狂犬病Flury HEP株的复制及其某些生物学性质的观察

狂犬病ＦｌｕｒｙＨＥＰ株弱毒在ＢＨＫ（２１）细胞上连续传代，培养物经中和试验、间接荧光抗体染色、电镜观察、动物试验、病毒增殖和抗体消长曲线的测定，证明该弱毒株可在ＢＨＫ（２１）细胞上良好地复制。传至二代以后毒价可达到１０（－５）／０．０３ｍｌ。该毒经兔、犬、山羊、牛试验显示了其安全性。免疫后７天即可见到抗体阳转。免疫犬后，血清中和抗体在二年半时间内维持在一个较高的水平。     

狂犬病（HEP／BHK_（21））活疫苗免疫期试验

应用效价为１０（－４．５０）ＭＩＣＬＤ（５０）／０．０３ｍｌ的狂犬病ＨＥＰ／ＢＨＫ（２１）活毒疫苗免疫犬后，对免疫前和免疫后１、３、６、１２、３０个月血样进行了血清学评价和免疫原性分析。１５只犬免疫１月后，血清抗体全部阳转，６６％的犬在３０个月后抗体仍维持在一个较高水平。免疫１年后９０％以上的动物能够得到保护。统计表明，不同地区、不同性别、不同年龄的犬免疫反应无显著差异，但三月龄以下犬反应欠佳。     

中国对虾（Penaeusorientalis）胚胎及无节幼体低温贮存的初步研究

本文论述了用ＤＭＳＯ做为保护剂，消毒海水（盐度３０．４×１０~(－３)，ｐＨ８．６）为冷冻介质，对中国对虾胚胎及无节幼体的低温冷冻贮存方法进行的研究，当冷冻速度为１℃／ｍｉｎ时，解冻后，胚胎的完好率最高、达８４．５％（对照组９８．６％）．不同浓度的ＤＭＳＯ（５～５０×１０~(－２)）做为保护剂，以上述冷冻速度对胚胎进行冷冻，液氮中保存，其存活率均很低。Ｎ４、Ｎ５期幼体最适于低温冷冻贮存，当冷冻速度为１℃／ｍｉｎ、冷冻至－２０℃（ＤＭＳＯ浓度为７．０×１０~(－２)）保存，存活率为１００％，－４０℃（ＤＭＳＯ浓度为１６．７×１０~(－２)）保存，存活率为７９．７％，至该温度后投入液氮中保存，成活率为３６．１％。其他各期无节幼体冷冻后存活率都很低。     

5－Br－PADN双峰双波长法测定铁（Ⅲ）

研究５－Ｂｒ－ＰＡＤＮ与铁（Ⅲ）的显色反应，在ｐＨ９．０～９．４范围内，当有１０％ＳＤＳ存在时，铁（Ⅲ）与５－Ｂｒ－ＰＡＤＮ形成１：４的稳定配合物。λ＿（ｍａｘ）为５３４ｎｍ，ε为５．１３×１０￣４Ｌ·ｍｏｌ￣（－１）·ｃｍ￣（－１），铁（Ⅲ）浓度在０～１２．５×１０￣（－４）ｇ／Ｌ范围内符合Ｂｅｅｒ定律，用双峰双波长法测定茶叶中痕量铁（Ⅲ），结果满意。     

鸡新城疫病毒V4株一些特性的研究

对鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）Ｖ４株的毒价、血凝（ＨＡ）稳定性和致病指数进行了研究，结果显示ＮＤＶＶ４株的毒价（ＥＩＤ）为１０－８．３～１０－１０．１／０．１ｍＬ，２５℃存放２８ｄ、３７℃存放１２ｄ及反复冻融７次ＨＡ滴度不变，其１日龄雏鸡脑内接种、６周龄鸡静脉接种发病指数和鸡胚平均致死时间分别为：ＩＣＰＩ＝０．００，ＩＶＰＩ＝０．００，ＭＤＴ＞１５０ｈ     

5－溴水杨基荧光酮－Co（Ⅱ）－CTMAB的吸附伏安行为

在ｐＲ４．０的磷酸盐缓冲溶液中，５－溴水杨基荧光酮－Ｃｏ（Ⅱ）－ＣＴＭＡＢ可形成稳定的三元配合物．将此配合物预富集在玻碳电极表面，阴极溶出时可产生一个灵敏的吸附还原波，其还原峰电位在－０．７６Ｖ．峰电流与钴（Ⅱ）的浓度在５．０×１０－５－１．０×１０－７ｍｏｌ／Ｌ之间有良好的线性关系．     

柔鱼加工中酶法去皮工艺条件的研究

使用Ａ．Ｓ１．３９８蛋白酶除去北平洋柔鱼表皮，操作简便，快速，成品色白，完整，试验结果表明，较为合适的柔鱼酶法去皮工艺条件是：ｐＨ６．５－７．５、酶液浓度１．５－２．０％，料液比１：４ｇ／ｍｌ，酶液温度５０－５３℃，氯化钙添加量０．０５－０．１０％。     

柔鱼加工中酶法去皮工艺条件的研究

使用Ａ．Ｓ１．３９８蛋白酶除去北平洋柔鱼表皮，操作简便，快速，成品色白，完整，试验结果表明，较为合适的柔鱼酶法去皮工艺条件是：ｐＨ６．５－７．５、酶液浓度１．５－２．０％，料液比１：４ｇ／ｍｌ，酶液温度５０－５３℃，氯化钙添加量０．０５－０．１０％。     

新杀虫剂89－1对棉铃虫致死中浓度（LC_（50））及田间防治效果

由四川省化工研究设计院新合成的杀虫剂８９─１，对棉铃虫（末龄幼虫）的ＬＣ_（５０）为２３０±５．５ｐｐ，乐果乳油为６２５±６．４ｐｐｍ，８９─１的毒力高于乐果１．７倍。田间防治试验表明，３０％８９─１乳油７５０－防治棉铃虫效果令人满意，施药３天以后防效为８０％以上，１０天后防效为８６．４％，与当前防治铃虫的优秀农药２５％喹硫磷１０００×防效相当，大大优于４０％乐果乳油７５０×的防效。     

鸡新城疫病毒V4株一些特性的研究

对鸡新城疫病毒Ｖ４株的毒价，血凝稳定性和致病指数进行了研究，结果显示ＮＤＶ Ｖ４株的毒价（ＥＩＤ）为１０＾－￣１０＾１０．１／０．１ｍＬ，２５存放２８ｄ，３７℃存放１２ｄ及反复冻融７次ＨＡ滴度不变，其１日龄雏鸡脑内接种，６周龄鸡静脉接种发病指数和鸡胚平均致死时间分别为：ＩＣＰＩ＝０．００，ＩＶＰＩ＝０．００，ＭＤＴ〉１５０ｈ。     

鸡新城疫活疫苗室温保存工艺的初步研究

选用海藻糖、明胶、PVP等成分配制耐热保护剂,采用梯度真空干燥方法,将鸡新城疫病毒(La Sota株)进行泡沫干燥,通过37℃10 d耐老化试验筛选到配方T5的病毒滴度损失为0.2 Lg;NDV-T5泡沫干燥疫苗经DSC测定配方玻璃化转变温度Tg为56.45℃,扫描电镜观察可见较为规则的片状结构;NDV-T5在各温度耐热性能均较好,2℃~8℃保存24个月,25℃保存15个月、37℃保存5个月,病毒含量下降≤1.0 Lg;将不同保存温度的NDV-T5泡沫干燥疫苗免疫1月龄雏鸡,鸡只均能在免疫后14 d产生抗体,与现有商品疫苗效力相当。     

猪繁殖与呼吸综合征疫苗室温保存工艺的研究

为了提高猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）弱毒活疫苗的耐热性能,用蔗糖、胰蛋白胨、EDTA、乳糖等成分配伍成不同组方,对PRRS病毒进行梯度真空泡沫干燥。37℃ 10 d耐老化试验结果表明,组方T28C-1、T28C-4、T28C-5和T28C-7的病毒损失均＜0.5 Lg;疫苗长期保存期试验结果表明,T28C-4、T28C-5在37℃可保存4个月,25℃及自然条件下可保存5个月以上;将37℃、25℃及4℃下保存3个月的T28C-4干燥疫苗免疫20日龄仔猪,免后2周ELISA抗体水平合格且与商品苗趋势相当。试验结果表明PRRSV泡沫干燥疫苗有很好的耐热效果。     

禽流感油乳剂灭活疫苗的研制及应用

采用分子生物学技术,用陕西省部分地区自然发病鸡群分离鉴定的AIV毒株,按不同的抗原含量研制成AIV的双价油乳剂灭活疫苗进行质量检验和安全试验。结果表明:该灭活疫苗符合兽药生物制品规程的要求;免疫易感鸡后3～5 d出现HI抗体,14 d达1:128以上,21～30 d达到高峰(1:1024),并维持3～6个月(1:256);用同源AIV毒株攻毒,5 d产生保护力,7 d达100%(5/5),保护期为9个月;疫苗4℃保护期暂定12个月。区域性免疫试验,免疫后第14 d抽血检验HI滴定在(1:128)以上。使用安全,效果可靠。     

新型猪瘟耐热活疫苗冻干工艺设计及放大研究

为了筛选耐热、安全的猪瘟活疫苗冻干工艺,探索工艺放大规律,为耐热冻干工艺从实验室到生产提供理论依据和技术支撑。根据新型猪瘟耐热配方的热参数科学设计冻干程序,通过冻形、加速耐老化实验、残余水分等指标筛选冻干程序并进行工艺放大。结果表明,新型猪瘟耐热活疫苗溶液的共晶点为-26.4℃、塌陷温度-22.4～-20.4℃,筛选得到冻干程序3,当预冻温度为-42℃,主干燥温度为-10℃时为最优曲线。将程序3在0.15 m~2—0.5 m~2—2 m~2进行逐级工艺放大摸索,规模放大3倍(0.5 m~2)时程序可不变,放大到13倍(2 m~2)时需在主干燥阶段下调隔板温度、延长干燥时间。采用新型猪瘟耐热配方及程序3制备的冻干活疫苗产品可在37℃保存20 d、45℃保存14 d;动物实验安全。上述结果表明成功筛选出新型猪瘟耐热配方的配套冻干工艺,并实现了工艺的逐级放大。     

SPF产蛋鸡IB HI抗体滴度与攻毒保护的相关性试验

[目的]探讨SPF产蛋鸡IB HI抗体滴度与攻毒保护之间的相关关系。[方法]将SPF产蛋鸡随机分成A1、A2、B1及B2 4组,A1组用H120活疫苗免疫,A2组先用H120活疫苗免疫后再用鸡新城疫—传染性支气管炎—减蛋综合征三联灭活疫苗加强免疫,B1组为不免疫攻毒对照组,B2组为正常对照组。在免疫前后对试验鸡定期采血,测定IB HI抗体。当鸡群产蛋达高峰时,A1、A2及B1组试验鸡用IBVM41株强毒攻击,观察各试验组鸡临床表现,记录鸡只产蛋情况。[结果]H120活疫苗免疫后第30天,HI抗体滴度达4.45log2;用三联苗加强免疫后第30天HI抗体滴度达7.35 log2;攻毒前A1、A2、B1及B2组试验鸡IB HI抗体滴度分别为4.24 log2、7.4log2、2.1 log2和2.1 log2;攻毒后,A1组个别试验鸡出现了短暂的呼吸道症状,产蛋下降11.7%;B1组试验鸡出现了明显的呼吸道症状,产蛋下降30.9%,并出现较多的软壳蛋、无壳蛋及畸形蛋等;而A2组和B2组试验鸡的产蛋始终均保持正常。将攻毒后不同IB HI抗体滴度的SPF产蛋鸡的产蛋情况进行统计分析证明,当鸡只的IB HI抗体滴度≥6 log2时,攻毒对产蛋率没有影响;抗体滴度为5 log2时,产蛋下降6%;抗体滴度为4 log2时,产蛋下降11.3%;抗体滴度≤3 log2时,产蛋下降29.6%。[结论]产蛋鸡的IB HI抗体滴度与攻毒保护力有很大关系。     

鸡传染性法氏囊病高免血清的制备与检验

[目的]探索一种新的制备鸡传染性法氏囊病高免血清的方法。[方法]采用IBDV灭活苗对27日龄SPF鸡作基础免疫,活疫苗作3次加强免疫,四免后21 d采血制备高免血清。[结果]试验结果表明随着免疫次数的增加,试验鸡IBD中和抗体滴度逐步增加,一免和二免后中和抗体分别为12 log2和13 log2,三免和四免后中和抗体达到最高值15 log2。[结论]采用该方法免疫SPF鸡,有效保护了法氏囊不受损伤,3次免疫即可获得高效价的IBDV抗血清。     

应用非脂佐剂提高鸡新城疫(ND)Ⅱ系弱毒疫苗效力的研究

2,4日龄雏鸡接种非脂佐剂苗进行首免后,HI抗体滴度的升高不受母源抗体的干扰,注射该苗雏鸡的HI抗体滴度极显著地高于Ⅱ系苗接种组(p>0.01);HI抗体滴度下降至有效滴度以下的时间也优于Ⅱ系苗组。人工感染IBD造成免疫缺陷的雏鸡接种非脂佐剂苗,能够使其HI抗体滴度达到健康雏鸡单独应用Ⅱ系苗的水平(p>0.05)。非脂佐剂苗的保护力明显高于Ⅱ系苗(p>0.05),并且非脂佐剂苗具有Ⅱ系苗同样的安全性。当母源抗体降为零或给雏鸡二免时,非脂佐剂苗无明显提高HI滴度的作用,与Ⅱ系苗组相比较,差异不显著(P>0.05)。非脂佐剂苗免疫雏鸡和Ⅱ系苗免疫雏鸡具有相同的细胞免疫水平(p>0.05)。     

不同温度下蓝舌病病毒的毒价变化研究

[目的]为蓝舌病病毒的长期保存奠定基础。[方法]在70、-20、4和20℃下保存蓝舌病病毒1个月后,测定其毒价变化,研究不同温度对蓝舌病病毒毒价的影响。[结果]在室温和4℃下保存1个月后蓝舌病病毒毒价保持不变。在-70℃下保存1个月后蓝舌病病毒毒价从原来的5.5降至4.2。在-20℃下保存1个月蓝舌病病毒毒价变化最大,从原来的5.5降至2.8。[结论]长期保存时,应将蓝舌病病毒在-20℃下保存。     

猪细小病毒灭活疫苗NJ株毒种分离及鉴定

为防控猪细小病毒病,进行了猪细小病毒灭活疫苗毒种研究。将南京某猪场初产母猪流产胎儿的脾、肺等组织病料处理后接种ST细胞培养,获得了1株猪细小病毒强毒,将分离毒株适当稀释接种ST细胞,经3轮蚀斑纯化获得1株纯净的猪细小病毒NJ株(PPV-NJ株),作为疫苗毒株。将NJ株接种ST细胞培养连续传15代,每代次病毒效价均不低于1 ml 107.25TCID50、血凝素效价不低于29。选择第5代病毒液,灭活后与矿物油佐剂混合乳化制成灭活疫苗,以不同剂量分别免疫豚鼠和后备母猪,用血凝抑制试验(HI)和ELISA检测抗体效价。分别用剂量0.125 ml、0.250 ml和0.500 ml疫苗免疫豚鼠28 d后,各免疫组HI抗体效价均高于28,0.5 ml组HI抗体效价高达211,ELISA抗体均显示阳性(OD630≥0.32),分别用剂量0.5 ml、1.0 ml和2.0 ml疫苗免疫后备母猪后,HI检测结果显示,3个剂量组免疫后1周HI抗体效价高于26,3周后达峰值,至免疫后4个月略有下降,2.00 ml剂量组HI效价最高(211.75)。ELISA检测结果显示,各剂量组在免疫后1周均转阳(OD630≥0.32),免疫后4～18周均维持较高水平。HI抗体效价和ELISA抗体水平与免疫剂量均呈正相关性。结果显示,利用NJ株病毒制备的灭活疫苗具有抗体产生快、效价高等特点,显示出良好的疫苗开发前景。