黑龙江省绥芬河市野猪血清常见疾病抗体监测

[目的]了解绥芬河地区野生野猪曾感染过的常见传染病。[方法]对采集的24份血清样品进行猪瘟、蓝耳病、伪狂犬病、传染性胃肠炎、圆环病毒病、细小病毒病等6种疾病的抗体检测。[结果]发现24份野生野猪血清中:猪瘟抗体阳性样品1份,猪细小病毒抗体阳性样品22份,猪蓝耳病、伪狂犬病、传染性胃肠炎、圆环病毒2型抗体阳性样品均为0份。[结论]绥芬河地区野生野猪曾感染过猪瘟和细小病毒病。     

集约化养猪12种疫病的血清学调查

在张掖市山丹、民乐、甘州、临泽和高台5个农区县(区),对种公猪、繁殖母猪、1~35日龄哺乳仔猪、35~70日龄保育仔猪和70日龄以上育肥猪应用血清学Dot-ELISA、LAT、IHA、PAT等试验方法,分别进行了猪瘟、猪狂犬病、猪细小病毒病、猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病毒病、猪流行性乙型脑炎、猪传染性胸膜肺炎、猪萎缩性鼻炎、猪喘气病、衣原体病、弓形体病、布氏杆菌病12种疫病的抽样调查。结果表明,血清学检测的12种疫病的抗体阳性检出率分别为猪瘟88.64%、猪伪狂犬病49.35%、细小病毒病41.14%、繁殖与呼吸综合征46.61%、圆环病毒病36.21%、乙脑11.24%、传染性胸膜肺炎42.09%、萎缩性鼻炎13.56%、喘气病8.03%、衣原体36.15%、弓形体12.49%、布病3.21%。检出感染疫病11种,其中圆环病毒病、传染性胸膜肺炎2种疫病属张掖市首次查出。猪的生长发育阶段不同,各种疫病的抗体阳性检出率也不尽相同;而且两病或多病混合感染的情况也较严重。通过调查,伪狂犬病、细小病毒病、繁殖与呼吸综合征、圆环病毒病、传染性胸膜肺炎和衣原体病是当前严重危害张掖市规模化养猪生产的主要疫病。     

防控猪免疫抑制的主要技术措施

正1 造成猪免疫抑制的因素当前造成猪免疫抑制的因素主要有两种:一种是传染性因素,主要是各种病毒传染病组成;另一种是非传染性因素,主要是其他各种外部和猪内部的因素。1.1 传染性因素主要有:猪蓝耳病病毒(PRRSV)、圆环病毒2型(pcv-2)、猪瘟病毒(HCV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪流感病毒(SIV)、细小病毒病病毒(PPV)、喘气病(肺炎支原体MPS)、传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)、弓形体病。     

张掖市主要猪疫病流行病学和血清学调查

通过应用流行病学方法,对张掖市农区5县区年饲养300头以上的300个规模养猪场户猪的发病、死亡情况进行了调查,共调查育肥猪127 241头,其中发病16 250头,死亡3 543头,发病、死亡率分别为12.77%、2.78%;应用实验室血清学方法对O型口蹄疫、高致病性猪蓝耳病、猪瘟、伪狂犬病、支原体肺炎、细小病毒病、副嗜血杆菌病、衣原体病、圆环病毒病、乙型脑炎、弓形虫病、传染性胃肠炎、传染性胸膜肺炎和布鲁氏菌病等14种疫病进行了抽样检测。在各县区中,经免疫的O型口蹄疫、高致病性猪蓝耳病、猪瘟和支原体肺炎4种疫病的抗体阳性检出率分别为77.24%、75.59%、81.39%和75.23%,经其父母代免疫而自身未免疫的伪狂犬病的抗体阳性检出率为20.93%,查出细小病毒病、副嗜血杆菌病、衣原体病、圆环病毒病、乙型脑炎、弓形虫病、传染性胃肠炎、传染性胸膜肺炎、布鲁氏菌病等9种感染疫病,其抗体阳性检出率分别为32.82%、35.14%、38.56%、31.73%、28.49%、26.36%、2.81%、2.87%和1.16%,并且两病或多病混合感染的情况较为严重。     

当前猪病流行现状及防制措施

1 当前猪病的主要态势 1.1 病毒的多重感染(混合感染)如:猪蓝耳病+猪圆环病毒-2型感染;猪瘟+伪狂犬病;猪瘟+蓝耳病;猪蓝耳病+猪圆环病毒-2型感染+伪狂犬病:猪蓝耳病+猪圆环病毒-2型感染+伪狂犬病+猪瘟. 1.2 细菌的多重感染如:猪喘气病+猪传染性胸膜肺炎;副猪嗜血杆菌病+链球菌病;猪链球菌病+猪肺疫;猪增生性肠炎+副猪嗜血杆菌病,等等.     

规模养殖猪场主要疫病流行病学和血清学调查报告

为了分析大型猪场的发病情况,笔者应用流行病学方法对6个年生产能力万头以上的规模化猪场猪的发病、死亡情况进行了调查。结果表明,关于发病率和死亡率,种公猪分别为10.0%、3.3%,生产母猪为8.4%、1.8%,哺乳仔猪为20.7%、8.9%,保育仔猪为10.7%、5.9%,育肥猪为8.5%、2.1%。应用实验室血清学方法对O型口蹄疫、高致病性猪蓝耳病、猪瘟、伪狂犬病、支原体肺炎、细小病毒病、副嗜血杆菌病、衣原体病、圆环病毒病、乙型脑炎、弓形虫病、传染性胃肠炎、传染性胸膜肺炎和布鲁氏菌病等14种疫病进行了检测,猪场各生产环节经免疫的O型口蹄疫、高致病性猪蓝耳病、猪瘟、伪狂犬病和支原体肺炎5种疫病的抗体阳性率分别达到76.3%以上;查出细小病毒病、副嗜血杆菌病、衣原体病、圆环病毒病、乙型脑炎、弓形虫病、传染性胃肠炎、传染性胸膜肺炎、布鲁氏菌病等9种感染疫病,其抗体阳性检出率分别为37.5%、37.0%、35.1%、32.6%、29.3%、26.6%、1.6%、1.3%和0.5%。猪的生长发育阶段不同,各感染疫病的抗体阳性检出率也不尽相同,并且两病或多病混合感染的情况较为严重。     

遵义地区猪4种传染病血清学调查

为及时掌握猪病流行动态,2006年10月份以来,我们针对遵义地区7个县(市)部分散养户和规模养殖场进行了猪细小病毒病、传染性胸膜肺炎、圆环病毒病和伪狂犬病的血清学调查,报告如下.     

猪高热综合症的防治策略

猪高热综合症是由多种病原体引起的一种以病猪持续高温、食欲废绝和皮肤发红为主要特征的综合性传染病,主要由猪附红细胞体病、猪伪狂犬病、非典型性猪瘟、蓝耳病、圆环病毒病和传染性胸膜肺炎等引起,多为混合感染或继发感染。     

猪蓝耳病混染症的诊断和防治措施

近年来本人在猪病诊疗实践中,发现猪群单发猪蓝耳病较少,多见猪蓝耳病与其他病毒病或细菌病混染症,如猪蓝耳病与猪瘟混染症,猪蓝耳病与圆环病毒病混染症,猪蓝耳病与伪狂犬病混染症,猪蓝耳病与传染性胸膜肺炎混染症,猪蓝耳病与附红细胞体混染症,猪蓝耳     

猪三种呼吸道病原微生物传染病的诊断与综合防治

<正>在一些养猪基地、养猪专业合作社及农户的猪群中存在猪传染病,主要有猪细小病毒病、猪伪狂犬病、圆环病毒病、猪支原体病、副猪嗜血杆菌病、猪传染性胸膜肺炎放线杆菌病、猪肺疫、钩端螺旋体病、猪链球菌病、弓形体病、附红体病等,其中猪支原体、副猪嗜血杆菌和猪传染性胸膜肺炎放线杆菌等细菌性呼吸道传染性疫病较常见。此类细菌性病原能单独感染,也可能两种或两种以上病原混合感染发病,使疫病临床诊断与防控难度增加。为了防止此类疫病的危害,应根据疫病预防为主、源头     

副猪嗜血杆菌aroA基因的克隆与序列分析及2种三重PCR检测方法的建立

本试验对分离的5株副猪嗜血杆菌进行了"卫星" 生长试验、生化鉴定和PCR检测。通过对aroA基因序列进行分析,发现这5株菌同标准菌株相比,其核苷酸序列相似性为96.3%~99.8%,氨基酸序列相似性为98.2%~99.5%。此外,还建立了分别针对副猪嗜血杆菌(Hps)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)及猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒的三重PCR检测方法;敏感性试验表明,三重PCR最低能检出Hps、PPV、PRV、PCV2的DNA分别为12、16、7.6和6.3 pg。     

猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病毒2型、猪伪 狂犬病病毒混合感染的检测分析

本研究采用RT-PCR方法对2010年12月至2011年11月采集于豫西地区的170份疑似PRRSV感染猪病料进行病原检测,得到102份高致病性PRRSV阳性样本,在此基础上应用PCR方法检测PCV2和PRV的感染情况,并计算混合感染率。试验结果显示,豫西地区PRRS发病猪主要疫病的总混合感染率为58.52%,二重混合感染率为39.21%,三重混合感染率为19.61%,其中PRRSV/PCV2型二重混合感染最严重,混合感染率达33.33%;春夏和秋冬总混合感染率分别为48.57%、81.25%,而且不管是二重还是三重混合感染,秋冬均比春夏更严重,尤其是PRRSV/PCV2/PRV型三重混合感染,秋冬与春夏季节的混合感染率相差较大,分别为37.50%、11.43%;PRRS发病猪从哺乳期到育肥期都有混合感染,混合感染率分别为42.10%、50.00%、100.00%,混合感染程度逐渐加重,主要集中在育肥期;不同发病时期的最高混合感染型也有所不同,其中哺乳期最高混合感染型为PRRSV/PCV2,混合感染率为42.10%,保育期最高混合感染型为PRRSV/PCV2、PRRSV/PCV2/PRV,混合感染率均为22.73%,育肥期最高混合感染型为PRRSV/PCV2/PRV,混合感染率为50.00%。本研究反映了豫西地区PRRS发病猪群与猪圆环2型及猪伪狂犬病的混合感染情况和规律,为该地区PRRS及其混合感染的临床诊治和区域性防控工作的进行提供了理论依据和指导。     

猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒和猪圆环病毒2型多重PCR检测方法的建立与应用

根据GenBank中已发表的猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)、猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)和猪圆环病毒2型 (porcine circovirus type 2,PCV2)基因序列,对各病毒基因区进行同源性分析,确定PPV 的VP2、PRV的 gD、和PCV2的ORF2基因为各病毒的诊断靶序列,设计特异性引物,在建立各病毒单项PCR技术的基础上,优化多重PCR反应条件,建立了3种病毒的多重PCR技术,可同时扩增PPV 313 bp、 PRV 217 bp和PCV2 447 bp的特异性片段。用多重PCR技术与单项PCR技术对比检测试验证明两者的符合率为100％,表明建立的多重PCR检测方法,具有特异、快速、准确的特点,可同时鉴别诊断这3种病毒。从10个发病猪场和门诊病例的病猪采集的211份样品,用建立的多重PCR检测方法,检出PPV阳性42份,阳性率为19.91%;PRV阳性26份,阳性率为12.32%;PCV2阳性56份,阳性率为26.54%;2种以上病毒混合感染25份,混合感染阳性率为11.85%。检测结果表明,山西省猪群已感染这3种疫病。     

规模化猪场主要病毒性疫病的诊断技术研究进展

规模化猪场中,母猪流产时常发生,给养猪户带来巨大的经济损失。引起母猪流产的原因很多,除了非病原性因素如先天性因素、管理因素、营养因素外,目前在养猪业中危害最大的主要是病毒性疫病,主要包括猪瘟、猪繁殖与呼吸障碍综合征、猪细小病毒病、猪伪狂犬病、猪圆环病毒病2型、猪乙型脑炎、猪口蹄疫和猪肠道病毒病。本文从规模化猪场引起母猪流产的病毒性疫病的诊断技术进行探讨综述,从而为规模化猪场主要病毒性疫病的诊断及防制提供参考。     

猪伪狂犬病血清抗体gB-ELISA检测方法的建立

用纯化的猪伪狂犬病病毒gB重组蛋白为抗原,建立了检测猪伪狂犬病血清抗体的gB-ELISA方法。最佳反应条件为：抗原包被浓度为3.15μg/mL,待检血清稀释度为1∶40。该方法对猪圆环病毒病、猪瘟、猪细小病毒病、猪繁殖与呼吸综合征（猪蓝耳病）、猪乙型脑炎、猪布氏杆菌病5种疾病阳性血清和SPF猪阴性血清检测呈阴性反应。批间、批内试验变异系数均不超过8%。用该方法与HerdChek ELISA试剂盒同时对119份血清进行了平行检测,其相对敏感性、特异性和符合率分别为：75%、80.7%和79%。试验结果表明：猪伪狂犬病血清抗体gB-ELISA检测方法具有较高的敏感性和特异性,且重复性好,可用于猪伪狂犬病毒血清抗体检测。     

规模化猪场繁殖障碍性疾病的血清学调查

运用ELISA、LAT和IHA对湖北省2006年度规模化猪场猪伪狂犬病(PR)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪乙型脑炎(JE)、猪细小病毒病(PP)、猪瘟(HC)、猪圆环病毒病(PCV-2)及弓形体病进行了血清学检测。分析调查结果发现PR、PRRS、JE、PP 、HC ５种疾病的免疫抗体平均阳性率分别为84.3%、78.3%、84.7%、58.0%、79.7%。非免PRRSV和PRV野毒的平均感染率分别为55.1%和17.7％,表明PRRSV感染情况比较严重。对58场次发病猪场的541份血清进行PRV、PRRSV、PCV-2混合感染情况的调查发现,规模化猪场中普遍存在二重或三重感染,从而使疾病更加复杂化,给防疫工作带来更大的困难。     

猪五种繁殖障碍性疫病病原体多重PCR的建立及初步应用

为了建立能够同时检测猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪细小病毒(PPV)的多重PCR,并用于猪场感染情况的动态监控以及临床诊断,根据GenBank中已发表的5种病毒的基因序列,针对CSFV的E2、PRRSV的Nsp2、PRV的gB、PCV2的ORF2和PPV的VP2基因,分别设计了特异性引物。在建立的单项PCR基础上,通过优化反应条件,建立了能同时检测5种病毒的多重PCR,并具有较高的灵敏性和良好的特异性。采用建立的多重PCR对127份疑似病猪的扁桃体活体组织进行检测,检出了5种病毒的存在,其中感染2种及以上病毒的样品比例为38.6%(49/127),表明该方法是一种快速、灵敏、高效的病原学检测手段。     

检测PRV野毒株、PCV-2及PPV多重PCR方法的建立及初步应用

根据GenBank中的猪伪狂犬病病毒(PRV)gE、猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF2、猪细小病毒(PPV)VP2基因序列,设计了3对引物,成功建立了检测PRV野毒株、PCV-2和PPV的多重PCR诊断方法,扩增产物分别为288 bp、419 bp、681 bp。敏感性、特异性试验结果显示,该PCR对3种病毒的最低核酸检测量分别为PRV 48.2 pg/L、PCV-2 36.7 pg/L、PPV 0.25 ng/L,而PRV(gE基因缺失株)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、大肠杆菌的扩增结果均为阴性。对87份自然感染病猪样品的检测结果表明,该多重PCR检测结果与单一PCR检测结果完全符合。结果表明,该多重PCR方法具有很好的特异性和敏感性,可用于临床PRV野毒株和gE基因缺失疫苗株、PCV-2和PPV的检测。     

5种猪病多重PCR检测方法的建立

To establish a method for simultaneous detection of classical swine fever virus (CSFV), porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV), pseudorabies virus (PRV), porcine circovirus type 2 (PCV2) and porcine parvovirus (PPV), a multiplex PCR was developed with a set of specific primers designed based on the conserved sequences of CSFV, PRRSV, PRV, PCV2 and PPV. Under the optimized conditions of multiplex PCR,five special fragments of 167 (CSFV),433 (PRRSV),305 (PRV), 559 (PCV2) and 882 bp (PPV) were amplified with a detection limit of 220, 1.6, 72, 400 and 370 pg, respectively. But the multiplex PCR amplification results of swine influenza virus （SIV）, Japanese encephalitis virus （JEV）, Streptococcus suis （SS） and porcine epidemic diarrhea virus （PEDV） were negative．The results showed that the multiplex PCR method was capable of CSFV, PRV, PRRSV, PCV2, PPV infection of single or mixed clinical samples for rapid diagnosis.     

用地高辛标记的核酸探针检测猪伪狂犬病毒野毒感染的研究

利用PCR技术从带有伪狂犬病毒（PRV）gE基因的重组质粒pMD18-T-gE中扩增回收约304bp大小的片段,并制备出地高辛标记的gE基因核酸探针。特异性检测结果表明,该探针能与重组质粒DNA发生特异性杂交,而与对照的PRVBartha-k61株疫苗毒DNA、猪细小病毒（PPV）DNA、猪圆环病毒（PCV）DNA、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRsV）cDNA、猪瘟病毒（CSFV）cDNA的杂交反应均为阴性;敏感性检测结果表明,该探针对PRV野毒的最低检出量为4pg。应用该探针对11份繁殖障碍病料进行了杂交检测,共检出4份阳性病料,该结果与PCR检测结果一致,表明该核酸探针可用于猪伪狂犬病野毒感染的临床诊断。