猪胞浆内单精注射胚胎培养过程中DNA甲基化水平变化及B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)的表达

采用Real-time PCR技术,对猪未成熟(GV期)、成熟(MⅡ期)卵母细胞和体外受精(IVF)及胞浆内单精注射(ICSI)2-、4-、8-、16-细胞胚胎和桑椹胚DNA甲基化相关基因(Dnmt1和Dnmt3a)的表达进行检测,并检测胚胎抗凋亡基因B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)表达水平.结果发现,Dnmt1在卵母细胞呈高水平表达;在胚胎发育早期,IVF胚胎和ICSI胚胎的Dnmt1的表达量均急剧降低,可能与胚胎早期的去甲基化有关;与IVF胚相比,ICSI胚胎具有相同的Dnmt1表达趋势,只有在4-细胞时高于IVF胚胎.Dnmt3a在卵母细胞成熟过程中就开始下降,经2-～8-细胞阶段的低水平表达后又开始上升.与IVF胚胎相比,ICSI胚胎8-细胞后Dnmt3a表达量小于IVF胚胎.随着胚胎的不断发育,IVF与ICSI胚胎的抗凋亡基因Bcl-2 mRNA表达量均逐渐下降,且ICSI胚胎的下降趋势更为明显,说明胚胎抑制凋亡的能力下降,有可能是影响胚胎发育的主要原因.     

血管紧张肽Ⅱ在哺乳动物卵巢中的作用

肾素-血管紧张肽系统(renin-angiotensin system,RAS)是哺乳动物体内重要的生理功能调节系统,血管紧张肽Ⅱ(AngⅡ)是RAS发挥功能的主要活性物质。AngⅡ通过与其受体(AT1R和AT2R)的特异性结合,激活细胞内多种信号转导通路,在动物卵巢功能调节过程中起着重要的作用。本文就AngⅡ及其受体在哺乳动物卵巢的分布、作用和发挥作用的信号通路等进行综述。     

细胞核移植技术在研究太湖猪高繁殖性能核外基因效应中的应用

细胞核移植技术细胞核移植技术 ,根据核供体细胞的不同 ,有胚胎细胞核移植、胚胎干细胞核移植、胎儿成纤维细胞核移植和体细胞核移植。以核移植为核心技术的动物克隆技术 ,其基本技术环节除基本显微操作外 ,主要包括供核的分离、受体细胞的去核、核卵重组、重组胚的融合、核移植胚的培养与移植或重复克隆。供体核的分离胚胎细胞用 0 2 %链霉蛋白酶预处理胚胎 ,去胚胎的胶膜及透明带 ,离出单个卵裂球。目前在胚细胞核分离技术中有两大重要进展 :①胚胎干细胞系建立──胚胎干细胞在发育阶段上类似于内细胞团细胞 ,胚胎干细胞系是早期胚胎经…     

小型猪实验化及其在胚胎生物工程领域的应用前景

小型猪实验化在医学和生命科学研究中具有重要意义。通过对小型猪培育的现状与前景、以及小型猪在胚胎生物工程领域的应用进行综述，重点介绍异种器官移植和转基因猪生产。     

南京地区健康犬被毛真菌的分离与菌群调查

本研究旨在通过对南京地区犬被毛真菌的分离与鉴定,调查真菌在该地区犬体的分布。采用分点采毛法,分别从80只健康犬的8个部位采集毛样,进行真菌分离培养。结果表明,供试犬的真菌检出率为100%。在全部640份被毛样本中,共分离真菌598株;未检出真菌的样本152份,占样本总数的23.8%。絮状表皮癣菌、红色毛癣菌和马拉色菌的检出率分别为9.9%(59/598)、6.4%(38/598)和6.0%(36/598)。     

山羊腔前卵泡卵母细胞体外发育的超微结构研究

电镜研究表明，山羊腔前卵泡卵母细胞体外培养７ｄ时，其超微结构基本与发育速度一致。在培养后期（１６ｄ），卵母细胞的超微结构表现了不同的发育阶段，试验中观察到ＧＶＢＤ期，核膜开始部分消失的现象，并记录到１枚成熟卵子老化后的结构特征。但大多数卵母细胞培养结束时，未观察到ＣＧｓ质膜下的排列现象，有的卵母细胞线粒体仍为椭园形，板状嵴，细胞器迁移不完全正常。推测该时期有的卵母细胞部分代谢机能失调，从而导致某些合成（如ＣＧｓ）障碍或某些细胞器的迁移发生障碍。因此，培养后期可能是影响卵母细胞成熟的关键时期。     

哺乳动物腔前卵泡卵母细胞的研究进展

本文简要回顾了哺乳动物腔前卵泡卵母细胞的研究历史，重点讨论了有关理论及方法学问题。     

猪单精注射胚与孤雌胚激活后的发育

用猪的冷冻精液,以不同的激活方法进行猪单精注射(ICSI)胚胎的生产.结果表明,联合应用电激活和化学激活所获ICSI胚卵裂率(79.28%)明显高于单纯电激活组卵裂率(58.77%),但两组桑囊胚发育率无统计学差异(31.58%对22.67%),电化学联合激活较单纯的电激活更有利于ICSI胚胎的发育.通过比较孤雌电激活胚与ICSI胚胎的发育情况,发现孤雌激活胚与ICSI胚在卵裂率、桑囊胚发育率上均无显著差异,表明现有实验电激活参数完全适用于猪ICSI胚胎的体外生产.     

细胞骨架在猪GV期与MⅡ期卵母细胞的分布规律

采用免疫荧光技术,在激光扫描共聚焦显微镜下观察并分析猪GV期和MⅡ期卵母细胞的细胞骨架分布。结果发现,猪新鲜GV期与MⅡ期卵母细胞的微管、微丝和染色体结构与分布,具有不同的特点和规律。在GV期卵母细胞,结构完整的微管尚未形成;染色体未发生致密化,仍存在于生发泡内;而微丝则分布于质膜下及整个胞质中。MⅡ期卵母细胞的微管,主要存在于纺锤体上,少量微管出现在第一极体周围;染色体排列于纺锤体赤道板上;微丝均匀分布于质膜下。本研究表明,微管、微丝和染色体三者间密切联系、相互作用,共同参与卵母细胞成熟与发育进程的调控。