高速逆流色谱纯化红景天中的红景天甙

[目的]研究从红景天甙样品中提取红景天甙的方法。[方法]利用高效液相色谱检测技术和高速逆流色谱分离纯化技术,采用氯仿∶甲醇∶水=4∶1.5∶2为溶剂体系。[结果]经过高速逆流色谱1次纯化,红景天甙纯度为84.3%,回收率达到95.7%。[结论]高速逆流色谱技术的应用为制备高纯度红景天甙提供了一条新途径。     

半制备型高效液相色谱法分离纯化吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱

[目的]建立从吴茱萸中分离纯化吴茱萸碱和吴茱萸次碱的半制备型高效液相色谱法。[方法]采用C18柱(250 mm×25.4 mm I.D.,10μm),甲醇-水为流动相,考察了流动相的组成、流速和上样量对分离效果的影响,确定了适宜的色谱条件:流动相为甲醇-水(70∶30,V/V),流速为25 m L/min,上样量为60 mg,检测波长为225 nm。[结果]一次分离即可得到2种单体成分,经紫外光谱和核磁共振波谱分析得到鉴定为吴茱萸碱和吴茱萸次碱,经高效液相色谱法检测其纯度分别为99.2%和99.7%。[结论]与传统的分离方法相比,半制备型高效液相色谱法具有高效、简便、快速的特点,适用于吴茱萸中主要有效成分的快速制备。     

油茶籽粕提取物中抑菌活性物质的分离纯化研究

以油茶籽粕正丁醇萃取物为原料,通过大孔树脂柱层析、正相硅胶柱层析、高效液相色谱等分离纯化技术将较强抑菌活性的物质进行分离。结果表明,采用60%乙醇进行大孔树脂柱层析,然后以乙酸乙酯、甲醇、甲酸体积比分别为9：1：0.1、8：2：0.1、7：3：0.1 进行正相硅胶梯度洗脱,以30%甲醇作流动相进行高效液相色谱纯化,油茶籽粕正丁醇萃取物能分离出纯度非常高的抑菌活性物质。     

大黄鱼中硫磺素T残留的HPLC分析

建立了反相高效液相色谱法测定染色大黄鱼(Pseudosciaena crocea)中非法添加色素硫磺素T含量的方法。样品经超声水溶液提取,采用Eclipse XDB-C18色谱柱,以甲醇-0.05%(V/V)甲酸为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为410 nm,外标法测定硫磺素T。结果表明,硫磺素T在0.40~65.0 mg/L范围内线性关系良好(R2=0.9 994),检出限为0.02 mg/L(S/N=3),3个浓度水平下的加标回收率为91.0%~98.1%,相对标准偏差(n=6)为1.21%~2.26%。     

大孔树脂分离纯化菊芋叶总黄酮工艺研究

探索大孔树脂分离菊芋叶总黄酮的工艺,分离最佳工艺条件是:大孔树脂型号为X-5;上样流速2BV·h~(-1),洗脱液为70%的乙醇,体积为2BV,控制流速2BV·h~(-1)。纯化后菊芋叶总黄酮含量提高了3.57倍,结果表明大孔树脂X-5对菊芋叶总黄酮的纯化作用良好。纯化后的菊芋总黄酮有一定还原力。     

大孔树脂纯化甜茶多酚及其对 α-葡萄糖苷酶抑制活性和DPPH·抗氧化性的研究

为了从甜茶中得到降血糖和抗自由基氧化的活性成分,通过4种不同极性的大孔树脂对甜茶多酚的静态吸附-解吸性能研究,筛选出HPD-826树脂,探讨其动态纯化甜茶多酚工艺条件;采用不同极性有机溶剂对HPD-826树脂纯化的甜茶多酚进行萃取,测定各相萃取物的降血糖和抗氧化能力。结果表明： HPD-826树脂纯化甜茶多酚的优化工艺条件为上样液(质量浓度2.0 mg·mL^-1、体积50 mL和流速2 BV·h^-1),洗脱剂乙醇(体积分数60%、体积250 mL和流速 2 BV·h^-1)。在此优化条件下,甜茶多酚平均纯度达到81.2%。甜茶多酚各相萃取物质量浓度与α-葡萄糖苷酶的抑制率和DPPH·的清除率具有正相关性,其中乙酸乙酯相萃取物对α-葡萄糖苷酶和DPPH·都表现出最高的抑制率,具有良好的药用开发价值。     

海头红提取物的抑菌活性及其抗菌成分的初步分离研究

以假单胞菌Pseudomnas aeruginosa、绿色木霉Trichoderma viede为供试食用菌病原菌,评价海头红提取物的抑菌活性,并采用生物活性追踪法对其中抑菌有效成分进行初步分离。结果表明,海头红乙醇提取物经萃取分离得到的石油醚萃取相、氯仿萃取相、乙酸乙酯萃取相中,氯仿萃取相和乙酸乙酯萃取相对假单胞菌具有较好的抑制作用,100mg·mL-1浓度下抑菌圈直径分别为14.3mm和8mm;石油醚和氯仿萃取相对绿色木霉的菌丝生长的抑制作用较好,72h抑制率分别达54.57%和36.55%。对乙酸乙酯组分通过2次硅胶柱层析分离,得到一个具有抑菌活性的组分D,其对假单胞菌的抑菌圈为13mm(100mg·mL-1),对绿色木霉的菌丝生长72h抑制率为48.53%(50mg·mL-1)。对组分D进行GC-MS分析,初步判定其中抑菌有效成分为4-羟基苯甲醛,有关其抑菌有效成分的纯化与鉴定有待进一步研究。     

高速逆流色谱分离纯化雪白睡莲花中的酚类成分

[目的]采用高速逆流色谱法(HSCCC)分离纯化雪白睡莲花中的酚类成分。[方法]HSCCC分离过程分为两步,分别采用乙酸乙酯∶甲醇∶水(4∶1∶5)和乙酸乙酯∶正丁醇∶水(4∶1∶5)两个体系,固定相均采用上相,流动相均采用下相,流速为2.0 m L/min,主机转速设定为850 r/min,紫外检测波长为254 nm。高效液相色谱(HPLC)检测纯度。[结果]第一步从200 mg的睡莲花提取物中分离得到异槲皮苷(I,41.4 mg)、紫云英苷(II,40 mg)和一混合物85 mg;第二步从混合物中分离纯化得到isostrictiniin(III,50.1 mg)和烟花苷(IV,26.3 mg),上述4种物质的纯度分别为73.53%、92.42%、82.36%和85.65%。[结论]HSCCC可快速的分离纯化雪白睡莲花中的酚类成分。     

高速逆流色谱分离金花葵花黄酮类化合物的条件研究

应用高速逆流色谱法分离金花葵花中2种黄酮类化合物.以乙酸乙酯-甲醇-水(10∶0.4∶10,V/V)作为两相溶剂体系,在主机转速900r/min、流动相流速2.0mL/min、水浴温度为30℃的条件下,从100.3mg金花葵花总黄酮纯化物中分离得到金丝桃苷10.07mg,纯度达94.194%;葛根素13.5mg,纯度达94.579%.     

大黄鱼鱼卵油溶剂提取法的比较及其品质分析

以大黄鱼鱼卵为研究对象,采用6种溶剂(正己烷、环己烷、异丙醇、乙酸乙酯、95%乙醇、氯仿—甲醇)提取鱼卵油,对所得鱼卵油的脂质得率和品质(磷脂含量、过氧化值、游离脂肪酸含量、硫代巴比妥酸值、脂肪酸组成)进行分析.结果表明:95%乙醇组的脂质得率(27.97%±0.40%)、磷脂含量(12.40%±0.35%)、游离脂肪酸含量(12.76%±0.33%)和硫代巴比妥酸值(2.76 mg·kg~(-1)±0.14 mg·kg~(-1))均显著高于其他溶剂组,过氧化值(1.33 mmol·kg~(-1)±0.38 mmol·kg~(-1))最低.氯仿—甲醇组的脂质得率(19.00%±0.57%)相对较低,但其磷脂含量(8.18%±0.62%)仅次于95%乙醇组,且过氧化值(2.22 mmol·kg~(-1)±0.32 mmol·kg~(-1))、游离脂肪酸含量(4.64%±0.05%)和硫代巴比妥酸值(0.97 mg·kg~(-1)±0.07 mg·kg~(-1))均较低.此外,二十碳五烯酸(EPA)含量和二十二碳六烯酸(DHA)含量之和在多不饱和脂肪酸(PUFA)中的占比分别为89.73%(氯仿—甲醇组)、88.49%(95%乙醇组)、87.59%(异丙醇组)、87.21%(正己烷组)、86.25%(环己烷组)、82.02%(乙酸乙酯组).综上,95%乙醇对大黄鱼鱼卵油的提取效果最好,但其氧化程度较为严重;氯仿—甲醇组鱼卵油的脂质得率低,但其氧化程度相对较低,品质较好.说明氯仿—甲醇是提取大黄鱼鱼卵油的最佳溶剂.     

牛羊胆汁中甘氨胆酸提取纯化工艺研究

采用盐析、萃取、柱层析等生物化学方法,从牛、羊胆汁中提取出了有效成分甘氨胆酸,并采用薄层层析法及薄层扫描法进行定量、定性检测,测得甘氨胆酸的纯度可达98%以上,牛羊胆汁甘氨胆酸的回收率分别为64%和62%。     

不同溶剂对胡萝卜中类胡萝卜素提取的影响

采用薄层层析法分析了不同溶剂提取的胡萝卜中类胡萝卜素的组成及主要类胡萝卜素的相对含量。结果表明:以硅胶G为固定相,正己烷/乙酸乙酯/丙酮/甲醇(8/2/1/1)以及石油醚/乙醇(99.5/0.5)为展开剂,层析效果较好;用乙醇、乙酸乙酯、乙酸乙酯/乙醇(2/1)3种溶剂提取的类胡萝卜素成分没有差异,但各成分的含量差异较大。     

乌头总碱的纯化工艺及中乌头碱的纯化研究

[目的]选出乌头总碱的最佳提取工艺,并分离纯化中乌头碱,为新药研制奠定基础。[方法]以总生物碱提取率为指标考察提取工艺。通过硅胶柱层析和结晶纯化获得纯度在95%以上的中乌头碱。[结果]附子中乌头总碱的最佳提取条件为:以3倍药材量的95%乙醇溶液为溶剂,浸提3次,第1次5 d,第2次3 d,第3次1 d。调提取液pH值为3.0~4.0后静置12 h,回收乙醇并浓缩至一定体积,确定D-101的最佳吸附率、洗脱率分别为87.5%和95.3%。纯化时,D-101大孔吸附树脂的上样浓度为6 g/L,pH值为4.5,室温为18℃,以蒸馏水除杂,流速为1 ml/min的95%乙醇洗脱,浓缩洗脱液,完全蒸干,测得其附子总生物碱的平均含量高于48%。[结论]D-101大孔吸附树脂可用于工业化乌头总碱的提取,以及后续各种生物碱的纯化。     

绒白乳菇发酵液抑菌活性成分的分离纯化及其结构鉴定

为寻找抑制杨树叶枯病菌生长的活性成分,进行了绒白乳菇发酵液抑菌活性成分的分离纯化研究。结果表明,发酵液提取物经硅胶柱层析粗分离得到5个组分,其中组分4显现出较高的抑菌活性;组分4经TLC得到样品A和样品B,其中样品B能够完全抑制叶枯病菌生长;薄层检测和GC分析判定样品B为单一化合物,纯度为98.805%;综合UV、IR、EI-MS和NMR的检测结果,推断样品B的分子式是C8H9NO,分子量135,化学名为1-(2-吡啶)-2-丙酮,在绒白乳菇发酵液中首次发现该化合物。      

杜仲籽粑的深度开发利用研究

[目的]研究从杜仲翅果中提取亚麻酸之后的籽粑中制备桃叶珊瑚苷及其苷元的工艺方法。[方法]采用硅胶柱层析法从杜仲粕中分离纯化桃叶珊瑚苷,优化柱层析分离、纯化条件,利用酶解技术选择最佳酶解条件,运用高效液相色谱法(HPLC)对产品进行检测分析。[结果]最佳上样量为2%,使用V(甲醇)∶V(石油醚)∶V(乙酸乙酯)为4∶0.5∶9的混合溶剂进行洗脱,通过收集、重结晶可获纯度为97%的桃叶珊瑚苷产品,利用酶解技术在30 min时桃叶珊瑚苷能达到最佳的酶解效果。[结论]该研究为高效制备桃叶珊瑚苷及其苷元的工业生产提供依据。     

Separation and purification of deoxynivalenol(DON) mycotoxin from wheat culture using a simple two-step silica gel column chromatography

Deoxynivalenol(DON) is a type B trichothecenes mycotoxin produced by several Fusarium species, often found in foodstuffs for humans and animals. DON is in great demand for the toxicological researches both in vivo and in vitro. In this work, wheat culture was inoculated with a Fusarium graminearum PH-1 strain for DON production. The solvent system for crude extraction was acetonitrile-water(84:16, v/v). A simple two-step silica gel column chromatography was employed to separate the DON mycotoxin from wheat culture, combined with preparative high performance liquid chromatography(preparative HPLC) to purify the compound. The solvent system for the second silica gel column chromatography was methylene chloride-methanol(17:1, v/v), which provided a good elution effect selected on thin layer chromatography(TLC). The target compound was identified by HPLC, and the chemical structure was confirmed by mass spectrometry(MS) and ~1H and ~(13)C nuclear magnetic resonance(NMR) spectroscopy. A total of 433 mg of purified DON was obtained from 1 kg of wheat culture, with a purity of 99.01%. The study had provided an easy-operating and cost-effective method to isolate an expensive compound in a simple way.     

AB-8大孔树脂纯化鸡骨草总皂苷的工艺研究

为了提高鸡骨草总皂苷的纯化效率,对AB-8大孔树脂纯化鸡骨草总皂苷的工艺条件及技术参数进行研究。以总皂苷吸附率、比吸附量和保留率为指标,考察AB-8大孔树脂对鸡骨草总皂苷的吸附及解吸性能。结果表明,鸡骨草皂苷提取液的上样质量浓度为1.00g/L,pH值为6.0,上样速度为2.0BV/h,上样量为2.0BV;吸附平衡后用3.5BV pH值为7.0的50%乙醇溶液洗脱,洗脱速度为4.0BV/h,总皂苷保留率为82.8%,纯化后纯度达到75.18%。     

葛根总黄酮的提取及其抗氧化性能研究

[目的]优化提取葛根总黄酮的最佳工艺条件,研究其抗氧化性能。[方法]用乙醇提取葛根总黄酮,通过正交试验,研究影响葛根总黄酮提取率的因素,确定最佳提取工艺参数;用硅胶柱层析法纯化葛根总黄酮提取物,采用BPCL法测定葛根总黄酮的抗氧化性能。[结果]正交实验表明,影响葛根总黄酮提取率的4个因素的强弱顺序为:温度>乙醇浓度>固液比>提取次数。提取葛根总黄酮的最佳工艺条件为:乙醇浓度70%,固液比为1∶8,提取次数3次,每次3h,温度80℃,葛根总黄酮的提取率为22.9%,样品纯度为15.5%。[结论]利用BPCL法测定葛根总黄酮对超氧自由基(O2-·)和羟基自由基(·OH)的抑制率,结果证明葛根总黄酮具有一定的抗氧化作用。     

从三七根、茎中快速批量分离提取三七皂苷R_1、R_2及人参皂苷Rg_1有效部位群的方法

从三七根、茎中快速批量分离提取三七皂苷R1、R2及人参皂苷Rg1有效部位群。三七根、茎经70%乙醇提取得三七粗皂苷,粗皂苷用D101大孔吸附树脂分离得三七总皂苷。三七总皂苷经硅胶柱"氯仿-甲醇-水"溶剂梯度洗脱过柱获得纯度为60%的三七皂苷R1、R2及人参皂苷Rg1有效部位群。此法适合于批量分离提取三七皂苷R1、R2及人参皂苷Rg1有效部位群。     

中药材板蓝根中20种农药的多残留快速分析方法

为研究板蓝根中20种农药多残留快速分析方法,以丙酮∶二氯甲烷(2∶1)为提取溶剂,采用超声波法提取,硅胶柱净化,石油醚∶丙酮(4∶6)淋洗,带电子捕获检测器的气相色谱仪检测农药残留。结果表明,该方法在0.01~15.0 mg.kg-1范围内线性关系良好,相关系数大于0.996 5。板蓝根中20种农药的平均添加回收率为74.1%~105.8%。该方法的最低检出限(LOD)在0.1~2.5μg.kg-1范围,定量检出限(LOQ)在0.4~8.2μg.kg-1范围,相对标准偏差小于14%。该方法快速、简便、价廉。