沙门氏菌的特征及检测方法研究进展

沙门氏菌是一种常见的食源性致病菌,蛋、家禽和肉类产品是沙门氏菌的主要传播媒介,食用带沙门氏菌的食物可使人中毒。因此,及时准确的检测对于预防沙门氏菌极其重要。本文综述了沙门氏菌的特征、快速检测方法和各种方法的优点与局限性,为沙门氏菌的快速检测提供理论依据,以期找到当下最适合检测沙门氏菌的方法。     

肠炎沙门氏菌快速检测方法的建立

利用针对肠炎沙门氏菌主要O因子抗原O9的3－47－26单克隆抗体建立了快速检测肠炎沙门氏菌的竞争ELISA方法（C－ELISA）。将被检样品与McAb作用，竞争性抑制了McAb与包被肠炎沙门氏菌的结合，同时，也减弱了酶标二抗与McAb的结合，以降低底物反应的颜色，从而达到检测样品的目的。试验结果表明，本方法只选择性地与肠炎沙门氏菌反应，而与其它沙门氏菌均不反应。通过与国标法对210份样品检测结果比较表明，竞争ELISA方法的敏感性和特异性分别为94．4％和97．7％，从而为肠炎沙门氏菌的检测提供了一种快速、敏感、特异的检测方法。     

鸡白痢沙门氏菌与其它致病性沙门氏菌的血清型特异性PCR鉴别检测方法的建立

为建立鸡白痢沙门氏菌与其他常见致病性沙门氏菌的血清型特异性快速PCR检测方法,本研究通过对Gen Bank中鸡白痢沙门氏菌、鸡伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌全基因组进行生物信息学分析,确定SEEP17495基因为鸡白痢沙门氏菌的检测靶基因,设计特异性引物,建立了一种能够直接从粪便样品中检测鸡白痢沙门氏菌的PCR检测方法。结果显示:该方法对于两株鸡白痢沙门氏菌均可以特异性地扩增出356 bp的目的片段,但对于7株常见非沙门氏菌致病菌和29株其他常见致病性沙门氏菌血清型的扩增结果均为阴性。该方法无论检测鸡白痢沙门氏菌纯培养菌,还是检测模拟鸡粪样品中的鸡白痢沙门氏菌,检测的灵敏度均为103cfu/m L。本研究建立的PCR检测方法具有良好的特异性和灵敏性,并且能够快速检测出粪便样品中的鸡白痢沙门氏菌,为鸡白痢沙门氏菌的检测提供了一种快速、有效的方法。     

基于pegB基因的鸡白痢沙门氏菌、鸡伤寒沙门氏菌分子鉴别方法的建立

为建立一种能快速、准确、简便区分鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌的方法，研究通过对鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌pegB序列进行分析，发现存在3个单核苷酸多态性位点，基于此建立了一种特异性PCR方法用于鉴别鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌。结果显示，该方法特异性强、耗时短，检测限为10.14 pg/反应。临床样品检测表明，该方法不仅具有良好的特异性，且操作比传统方法更为简便。该方法的建立为准确区分鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌提供了实用技术，将在分子检测中发挥重要作用。     

浅谈食品沙门氏菌的检测方法

沙门氏菌病是公共卫生学上具有重要意义的人畜共患病之一，其病原沙门氏菌属肠道细菌科，蛋、家禽和肉类产品是沙门氏菌病的主要传播媒介。为有效预防沙门氏菌病，人们在探索沙门氏菌检测方法的过程中，做出了不懈的努力，现将有关进展报告如下，并介绍两种快速检测沙门氏菌的试剂盒。     

环介导恒温扩增(LAMP)-检测沙门氏菌

建立一种能够快速准确地检测沙门氏菌的LAMP方法。根据沙门氏菌invA基因设计了引物,然后进行LAMP反应条件的优化、特异性试验,通过LAMP与PCR灵敏度的试验与实际样品进行检出率的比较。LAMP方法特异性好,最佳反应温度为63℃,只对沙门氏菌进行扩增;沙门氏菌的检测灵敏度为7～8cfu/mL。LAMP方法检测沙门氏菌特异性强、灵敏度高、时间短且操作简便,有望成为快速检测沙门氏菌的新方法。     

环介导恒温扩增（LAMP）——检测沙门氏菌

建立一种能够快速准确地检测沙门氏菌的LAMP方法。根据沙门氏菌invA基因设计了引物,然后进行LAMP反应条件的优化、特异性试验,通过LAMP与PCR灵敏度的试验与实际样品进行检出率的比较。LAMP方法特异性好,最佳反应温度为63℃,只对沙门氏菌进行扩增;沙门氏菌的检测灵敏度为7～8cfu／mL。LAMP方法检测沙门氏菌特异性强、灵敏度高、时间短且操作简便,有望成为快速检测沙门氏菌的新方法。     

荧光定量PCR快速检测食品中沙门氏菌方法的建立及初步应用

根据编码鼠伤寒沙门氏菌肠毒素stn基因的核苷酸序列设计1对引物和荧光探针，通过对荧光定量PCR反应体系和反应条件的摸索，建立了检测沙门氏菌的核酸荧光定量PCR方法。对该方法的特异性与敏感性研究结果显示，该方法检测沙门氏菌结果均为阳性，而非沙门氏菌均为阴性；对带有沙门氏菌肠毒素stn基因的阳性质粒的检测敏感性为4个／μL。用该方法对人工污染沙门氏菌的鲜猪肉和鲜鸡蛋进行检测，当检样中沙门氏菌初始含菌量分别为1CFU／g（鲜猪肉）和1CFU／g（鲜鸡蛋），经过12h的增菌后，检测结果均为阳性。该方法具有简便、快速、特异性强、敏感性高等特点。此研究为食品中沙门氏菌快速检测试剂盒的研制打下了良好的基础。     

沙门氏菌快速检测方法研究进展

沙门氏菌的检验在食品检测中具有重要意义。本文详细阐明了沙门氏菌的各种快速检测方法的原理 ,综述了其在食品沙门氏菌检测中的应用及其研究进展。免疫标记技术 ,细胞和分子生物学技术近年来以其敏感、快速、特异等特点在沙门氏菌快速检测中得到了广泛应用 ,尤其是 EL ISA和 PCR技术的应用已由实验室走向实际临床检测中。此外 ,本文还介绍了国外新近的几种沙门氏菌检测方法 ,展望了今后沙门氏菌检测方法的发展方向及实际应用前景     

畜禽及环境中沙门氏菌的PCR快速检测与控制

本文运用PCR技术检测家畜及环境中的沙门氏菌,25种沙门氏菌均获得特异性扩增,3种非沙门氏菌检测结果为阴性。表明PCR技术具有快速简便、敏感高和特异性强等优点,值得在沙门氏菌的快速检测中推广应用。并简要介绍了沙门氏菌的相关控制措施。     

畜禽及环境中沙门氏菌的PCR快速检测与控制

本文运用PCR技术检测家畜及环境中的沙门氏菌,25种沙门氏菌均获得特异性扩增,3种非沙门氏菌检测结果为阴性。表明PCR技术具有快速简便、敏感高和特异性强等优点,值得在沙门氏菌的快速检测中推广应用。并简要介绍了沙门氏菌的相关控制措施。     

PCR技术检测饲料中沙门氏菌的应用研究

用聚合酶链反应(PCR)技术检测饲料中沙门氏菌,对已知被沙门氏菌污染的动物饲料培养物均能检出阳性,说明本方法对检测饲料中沙门氏菌具有特异性高、灵敏、快速等特点,适用于快速、准确地检测饲料中沙门氏菌的需要。     

沙门氏菌检测方法的研究进展

沙门氏菌是一种重要的人畜共患病,建立一种快速而准确的检测方法一直是沙门氏菌检验研究的核心问题。本文综述了沙门氏菌的检测方法的最新研究进展,并展望了今后沙门氏菌检测方法的发展方向及实际应用前景。     

沙门氏菌检测方法研究进展

沙门氏菌是一种重要的人畜共患病,建立一种快速而准确的检测方法一直是沙门氏菌检验研究的核心问题.笔者对沙门氏菌的检测进展进行了概述.     

PCR技术检测饲料中沙门氏菌的应用研究

用聚合酶反映(PCR)技术检测饲料中沙门氏菌。对已知被沙门氏菌污染的动物饲料的培养物均能检出阳性,说明此方法对检测饲料中沙门氏菌具有特异性高、灵敏、快速等特点,适用于快速和准确地检测饲料中沙门氏菌的需要。     

沙门氏菌检测方法研究进展

沙门氏菌是一种重要的人畜共患病原菌,建立一种快速而准确的检测方法一直是沙门氏菌检验研究的核心问题。作者通过查阅大量文献,对近年来沙门氏菌的检测进展进行了概述。     

沙门氏菌LAMP快速检测方法的建立

为实现沙门氏菌的快速检测,根据沙门氏菌特异性invE、hilA、invA、hut基因编码区序列,分别设计合成4套引物,通过对引物筛选和反应条件优化,建立了以invA特异性基因设计合成为引物的沙门氏菌环介导等温扩增检测方法。本方法对沙门氏菌定性检测灵敏度可达到101CFU/mL (细菌浓度),其灵敏度比普通PCR高10倍且反应结果易于观察。以6种沙门氏菌和8种非沙门氏菌细菌DNA为模板进行LAMP扩增检测,并无交叉反应。结果显示,设计的LAMP引物组和建立的沙门氏菌的LAMP检测方法具有特异性好、灵敏度高、快速、费用低廉等优点,可应用于动物和食品样品中肠道沙门氏菌6个亚种的快速检测。     

沙门氏菌的危害及其快速检测方法的研究进展

沙门氏菌是一种常见的重要人兽共患病原菌,介绍了其病原学、分类、危害及原因以及目前国内外对沙门氏菌检测方法的最新进展,主要包括:以抗体为基础的快速检测方法、以核酸为基础的快速检测方法、PCR-ELISA技术,并把它们和传统检测方法进行了比较。     

发酵乳中沙门氏菌依赖解旋酶恒温基因扩增快速检测方法的建立

建立依赖解旋酶恒温基因扩增（helicase-dependent isothermal DNA amplification,HDA）快速检测发酵乳中沙门氏菌方法。以沙门氏菌invA基因序列为目的基因,设计特异性引物,优化反应体系中UvrD解旋酶及T4 gp32添加量,建立最优反应体系。通过HDA方法直接检测发酵乳中沙门氏菌,扩增其产物后进行电泳检测,验证方法特异性。结果表明：采用HDA快速检测法检测发酵乳中沙门氏菌特异性良好,优化后反应体系体积50 μL时,UvrD解旋酶添加量为0.10 μg,T4 gp32添加量为5.0 μg,得到与设计序列长度（304 bp）一致的扩增产物,检出限为2.6×102 CFU/g;该方法用于快速检测发酵乳中沙门氏菌能够满足检测需求,具有较高的灵敏度、易操作,可作为一种基础且快速的方法检测发酵乳中沙门氏菌。     

鸡白痢沙门氏菌PCR检测技术的建立与应用

为鸡沙门氏菌的临床检测提供了一种更快速、敏感、特异的诊断,参照GeneBank中已公布的的鸡白痢沙门氏菌fliC基因序列,合成出了一对引物,使用PCR法对1株沙门氏标准菌株和其他3株非沙门氏菌标准菌株进行DNA抽提扩增并检测其敏感度。采用上述技术,对12份可疑病料及10份饲料进行PCR检测,同时与传统检测方法进行比较。结果表明1株沙门氏菌PCR产物出现600 bp的特异性DNA扩增带,而非沙门氏菌均未出现扩增条带,证明所设计引物具有沙门氏菌特异性;通过敏感度检测,此PCR体系能检出50 pg以上的细菌DNA,敏感性较高。运用PCR法阳性检出率及敏感性均高于常规检测方法。由此可见,沙门氏菌PCR检测是一种快速、敏感和高度特异的诊断方法。