伊氏锥虫半－大规模体外培养初报

按改良Ｂａｌｔｚ无细胞培养系统的培养方法，将盛有３００ｍＬ伊氏锥虫培养物、容量１７００ｍＬ（１１．０ｃｍ×２８．５ｃｍ）的培养瓶置于１０ｒ／ｍｉｎ的细胞培养旋转装置上，在３７℃培养箱中培养。在接种虫数为１．５×１０５～１０．０×１０５／ｍＬ时，其群体增倍时间为１２ｈ。接种虫数为１０×１０５／ｍＬ的培养物培养２４ｈ，每瓶收获约１．２×１０９锥虫，可满足一般实验的需要。     

鸡T淋巴细胞IL—2的体外诱生及活性检测

经Ｌ１６正交试验选择，并经实验验证，鸡脾脏Ｔ淋巴细胞白细胞介素２（ＩＬ－２）体外诱生和活性检测的最优水平组合及适宜条件的２．５μｇ／ｍＬ伴刀豆蛋白Ａ，ＩＬ－２体外诱生时间２０ｈ，１×１０＾７／ｍＬ淋巴细胞、１０％小牛血清、靶细胞培养时间４８ｈ，４×１０＾６／ｍＬ靶细胞，靶细胞接触时间３６ｈ，５ｍｇ／ｍＬＭＴＴ，ＭＴＴ加入时间３ｈ和甲替溶解时间２ｈ；胸腺Ｔ淋巴细胞ＩＬ－２体外诱生和活性检测的最优水平     

理化因素对体外培养伊氏锥虫致弱的影响

本试验观察了理化因素（γ－射线、紫外线、低浓度杀虫药）对体外培养伊氏锥虫致弱的影响，结果如下：受γ－射线辐照的伊氏锥虫开始时存活数随辐照剂量的增加而减少，随后表现出无规律性，辐照剂量５万ｒａｄ以下对锥虫的存活影响较小，５～１０万ｒａｄ辐照后２ｄ锥虫的存活数明显减少，对小白鼠的感染性消失。伊氏锥虫受紫外线照射的存活曲线为“Ｃ”型，群体抗辐射不均一，平均致死剂量（Ｄ＿（３７））为波长２６５０Ａ的２０Ｗ紫外灯离样品４０ｃｍ处照射约２ｈ。虫体照射后根据体外跟踪观察，其存活数随照射剂量的增大而减少，照射了３ｈ和４ｈ第３天的活虫数近似１００条或不足１００条，对小白鼠的感染性均消失。用０．１μｇ／ｍｌ的苏拉灭和０．８μｇ／ｍｌ的贝尼尔两种低浓度杀虫药在体外对伊氏锥虫诱导４０ｄ仅造成药敏性的改变，未造成毒力减弱。     

体外培育抗苏拉灭伊氏锥虫克隆

将３个苏拉灭敏感的伊氏锥虫原种的克隆连续培养于改良Ｂａｌｔｚ无细胞培养系统中，通过逐步提高培养基中苏拉灭的含量，培育了３个抗苏拉灭的伊氏锥虫克隆─ＪＧｃ１－１６０、ＪＸ－１ｃ１－１６０和ＺＪｃ１－１４０。它们体外药敏试验的ＩＣ５０依次为３５８．５、４１２．３和２４６．４μｇ／ｍＬ，是各自亲本克隆的１２９２．５、１８７４．１和１７６０．ｏ倍；小鼠治疗试验的ＣＤ１００，对免疫功能正常小鼠依次为８０、１２０和３０ｍｇ／ｋｇ，为各自亲本克隆的５．３、８．０和３．０倍，对免疫抑制小鼠为２５０、３００和１００ｍｇ／ｋｇ，分别是相应免疫正常小鼠的３．１、２．５和３．３倍。试验结果表明，抗锥虫药治疗剂量不足和宿主免疫功能不全是导致产生抗药虫株的重要因素，各自既可单独发挥作用，又可相互协同。本文报道了体外培育伊氏锥虫抗药虫株的方法，这一方法对研究锥虫抗药性具有重要作用。     

牛含环形泰勒焦虫血清细胞的生物反应器培养条件的探索

利用生物反应器对牛含环形泰勒焦虫的血清细胞进行了培养条件的探索。结果证明，采用２．５Ｌ培养罐，６片叶轮搅拌，转速１２０ｒ／ｍｉｎ，装量１２００ｍｌ，罐顶一通气孔用沙布棉花封口与外界进行气体交换为最优培养条件。在此状态下，我们对原工艺要求的２０％新生牛血清用量减少至７％，水解乳蛋白也由国产产品替代了部分进口的ＤＩＦＣＯ公司产品，细胞接种密度４．５×１０＾５ｃｅｌｌ／ｍｌ经３６小时培养后平均达２．４×     

氧氟沙星在健康和霉形体与大肠杆菌感染鸡的药动学研究

本文报道氧氟沙星在健康和霉形体与大肠杆菌合并感染鸡体内的药动学研究,健康鸡单剂量内服氧氟沙星（１０ｍｇ／ｋｇ）其药－时数据符合一级吸收一室开放模型,主要动力学参数如下：ｔ１／２α为０．４７±０．２３ｈ,ｔ１／２β为５．９２±１．３４ｈ,ｔｍａｘ为１．８９±０．５２ｈ,Ｃｍａｘ为５．７９±１．０９μｇ／ｍＬ,ＡＵＣ为６０．９２±１７．００ｍｇ／Ｌ,ｈ,Ｔｃｐ（ｔｈｅｒ）为５９．０６±１４．２８ｈＦ,     

核型多角体病毒对草原毛虫的毒力测定

从青海草原毛虫自然罹病死亡的幼虫体分离出多株核型多角体病毒，选出毒力较强的ＧｑＮＰＶ－８７株，并进行生物学特性测定，方差分析表明，１．２５×１０＾２￣１．２５×１０＾８ＰＩＢ／虫间７种剂量感染３龄幼虫，不同剂量间的校正死亡率差异极显著，而各处理死亡均数差异显著性测定中，１．２５×１０＾７￣１．２５ ×１０＾８ＰＩＢ／虫差异不显著，剂量和死亡率回归方程为Ｙ＝２．３２７９＋０．５４９２Ｘ（感染后第７ｄ     

笼养乌骨鸡人工授精技术的研究

我们于１９９６年４￣６月对笼养１０￣１２月龄种用乌骨鸡进行人工授精技术研究。其结果：乌骨鸡精液颜色为乳白色，射精量为０．４９±０．２３８ｍｌ；精子密度２０．３±１０．８４×１０＾８／ｍｌ；精子的畸形率（５．７９±１．６４）％。乌鸡骨精子形态与家鸽同，精子总长度为（８０．５９±３．９４）μｍ，头为弯园柱状，直径０．５μｍ，头长约８μｍ，精子头部前端为顶林，长约２μｍ，尾部（中、主、末段）长７１±２．     

冷温半干旱黄土丘陵区荒坡地沙打旺系统生态效能的调查研究

通过典型调查的方法，对渭源县北部冷温半干旱黄土丘陵区荒坡的地沙打旺系统的生态效能进行了初步研究。结果表明：一，二和三年沙打旺地上部分风干草平均产量依次是８３４．０，３９０１．５和８９２０．５ｋｇ／ｈｍ＾２，粗蛋白质平均产量依次是１６６．５，６２１．０和１０５３．０ｋｇ／ｈｍ＾２，产出能依次是１．３４６，６．５１８和１４．７２８×１０＾１＾０Ｊ／ｈｍ＾２，光能利用率分别是０．０５３％，０．２５４％和     

伊氏锥虫体外培养株的建立及其HGPRT活性测定

用带虫培养法和带虫传代法建立了伊氏锥虫体外培养株，无论有、无饲养细胞，虫体均能快速增殖。培养７０ｄ以上，虫体仍保持原有生物学特性，对小鼠有感染性，活力旺盛，在体外能连续培养传代。虫数最高达２．４８×１０６／ｍＬ，群体增倍时间为８．８６～１０．８ｈ。液氮保存、复苏后的虫体可在饲养细胞上立即增殖。培养中发现由巨噬细胞转化的巨核母细胞对虫体生长有促进作用，经胰酶消化能与虫体一道连续传代。通过ＨＡＴ选择性培养液测定，伊氏锥虫对氨基喋呤不敏感，试验组虫体与对照一样生长良好，证明伊氏锥虫具有次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转化酶（ＨＧＰＲＴ）     

双波长光度法测定饲料中钙

本文提出了饲料中钙的测定的新方法，试验表明，在ｐＨ１０．５～１１．５的氨－氯化铵缓冲介质中，钙与三溴偶氮胂形成稳定的紫色配合物，在波长６０５ｎｍ处有最大吸收，表现摩尔吸光系数ε＿（６０５）＝２．３×１０￣４Ｌ·ｍｏｌ￣（－１）·ｃｍ￣（－１），检测的线性范围为５～６５μｇ／５０ｍｌ。进一步利用双波长光度法可使方法灵敏度提高到ε＿（４９０～６０５）＝３．５×１０￣４Ｌ·ｍｏｌ￣（－１）·ｃｍ￣（－１）。本方法用于饲料样品的测定，结果与国家标准法相符，并明显优于ＥＤＴＡ配位滴定法。     

猪细小病毒生物学特性研究

应用ＰＫ－１５传代细胞复制猪细小病毒（ＰＰＶ）参考株ＮＡＤＬ－２和云南分离株ＫＭ，研究得出细胞培养物半数细胞感染量分别为１０＾－７．９／ｍｌ和１０＾－６．８／ｍｌ经ＣｓＣｌ密度梯度离心，两种病毒颗粒其浮力密度值分别为１．３３ｇ／ｃｍ＾３和１．３９／ｃｍ，电镜观察病毒粒子呈圆形，直径约２０ｎｍ。ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）分析，表明纯化的ＰＰＶ细胞培养毒，主要含两种蛋白成分，分子量     

猪繁殖与呼吸综合征弱毒疫苗的安全性及效力试验

猪繁殖与呼吸综合征（ＰＲＲＳ）弱毒株能在Ｍａｒｃ－１４５细胞上正常增殖,经克隆纯化后测得其毒价为１０＾７．４１ＴＣＩＤ５０／ｍＬ。克隆株对乳鼠、低日龄乳猪和妊娠母猪具有很高的安全性;３日龄乳猪用１０＾－１、１０－１稀释的病毒液接种后,能抵御＾５．８ＴＣＩＤ５０／ｍＬ的ＰＲＲＳ强毒攻击;后备母猪在接种克隆株病毒后于妊娠８５ｄ用ＰＲＲＳ强毒攻击,结果不发生流产;妊娠母猪接种克降株病毒原液后,足月产时其     

黄河故道沙荒草地生物量及营养价值特性研究

对黄河故道沙荒草地生物量季节变化规律以及牧草营养物质出动态进行了分析，结果表明：（１）沙荒草地牧草生物量的增长呈二次曲线变化规律：ｙ＝１／（３．７９×１０＾－７ｔ＾２－９．３２×１０＾－５ｔ＋７．８３×１０＾－３），并且其生物量在９月份达到最大值；（２）从５月份开始沙荒草地牧草营养价值逐渐降低，且于物质消化率（ＤＭＤ）与其粗蛋白质（ＣＰ），木质素（ＬＩＧ）含量分别表现为显著正相关（ｒ＝０．９４）和     

新生反刍动物血浆cAMP和cGMP水平变化初探

初步观察了６头黑白花犊牛和３只湖羊羔生后２４ｈ内血浆环腺苷酸（ｃＡＭＰ）和环鸟苷酸（ｃＧＭＰ）水平变化。结果表明：犊牛出生时ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ分别为１．１２±０．１０ｐＭ／ｍｌ和０．８７±０．０４ｐＭ／ｍｌ，羔羊生后１ｈ分别为１．２０±０．０１ｐＭ／ｍｌ和０．３９±０．０１ｐＭ／ｍｌ，在生后２～４ｈ内犊牛和羔羊ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ均呈上升趋势，以后在相对高水平波动直至２４ｈ，ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ比值生后较高，２ｈ内下降，以后处于较低的比值直至２４ｈ     

新城疫V4株弱毒变种的选育

应用有限稀释法通过ＳＰＦ鸡胚传代，从新城疫Ｖ２弱毒中克隆出一个变各，即２０代以后的继代毒，命名为新城疫Ｖ４克隆２０弱毒株，（ＮＤ－Ｖ４Ｃ２０）。毒以１０＾－１－１０＾１３×０．１ｍｌ接种１０日龄ＳＰＦ鸡胚尿囊腔１５０小时内，鸡胚极少死亡。每个滴度５个胚有尿液均可凝集鸡红血球。第１０代和第２０代的每个滴度５个胚有的混合尿液以１０＾－６×０．５ｍｌ一次饮水免疫鸡，即能引起ＨＩ抗体反应，也能抵抗新城疫强     

鸭外周血液淋巴细胞转化MTT比色法检测的研究

为了建立鸭淋巴细胞转化检测的ＭＴＴ 比色法,对试验条件进行了研究。其检测的最佳条件为７．２ μｇ／ｍＬ的ＰＨＡ、７．５ ×１０６ 细胞／ｍＬ的细胞数、细胞培养液加入１ ％ 的ＳＰＦ鸡血清、细胞培养的时间为７２ ｈ。在此条件下,对北京鸭的外周血液淋巴细胞转化进行了检测,其结果为：２～６ 周龄鸭淋巴细胞转化率从５０．２ ％ 上升到２１２．３％ ,８ ～１６ 周龄正常鸭在１９３．０％ ～２８１．０％ 之间变动。实验结果表明,此方法可用于鸭体外细胞免疫功能的检测。     

盐酸锥双净治疗牛锥虫病疗效观察

本县松湖镇于１９９７ 年５ 月经毛细管自然沉淀集虫法镜检发现锥虫的阳性牛５２ 头,采用盐酸锥双净（剂量水牛１．５ｍ ｇ／ｋｇ,黄牛０．５ｍ ｇ／ｋｇ 体重）肌肉注射治疗,其中１０ 头治疗后１ 个月以采用接种小白鼠查虫,４２ 头于治疗后５ 个月采血作ＰＡＰＳ免疫微球凝集试验和集虫法查虫,并结合临床症状,耕作能力及膘情观察。结果仅ＰＡＰＳ凝集试验检出２ 头水牛仍为阳性（占治疗水牛３９ 头的５．１％ ）。其他检查的牛全部转阴,临床症状消失,耕作能力增强,膘情中等以上的达７８．８％ ,说明锥双净治疗牛的锥虫病,疗效显著     

三价铁离子对离体卵泡细胞内分泌的影响

用含Ｆｅ＾３＋０．００、１．３４×１０＾－３、１．３４×１０＾－２ｍｏｌ／Ｌ的溶液处理卵泡细胞及垂体细胞的培养液，观察不同Ｆｅ＾３＋水平对离体卵泡细胞分泌雌二醇和孕酮的影响。结果表明，不同水平的Ｆｅ＾３＋显著抑制了离体卵泡细胞分泌雌二醇和孕酮（Ｐ〈０．０５）。     

柔嫩艾美尔球虫和巨形艾美尔球虫的分离与鉴定

采用单卵囊分离技术，获得了两纯种球虫，鉴定为柔嫩艾美尔球虫（Ｅｉｍｅｒｉａｔｅｎｅｌａ）和巨形艾美尔球虫（Ｅ．ｍａｘｉｍａ）。主要鉴定指标：柔嫩艾美尔球虫，虫体寄生于鸡盲肠，卵囊呈卵圆形或宽卵圆形，有极体，无内、外残余体，测２００个卵囊的平均大小为（２０１６±１６１）×（１５５９±１１３）μｍ，测２００个孢子囊的平均大小为（１１６４±０８５）×（５．８６±０．５９）μｍ，潜隐期１４１ｈ，最短孢子化时间１９ｈ；巨形艾美尔球虫，虫体主要寄生于小肠中段，卵囊大，呈卵圆形，金黄色，有极体，无内、外残余体，测２００个卵囊的平均大小为（２８５１±１９８）×（２１．７９±１．５０）μｍ，测２００个孢子囊的平均大小为（１６３１±１０４）×（７．７８±０．４９）μｍ，潜隐期１２４ｈ，最短孢子化时间３２ｈ。