布氏锥虫伊氏亚种和马媾疫亚种在不同气相条件下的体外培养

在烛缸和密闭培养的气相下,用我们改良的Baltz无细胞培养系统培养了3个已适应于体外培养的布氏锥虫伊氏亚种虫株、1个布氏锥虫马媾疫亚种虫株和3个未经培养的布氏锥虫伊氏亚种虫株(未适应株),并与常规CO_2培养箱(含5%CO_2的空气)培养作比较。所有适应株和未适应株均可在烛缸和密闭培养条件下正常生长,连续培养1—2月,虫体形态、生长特性和对小白鼠的致病力与CO_2培养箱培养相同。培养物的虫密度,密闭培养明显高于烛缸和CO_2培养箱培养,CO_2培养箱培养一般稍高于烛缸培养。密闭和烛缸培养的成功,对普及锥虫体外培养技术有很大实用价值,也提示应进一步研究培养的最佳气相条件。此外,不经饲养层培养系统适应直接建立3个未适应株的无细胞培养系统的培养也是重要进展。     

用免疫抑制小鼠快速培育抗苏拉明伊氏锥虫

将伊氏锥虫克隆ＪＧｍｃ５用环磷酰胺处理的免疫抑制小鼠频繁地连续传代，并予以亚治疗剂量的苏拉明治疗，连续传代１４次，历时８８日，即获得对苏拉明具有高水平抗药性的伊氏锥虫群体。在用免疫活性正常的健康小鼠测定抗药性时，此抗苏拉明锥虫群体仍保持高水平的抗药性，ＣＤ１００＞４００ｍｇ／ｋｇ。在以体外药敏试验测定时，其ＩＣ５０为１２３．２μｇ／ｍｌ。实验结果表明，宿主免疫系统的损害，在实验条件下，可导致伊氏锥虫迅速产生抗药性。在野外条件下，机体免疫系统的损害对锥虫抗药性的产生可能也起一定作用。     

大庆冷棚葡萄定植前必须做好的几个关键技术环节

根据大庆市政府《大庆市关于加快发展棚室经济,推进"菜篮子"工程建设三年规划纲要》和有关文件精神,大庆市预计在2013年之前建设30万栋棚室。在政府的大力扶持和广大农户的努力下,设施葡萄栽培面积发展迅猛,仅八井乡就有冷棚葡萄4 300多栋,栽培管理水平高的农户,平均     

应用斑点酶联免疫吸附试验检测水牛伊氏锥虫抗体

应用斑点酶联免疫吸附试验(Dot—ELISA)检测水牛伊氏锥虫IgG抗体,并与间接血凝试验(IHA)进行了比较。检测160份伊氏锥虫疫区水牛血清160份,Dot—ELISA和IHA的阳性率分别为55.63％和53.75％;其中42份虫检阳性血清的阳性率分别为100％和92.86％,两种试验的一致率为95.63％。两种试验的滴度呈显著正相关(r=0.8842)。10份非疫区健康水牛血清两种试验均为阴性。     

伊氏锥虫半－大规模体外培养初报

按改良Ｂａｌｔｚ无细胞培养系统的培养方法，将盛有３００ｍＬ伊氏锥虫培养物、容量１７００ｍＬ（１１．０ｃｍ×２８．５ｃｍ）的培养瓶置于１０ｒ／ｍｉｎ的细胞培养旋转装置上，在３７℃培养箱中培养。在接种虫数为１．５×１０５～１０．０×１０５／ｍＬ时，其群体增倍时间为１２ｈ。接种虫数为１０×１０５／ｍＬ的培养物培养２４ｈ，每瓶收获约１．２×１０９锥虫，可满足一般实验的需要。     

用DEAE—纤维素柱分离伊氏锥虫

本文报道了用国产DEAE—纤维素从人工感染伊氏锥虫的小鼠、大鼠和犬的血液分离伊氏锥虫的具体方法,测定了压积DEAE—纤维素对小鼠、大鼠和犬的血液吸附值分别为0.25～0.41、0.23～0.39、0.33;伊氏锥虫的回收率,小鼠为83.19～98.19％,大鼠为84.87～93.85％。分离的锥虫形态正常,运动活泼,离心浓集后呈炼乳状,镜检无任何血细胞。此外,对用DEAE—纤维素分离伊氏锥虫的有关技术问题作了讨论。     

布氏锥虫马媾疫亚种体外培养的研究

用小白鼠腹腔巨噬细胞滋养层系统和无细胞培养系统成功地培养了布氏锥虫马媾疫亚种。开始建立无细胞培养系统培养时,从第6天起每日补种少量滋养层细胞系统培养的虫体,于3周内逐步建立了适应于无细胞培养系统的锥虫群体。长期连续培养两种系统培养物的虫密度均可稳定保持在7—10.O×10~5/ml左右,虫体有规律地呈岛屿状密集分布。培养液内2—ME和马血清的适宜浓度分别为0.3mM和20%,添加0.1mM次黄嘌呤可使培养物虫密度增加1倍左右,用烛罐可取代CO_2培养箱。体外连续培养120天。锥虫仍保持细长形态,具表面被膜,对小白鼠有感染性。     

伊氏锥虫在27℃和41℃的体外培养

用改良Ｂａｌｔｚ无细胞培养系统在２７℃和４１℃培养伊氏锥虫，２７℃培养取得成功，４１℃培养失败。２７℃培养已持续１０个月，培养的伊氏锥虫仍保持其在哺乳动物宿主内的主要形态特征，对小鼠的感染力和致病力，消耗葡萄糖，葡萄糖分解的最终产物为丙酮酸；其群体增倍时间约为２４ｈ，ＤＥＡＥ－纤维素分离的回收率仅５０％左右，显著长于和低于３７℃培养物。文内还讨论了２７℃培养伊氏锥虫的用途和意义。     

伊氏锥虫在家兔体内的抗原变异和NaTat1．1—1．9九个群体的建立

以伊氏锥虫YNB2克隆感染家兔，于52天内，以一定间隔，用经环磷酰胺处理的小鼠由兔血分离锥虫，并予以克隆，获得9个抗原性互不相同的克隆群体。用此9个克隆群体分别免疫家兔制备免疫血清，与同源和各异源克隆群体作交叉免疫溶解和间接免疫荧光试验。结果证明，9个克隆群体是单一可变抗原型(VAT)，制备的血清是单价VAT特异血清。按国际通用命名法，依分离顺序命名为NaTat1．1～1．9(Najing rypanozoon antigen type 1.1～1.9).