BV－SIVenv亚单位疫苗接种恒河猴的特异性CD8~＋Tc动态变化

用人ＥＢＶ转化恒河猴的自体Ｂ淋巴细胞，再以表达ＳＩＶ不同抗原成分的重组痘苗病毒ＶＡＣ－ＳＩＶｅｎｖ、ＶＡＣ－ＳＩＶｇａｇ感染，制备５１Ｃｒ释放试验的靶细胞。恒河猴于制备Ｂ淋巴细胞３０ｄ后，皮下接种ＢＶ－ＳＩＶｅｎｖ亚单位疫苗，每只动物１ｍＬ于强化免疫后的３０、６０、９０ｄ，从动物四肢内侧静脉采血，分离淋巴细胞，采用５１Ｃｒ释放试验检测动物体内的ＣＤ８＋Ｔｃ的动态变化。结果：１９只免疫恒河猴中，有３只于强化免疫后呈现明显的ＣＤ８＋Ｔｃ特异性细胞免疫反应，对靶细胞的杀伤活性在１６．７％～２０．２％之间，井可在体内维持３个月之久；在靶细胞数量不变，渐次增加效应细胞时，免疫细胞的ＣＤ８＋Ｔｃ的杀伤活性随数量增加而增强。从而证明该ＳＩＶ亚单位疫苗可使部分（１６％）免疫动物产生较好的特异性细胞免疫反应。     

鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体的应用

通过中和试验证明，Ｂ３４腹水单克隆抗体中和ＩＢＤＶ ＣＡ株和中和效价高达１：４２００００。经１０倍稀释后，能等量中和含毒量为１０＾６．６２５ＴＣＩＤ５０／ｍｌ的ＩＢＤＶ ＣＡ株细胞毒。利用Ｂ３４腹水单克隆抗体建立了ＭＡｂ－ＡＣ－ＥＬＩＳＡ，可用于测定ＩＢＤＶ ＣＡ株细胞的病毒含量，与ＴＣＩＤ５０之间的相关系数为０．９４。     

马杜霉素在鸡组织中残留检测方法的研究：Ⅱ.免疫亲合色谱—酶？…

本文首次报道ＩＡＣ－ＥＬＩＳＡ方法测定鸡组织中马杜霉素的残留。制备针对马杜素的特异性抗体ＩｇＧ和高容量ＩＡＣ柱（Ｉ柱动态柱容量为７１６０ｍｇ．ｍｌ＾－１ｇｅｌ,Ⅱ柱为３７５０ｎｇ．ｍｌ＾－１ｇｅｌ）。组织样品用甲醇提取,经ＩＡＣ柱分离纯化,ＥＬＩＳＡ检测,即ＩＡＣ－ＥＬＩＳＡ方法。本试验揭示,能组织样本提取纯化稀释液为介质制备扔标准曲线,其Ｉ５０值和斜率与以ＰＢＳＴ－１０％甲醇为介质的标准曲线相符     

鸡肾型传染性支气管炎病毒弱毒株的选育

从南京地区分离的肾病变型传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）经ＳＰＦ鸡胚连续传代至６５代时,对雏鸡无致病性,命名为ＩＢＶ－ＡＴ６５,感染鸡胚的ＥＩＫ５０为１０＾－７．６６/０．２mＬ,鸡胚于接种后５１h开始死亡,存活鸡胚表现为发育受阻、卷缩,肾脏有尿酸盐沉积,其尿囊液对１％鸡红细胞凝集反应为阴性。用ＡＴ６５原液０．２mＬ分别于气 管内接种１０日龄ＡＡ鸡（攻毒前经血凝抑制试验检测ＩＢＶ抗体为阴性）,以及攻毒后将     

ELISAA法检测犬腹泻粪样中的犬冠状病毒

用ＦＥ细胞增殖犬冠状病毒（ＣＣＶ）参考株，分别免疫家兔和ＢＡＬＢ／ｃ小鼠制备ＣＣＶ多抗和单抗，建立了夹心ＥＬＩＳＡ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ诊断方法。在检测的８４例犬腹泻粪样中，多抗、单抗夹心法显示ＣＣＶ阳性１６例，Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ阳性１３便，后１３例包括在前１６例中，从８４例腹泻犬粪样中随机取３例作ＣＣＶ、犬细小病毒（ＣＰＶ）双项检测，ＣＣＶ阳性１６例，ＣＰＶ阳性６例，ＣＣＶ、ＣＰＶ混合感染４例。结     

SV40增强子在bGH转基因鼠体内对真核基因转录效率的影响

把ＳＶ４０的增强子序列以紧邻（ｐＳＶＣＡＴＬＢＧＨ）和相距２．３ｋｂ的距离克隆到小鼠金属巯基组氨酸三甲内盐基因（ＭＴ－Ｉ）启动子的上游，用以研究了在体内（ｉｎｖｉｖｏ）环境下原核基因的增强于对真核基因转录调控的影响，以及增强子与启动子的距离对增强于增强转录效率的影响。在建立了ｐＳＶＣＡＴＬＢＧＨ和ｐＳＶ２ＬＢＧＨ两种转基因结构的不同种系的转基因鼠后，通过分析ＩＣＲ、ＫＢ（昆明白）和Ｃ５７ＢＬ３种种系的ｐＳＶＣＡＴＬＢＧＨ转基因鼠的６种主要器官中的ＣＡＴ活性，证明ＳＶ４０增强子可以增强真核基因──ＣＡＴ基因的转录效率而无种属及组织特异性；通过比较ＩＣＲ和昆明白（ＫＢ）两种种系的ｐＳＶＣＡＴＬＢＧＨ和ｐＳＶ２ＬＢＧＨ转基因鼠的心脏和肝脏中ｂＧＨｍＲＮＡ水平，证明在转基因鼠体内，在２．３ｋｂ距离内，ＳＶ４０增强子对由ＭＴ－Ｉ启动子启动的真核基因──ｂＧＨ基因的转录效率的增强效果无明显差异。     

二种方法检测猪传染性胃肠炎病毒抗体的比较

分别用血清中和（ＳＮ）试验和单克隆抗体（ＴＧＥｍＡｂ和ＴＧＥ／ＰＲＣＶｍＡｂ）阻断酶联免疫吸附试验（Ｂ－ＥＬＩＳＡ）对８１头美国进口猪血清作猪传染性胃肠炎（ＴＧＥ）抗体检测。ＳＮ试验检出７份阳性血清，检出率为８．６４％；Ｂ－ＥＬＩＳＡ试验检出７份ＰＲＣＶ抗体阳性血清，检出率为８．６４％，无ＴＧＥ阳性。ＳＮ试验检出７份ＴＧＥ抗体阳性血清与Ｂ－ＥＬＩＳＡ试验检出的７份ＰＲＣＶ抗体阳性血清完全重合。结果证明，应用单克隆抗体进行的Ｂ－ＥＬＩＳＡ可鉴别诊断ＴＧＥ与ＰＲＣＶ感染，优于ＳＮ试验     

重组日本血吸虫中国大陆株28kuGST免疫刺激复合物对小白鼠的免疫试验

将体外重组的日本血吸虫中国大陆株２８ｋｕ谷胱甘肽－Ｓ－转移酶与免疫,刺激复合物（ＩＳＣＯＭ）结合制备了ｒＳｊ２８ＧＳＴ－ＩＳＣＯＭ。用含８５μｇ ｒＳｊ２８ ＧＳＴ的ｒＳｊ２８ＧＳＴ－ＩＳＣＯＭ及１００μｇ ｒＳｊ２８ＧＳＴ分别免疫ＢＡＬＢ／ｃ小白鼠,用常规ＥＬＩＳＡ检测体液免疫水平,以日本血吸虫大陆株尾蚴攻击后的减虫率表示免疫保护力。     

二种方法检测猪传染性胃肠炎病毒抗体的比较

分别用血清中和试验和单克隆抗体阻断酶联免疫吸附试验对８１头美国进口猪轿清作猪传染性胃肠炎抗体检测。ＳＮ试验同７份阳性血清，检出率为８．６４％，Ｂ－ＥＬＩＳＡ试验检出７份ＰＲＣＶ抗体阳性血清，检出率为８．６４％，无ＴＧＥ阳性。ＳＮ试验检出７份ＴＧＥ抗体阳性血清与Ｂ－ＥＬＩＳＡ试验检出的７份ＰＲＣＶ抗体阳性血清完全重合。结果证明，应用单克隆抗体进行的Ｂ－ＥＬＩＳＡ可鉴别诊断ＴＧＥ与ＰＲＣＶ感染，优于Ｓ     

鸭自然感染传染性法氏囊病病毒的调查

用传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）单克隆抗体夹心阻断ＥＬＩＳＡ试验对采处三种不同鸭群的３８０份血清进行了ＩＢＤＶ抗体检测，抗体阳性率分别为：农村散鸭１００％，农场圈养鸭２９．９％，市场贩运鸭９５．４％，总阳性率为９５．５％，抗体效价为１＾２～１０＾４，这一结果不仅表明在我国ＩＢＤＶ传染已到了非常高的程度，而且揭示了鸭在ＩＢＤ病原生态和传播中可能起重要作用。     

重组牛白细胞介素-2增强小鼠对伊氏锥虫可溶性抗原免疫应答的研究

使用伊氏锥虫可溶性抗原免疫小鼠，研究了同时注射重组牛白细胞介素－２（ｒＢＩＬ－２）对ＮＫ细胞杀伤活性及特异性抗体水平的影响。试验鼠随机分为４组：Ａｇ组，ｒＢＩＬ－２组，Ａｇ＋ｒＢＩＬ－２组和ＰＢＳ对照组。以ＬＤＨ释放法和间接ＥＬＩＳＡ法分别检测脾ＮＫ细胞杀伤活性及抗体水平。结果表明，首次免疫后２４ｄ，Ａｇ组ＮＫ细胞杀伤活性为３１．６％，ｒＢＩＬ－２组为９９．６６％，Ａｇ＋ｒＢＩＬ－２组为９８．９８％，对照组为１９．７３％；抗体效价Ａｇ组为２４，Ａｇ＋ｒＢＩＬ－２组为２６。说明ｒＢＩＬ－２可显著提高ＮＫ细胞杀伤活性及促进抗体生成，提高宿主免疫力。     

ELISA法检测犬腹泻粪样中的犬冠状病毒

用ＦＥ细胞增殖犬冠状病毒（ＣＣＶ）参考株，分别免疫家兔和ＢＡＬＢ／ｃ小鼠制备ＣＣＶ多抗和单抗，建立了夹心ＥＬＩＳＡ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ诊断方法。在检测的８４例犬腹泻粪样中，多抗、单抗夹心法显示ＣＣＶ阳性１６例，Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ阳性１３例，后１３例包括在前１６例中。从８４例腹泻犬粪样中随机取３８例作ＣＣＶ、犬细小病毒（ＣＰＶ）双项检测，ＣＣＶ阳性１６例，ＣＰＶ阳性６例，ＣＣＶ、ＣＰＶ混合感染４例。结果显示，在南京地区流行的犬腹泻中，ＣＣＶ感染比例有超过ＣＰＶ的趋势。     

DIG－标记鸡传染性法氏囊病病毒cDNA探针的制备

用ＩＢＤＶ特异引物对ＩＢＤＶＲＮＡ进行逆转录和ＰＣＲ扩增。以低触点琼脂糖凝胶电泳法回收ＰＣＲ扩增带，经酚－氯仿纯化后，用ＤＩＧ际记制备ＩＢＤＶＣＤＮＡ核酸探针．斑点杂交试验证明，该探针能与ＩＢＤＶ不同毒株（ＳＴＣ、Ｌｕｋｅｒｔ、Ｂ＿２和ＬＱ）发生阳性杂交反应，敏感度为１ｐｇ．本实验制备的ＩＢＤＶｃＤＮＡ核酸探针不仅为ＩＢＤＶ的流行病学研究和分子生物学鉴定提供了敏感可靠的手段，而且也是核酸探针制备方法的一次探索。     

^60CO—γ射线辐照和高压熏蒸对SPF鸡饲料营养成分的影响

采用３．０Ｍｒａｄ＾６０ＣＯ－γ射线辐照和高压熏（１２１℃，２０ｍｉｎ）ＳＰＦ鸡饲料，并对处理后中料营养成分于试验后７天进行分析，辐照后７天粗蛋白、ＶＡ、ＶＤ３、ＶＥ、ＶＢ１、ＶＢ２、ＶＢ６、ＶＢ１２、Ｃｕ、Ｆｅ、Ｍｎ、Ｚｎ、Ｓｅ的损失率（％）依次为１．１、４．４、２．３、５．３、５．０、６．７、１０．０、０、０、０、。辐射后ＶＢ６、Ｃｕ、Ｆｅ、Ｍｎ、Ｚｎ、Ｓｅ的损失率（％）依次为９．７、１１．５     

斑点免疫金银染色法检测鸡传染性支气管炎病毒抗原的研究

用建立的斑点免疫金银染色（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）法检测鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）抗原,确定兔抗ＩＢＶ血清工作浓度为１：４００,ＳＰＡ－胶体金探针的工作浓度为１：８０,该法对纯化ＩＢＶ抗原的最低检出量为０．４３１４ｎｇ／点,用Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ与斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）同时检测１５只人工感染ＩＢＶ鸡的气管,肺,肾病科,ＩＢＶ阳性检出率均为１００％,对３２份疑似ＩＢＶ感染鸡病料检测,Ｉ     

麻雀体内传染性法氏囊病病毒的分离鉴定及理化特性研究

从传染性法氏囊病（ＩＢＤ）阳性麻雀体内分离到了一株病毒，用传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）单克隆抗体心ＥＬＩＳＡ试验和ＤＩＧ－标记ＩＢＤＶｃＤＮＡ探针班点杂交试验证明该病毒为ＩＢＤＶ。病毒可适应于鸡胚和鸡胚成纤维细胞，产生细胞病变效应（ＣＰＥ）。病毒血清型为Ｉ型，病毒代谢抑制试验证明其基因组为ＲＮＡ，病毒核酸的电泳图谱呈两条特征带。病毒对乙醚不敏感ＰＨ２．０不能灭活可使病毒失感染性，５６℃作用３小时     

马杜霉素在鸡组织中残留检测方法的研究 Ⅱ 免疫亲合色谱—酶联免疫吸附法(IAC—ELISA)

本文首次报道ＩＡＣ—ＥＬＩＳＡ方法测定鸡组织中马杜霉素的残留。制备针对马杜霉素的特异性抗体ＩｇＧ和高容量ＩＡＣ柱（Ｉ柱动态柱容量为７ １６０ｎｇ·ｍｌ－ １ｇｅｌ,Ⅱ柱为３ ７５０ｎｇ·ｍｌ－ １ｇｅｌ） 。组织样品用甲醇提取,经ＩＡＣ柱分离纯化,ＥＬＩＳＡ检测,即ＩＡＣ—ＥＬＩＳＡ 方法。本试验揭示,以组织样本提取纯化稀释液为介质制备的标准曲线（Ｉ５０ 为３３３ ～３７１ｎｇ·ｍｌ－ １ ,斜率为１９５ ～２２０ ,检测极限为１０ ～２８ｎｇ·ｇ－ １） ,其Ｉ５０ 值和斜率与以ＰＢＳＴ－ １０ ％ 甲醇为介质的标准曲线相符,实际ＩＡＣ—ＥＬＩＳＡ检测时,各组织的标准曲线可用后者代替,使操作大为简化、实用。各组织添加马杜霉素３００ ～１２０ ．０μｇ·ｋｇ － １ 水平下,测得样本回收率为７６４ ％ ～１０９ ．０ ％ ,变异系数为３８ ％ ～１６ ．４ ％ 。结果证明了该方法的可靠性。本文建立的ＩＡＣ—ＥＬＩＳＡ法是目前国内外唯一报道的最简便、灵敏的马杜霉素残留检测方法。     

鸡传染性腔上囊病病毒的提纯和检测

在人工感染ＩＢＤＶ鸡的腔上囊组织液中加入氯仿，经４０００ｒ／ｍｉｎ离心３０ｍｉｎ，除去腔上囊组织蛋白，然后用硫酸铵沉淀病毒。提纯后的病毒颗粒直径为６０ｍｎ左右，无囊膜。用紫外分光度计测定，病毒蛋白含量为４．０ｍｇ／ｍＬ；用琼脂扩散试验检测，其效价为１：１６；用ＩＢＤ－ＥＬＩＳＡ诊断盒检测，其效价为１：３２０。     

ABC—Dot—ELISA检测鸡传染性支气管炎病毒

建立了ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）的方法,其最佳反应条件是：包被液为０．０５ｍｏｌ／ＬｐＨ９．６的碳酸钠－碳酸氢钠缓冲液（ＣＢＳ）,免疫ＩＢＶ ＩｇＧ的最佳工作浓度为１：８０;抗原的最佳浓度为１：８００;封闭剂选用０．０１ｍｏｌ／Ｌ ｐＨ７．４含３０ｍＬ／Ｌ白明胶的ＰＢＳ,Ｂ－ＡｇＧ和ＡＢＣ－ＨＥＰ的最佳工作浓度为１：２００。用ＡＢＣ－ＨＥＰ的最佳工作浓度为１：２０     

用抗传染性氏囊病毒单克隆抗体建立夹心阻断ELISA检测鸡血清抗体及 …

用酶标记抗传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）单克隆抗体，建立夹心阻断ＥＬＩＳＡ，检测ＩＢＤＶ鸡血清抗体。用Ｄ７８细胞毒免疫２４日龄的雏鸡，每周采血一次，共４次，用夹心阻断ＥＬＩＳＡ、微量细胞中和试验（ＶＮ）、琼脂扩散试验（ＮＧＰ）检测鸡血清抗体，结果表明：夹心阻断ＥＬＩＳＡ同ＶＮ之间具有较高的相关性（ｒ＝０．８１２６），与ＡＧＰ的相关性较低（ｒ＝０Ｘ．７５７５）。