴为外植体,进行添加不同浓度6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)、吲哚乙酸(IAA)激素组合的MS培养基诱导愈伤组织和不定芽、不定芽伸长、芽生根的研究。试验结果表明,MS+0.5 mg/L IAA、MS+1.0 mg/L IAA培养基不利于红心脆子叶愈伤组织的诱导,其余培养基均有利于其子叶和下胚轴愈伤组织的形成;MS和MS+0.3 mg/L IAA培养基不利于早皇后子叶愈伤组织的形成,MS培养基不利于其下胚轴愈伤组织的诱导,其余培养基均有利于其愈伤组织的形成;适宜诱导红心脆子叶不定芽的培养基是MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L IAA、MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IAA,适宜诱导早皇后子叶不定芽培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA;适宜诱导红心脆、早皇后下胚轴不定芽的培养基分别为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA、MS+0.3 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IAA;MS+0.5 mg/L 6-BA、MS+1.0 mg/L IAA培养基分别适宜红心脆、早皇后不定芽伸长;2个品种适宜的生根培养基均是1/2MS+1.0 mg/L IBA。研究初步建立了甜瓜红心脆、早皇后的再生体系,为其遗传转化研究作了准备。     

植物激素对无籽西瓜丛生芽诱导的影响

[目的]对无籽西瓜的组织培养技术进行探索。[方法]以墨童无籽西瓜子叶作为外植体,分别置于添加不同浓度6-BA、NAA、IBA、KT的MS培养基中诱导愈伤组织、丛生芽及丛芽的伸长。[结果]浓度0.3~1.2 mg/L6-BA、NAA均能诱导愈伤组织;浓度0.6~2.5 mg/L6-BA、IBA均能诱导丛生芽;浓度0.2~1.0 mg/LKT均能诱导丛生芽伸长。[结论]诱导无籽西瓜愈伤组织的最佳培养基为MS＋NAA1.0 mg/L＋6-BA0.5 mg/L,诱导丛生芽的最佳培养基为MS＋6-BA2.0 mg/L＋IBA0.8 mg/L;诱导丛生芽伸长的最佳培养基为MS＋KT0.2 mg/L。     

攸县油茶胚状体发生及其组织学观察

[目的]研究以攸县油茶(Camellia yuhsienensis Hu)成熟子叶为外植体的胚状体发生情况。[方法]以子叶为外植体,接种于MS+2.0mg/L2,4-D+1.0mg/LKT培养基上,诱导胚性愈伤组织。胚性愈伤组织块转接至以MS为基本培养基,添加不同浓度6-BA和NAA的激素组合的培养基上诱导产生胚状体。取不同发育阶段的组织块制作石蜡切片,进行组织学观察。[结果]成熟子叶块接种于诱导培养基MS+2.0mg/L2,4-D+1.0mg/LKT,15d左右开始出现胚性愈伤组织。胚性愈伤组织转接至培养基为MS+2.0mg/L6-BA+0.6mg/LNAA时胚状体诱导率最高,为87.78%;无激素培养基也能诱导胚性愈伤组织产生胚状体,但诱导率极低,仅为6.67%。组织学观察表明,胚性细胞由愈伤组织表面及其内部邻近的若干细胞分化而来,经过球形胚、心形胚、子叶形胚等不同发育阶段直至成熟胚状体。[结论]诱导胚性愈伤组织分化为胚状体的最佳培养基为MS+2.0mg/L6-BA+0.6mg/LNAA。     

番茄宝大906高频再生系统的建立及其潮霉素选择压的测定

以番茄宝大906品种为试材,通过对其子叶、下胚轴的离体培养,研究了不同6-BA/NAA植物生长物质浓度配比对愈伤组织诱导、不定芽再生及生根的影响.另外,还测定了潮霉素选择压.结果表明:以子叶和下胚轴为外植体诱导愈伤组织的最适培养基分别是MS+ 2.0 mg,/L 6-BA+ 0.1 mg/L NAA和MS+ 2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/LNAA;诱导芽分化的最适培养基均为:MS+ 2.0 mg/L 6-BA+ 0.1 mg/L NAA,子叶的芽分化率高达93.5％;不定芽适宜的生根培养基为MS+0.1 m g/L NAA;子叶、下胚轴的潮霉素选择压分别以20、40 mg/L为宜.     

辣椒的离体培养及再生体系研究

以辣椒子叶、真叶、下胚轴为外植体材料进行离体培养,结果发现,以子叶为培养材料最理想。在MS附加不同激素配比的培养基上,对不定芽分化、伸长及伸长不定芽生根诱导研究的结果表明,最适合芽分化的培养基为MS+6-BA 5.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L,芽伸长最优组合为MS+ZT 2.0 mg/L+GA2.0 mg/L;不定芽伸长后在1/2 MS+NAA 0.1~0.3 mg/L培养基上生根效果最好。     

叶用芥菜细胞悬浮培养的初步研究

以叶用芥菜的子叶为外植体,对愈伤组织诱导和细胞悬浮培养的技术体系进行了研究。结果表明愈伤组织诱导的最适培养基为MS+0.3mg/LNAA+1.0mg/L6-BA+0.1mg/L2,4-D,愈伤组织最佳增殖培养基为MS+3.0mg/L6-BA+1.0mg/L2,4-D。悬浮培养过程中细胞生长曲线呈S型,培养2-10d达对数生长期。将小细胞团接种于MS+1.0mg/LNAA+3.0mg/L6-BA分化培养基上,继代两次后,分化出芽,分化芽在培养基MS+0.1mg/LNAA上诱导生根,形成小植株。     

柠檬罗勒丛生芽诱导和植株再生的研究

以柠檬罗勒的子叶、茎尖和下胚轴为外植体,进行丛生芽诱导试验,研究不同外植体、不同激素质量浓度对柠檬罗勒离体培养的影响,筛选出了最适丛生芽诱导、继代增殖和生根培养基.结果表明:以MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L的丛生芽诱导率最高,且苗健壮;继代培养中,从丛生芽诱导培养基中选择芽生长较好的培养基作为继代培养基,进行继代扩繁;在生根阶段,以1/2 MS+IBA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L生根效果最好,生根率达100%.     

牡丹种胚离体培养的研究

以牡丹的种胚为外植体,探讨了不同生长调节剂及其不同浓度和低温层积处理在种胚的萌发、增殖和生长过程中所起的作用,分析了不同激素浓度对种胚的生长影响。结果表明,以MS培养基为主,胚培养最佳培养基为MS+6-BA2.5 mg/L+NAA1.0 mg/L,胚苗继代培养最适培养基为MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.5 mg/L。低温层积处理对成熟胚丛生芽诱导影响显著,层积40 d的种胚具有较高的丛生芽诱导率,达到45.82%,而10、20 d丛生芽诱导率较低。     

花生胚小叶体细胞植株再生系统的建立

[目的]研究花生胚小叶体细胞植株再生体系,为利用胚小叶进行外源基因遗传转化提供试验依据。[方法]以花生品种四粒红和改良海花的胚小叶为外植体,2种外植体取材方式(预培养和直接取材)为培养背景,探讨了不同取材方式下各个培养要素(基因型、培养基等)与脱分化、再分化的关系,初步建立了花生胚小叶体细胞植株再生体系。[结果]在预培养取材条件下,预培养6d的四粒红外植体在2号培养基(MS+3mg/L6-BA+1mg/LNAA)上分化得最好,每愈伤组织再生芽2.34个,预培养5d的改良海花外植体在1号培养基(MS+5mg/L6-BA+3mg/LNAA)上分化最佳,每愈伤组织再生芽2.08个。直接取材条件下,改良海花在1号培养基上每愈伤组织出芽数为6个,而四粒红为3个。直接取材在诱导愈伤组织及器官分化方面都好于预培养取材。[结论]直接取材条件下,不同培养基对诱导愈伤组织及芽分化的作用差异较大,而基因型在诱导愈伤组织上的作用有显著差异,在出芽率上的作用差异并不显著。     

玉米植株生长叶片组织的离体培养研究

以玉米植株生长叶片组织作为外植体,无菌条件下接种于MS+1.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA培养基,培养8d,叶片细胞逐渐增殖培养生成芽苗;将芽苗接种于MS+0.5mg/L6-BA+0.8mg/LNAA培养基,培养7d,芽苗周围诱导出玉米幼苗;将玉米幼苗转接入含0.8mg/LNAA的MS培养基中,培养8d,幼苗诱导生根,形成完整的玉米组织培养植株。     

快速离体培养万寿菊植株叶片组织

取万寿菊植株生长状态的叶片组织作为外植体,无菌条件下接种于MS+1.2mg/L 6-BA+0.9mg/LNAA的培养基中培养7d,叶片细胞逐渐增殖培养生成芽苗;将芽苗切割分离接种于MS+0.6mg/L6-BA+1.0mg/LNAA培养基中进行无菌培养,5d后,芽苗周围诱导出万寿菊幼苗;将万寿菊幼苗转接入含植物激素0.5mg/L NAA的MS培养基中,培养6d后,幼苗诱导生根,形成完整的万寿菊组织培养植株。     

夏威夷菠萝高效再生体系研究

采用菠萝试管苗的叶片、叶鞘、茎段和茎薄片作外植体,以MS或1/2 MS为基本培养基,应用正交试验设计方法研究了不同浓度的2,4-D、6-BA、NAA和AgNO3对夏威夷菠萝不定芽的诱导效果,并在添加不同激素组合的培养基中进行芽的增殖和生根培养研究.结果表明,茎段为诱导不定芽的最佳外植体,6-BA是影响不定芽产生的最主要因素.其中MS 6-BA 5.0 mg/L 2,4-D 0.5 mg/L NAA 0.3 mg/L AgNO3 2.0 mg/L为不定丛芽诱导的最佳培养基,诱导率为83.3%;MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.05 mg/L为芽增殖的最佳培养基,可分化成绿色小苗;1/2 MS IBA 1.0 mg/L NAA 0.5 mg/L为小苗生根的最佳培养基,生根粗壮,生根率达100%.     

桃遗传转化再生体系的建立与优化

以桃不同胚龄胚为外植体,建立桃遗传转化再生体系.结果表明:花后50 d的胚均能诱导出愈伤组织,并可分化出不定芽.胚愈伤组织诱导培养基以MS+6-BA0.25 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L的效果最好,平均诱导率可达99.8%.将胚愈伤组织接种在培养基MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L上,愈伤组织转变为致密型,不定芽分化率为37.5%.将不定芽用100 mg/LIBA浸蘸其基部转移到不含激素的1/2 MS培养基中诱导生根,生根率为82.0%.花后75d的成熟胚不定芽的直接诱导率达到96.1%.     

龙椒2号大甜椒子叶离体培养中诱导不定芽的研究

[目的]采用子叶离体培养方法快速繁殖龙椒2号大甜椒,尤其在诱导不定芽阶段能更快、更多地诱导出不定芽。[方法]在诱导不定芽阶段中以MS为基本培养基,添加不同的激素配比进行对比,以优选出最佳的激素配比方案。[结果]生长素NAA对形成愈伤组织有主导作用,添加量以0.6 mg/L较为合适,6-BA和KT对促进芽分化都能起主导作用,6-BA以0.4 mg/L为宜,KT以1.0 mg/L为宜。[结论]选用子叶切片转入MS＋NAA0.6 mg/L培养基上,诱导出愈伤组织,然后将愈伤组织切块转入MS＋6-BA0.4 mg/L＋NAA0.5mg/L或MS＋KT1.0 mg/L＋NAA0.5 mg/L培养基上,分化出多数量的不定芽,然后利用这些不定芽进一步扩繁、生根,进而形成再生植株。     

栝蒌雌株快繁技术研究

以栝蒌雌株腋芽为材料,对其诱导培养、丛生苗增殖培养及生根培养等方面进行研究。结果表明:MS+6-BA 1.5 mg/L最适合诱导栝蒌茎段腋芽形成;MS+GA 0.5 mg/L+6-BA 1.5 mg/L为最佳继代增殖培养基;1/2MS+NAA 1.0 mg/L为最佳生根培养基。     

海南龙血树组织培养与快速繁殖技术研究

以海南龙血树顶芽或带腋芽茎段为外植体,以MS为基本培养基,分别附加不同植物生长调节剂组合（6-BA3.0～5.0 mg/L和NAA 0.2、0.5 mg/L）进行不定芽诱导;以MS、改良MS（增加N、P、K 3种元素）为基本培养基,分别附加6-BA3.0 mg/L、NAA 0.2 mg/L进行丛生芽增殖培养;采用1/2MS培养基为基本培养基,分别附加NAA 0.5 mg/LI、BA 0～1.0mg/L进行生根培养。结果表明,海南龙血树不定芽诱导最适培养基是MS＋6-BA 3.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L;丛生芽适宜增殖培养基为改良MS＋6-BA 3.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L,增殖系数为3.8;最适生根培养基为1/2MS＋NAA 0.5 mg/L＋IBA0.4～0.6 mg/L,生根率100.0%。将生根苗移栽至混合基质（60%塘泥＋40%河沙）中,约1周后可萌生新根,移栽成活率达90.0%以上。     

彩色辣椒愈伤组织的诱导与植株再生

分别以彩色辣椒茎尖、子叶、上胚轴、下胚轴为外植体进行离体培养,结果发现,子叶较易诱导愈伤组织。在MS附加不同浓度配比的6-BA和NAA培养基上,对子叶进行分化及生根诱导研究的结果表明,彩色辣椒子叶芽的分化受6-BA和NAA浓度的影响,最适合芽分化的培养基为MS 6-BA 3.0 mg/L NAA 0.5 mg/L,最适生根培养基为1/2MS NAA 1.0 mg/L。     

三角紫叶酢浆草离体培养植株的再生研究

以三角紫叶酢浆草的叶片、叶柄为外植体进行了组织培养试验研究。结果表明 :MS +BA 1.0mg/L +KT 0 .5mg/L +NAA 0 .5mg/L+IBA 0 .0 5mg/L为诱导叶片不定芽分化的最佳培养基配方 ;MS +KT 1.0mg/L +NAA 0 .5mg/L +IBA 0 .5mg/L为诱导叶柄不定芽分化的最佳培养基配方 ;MS + 6 BA 1.5mg/L +NAA 0 .2mg/L有利于试管苗的增殖 ,在 1/2MS +NAA 0 .2mg/L的培养基中生根效果最好。