应用抗原捕捉ELISA快速检测牛病毒性腹泻病毒

在96孔微量板中包被BVDV(Erns)单克隆抗体,加入被检血清,血清中的病毒特异性地与抗体结合,形成抗原抗体复合物.洗涤去除未结合的物质,加入酶标抗体连接物.再洗去未结合的酶连接物,加入底物后显色,加入终止液终止反应.用装有450 nm滤光片的酶标仪进行检测,通过计算S-N值,判定血清中BVDV抗原阴性、阳性.此法具有特异、快速、灵敏的特点.     

猪繁殖与呼吸综合征对猪瘟免疫效果的影响

本试验通过对三个猪场猪繁殖呼吸综合征 (PRRS)及猪瘟血清抗体的测定 ,提出PRRS可影响猪瘟的免疫效果 ;对PRRS阳性猪用猪瘟兔化弱毒疫苗加强免疫后 ,可明显提高猪瘟血清抗体水平 ,增强猪瘟的免疫效果     

应用ELISA快速检测牛羊副结核病

在96孔微板中包被抗原，加入被检血清，经温育后，抗体特异性地与抗原相结合，形成抗原一抗体结合物。洗涤去除未结合的物质，与加入的酶结合物(HRPO)相结合。再洗去未结合的酶结合物，加入底物后显色．加入终止液终止反应。用装有630nm(或620nm、650nm)滤光片的酶标仪进行检测，通过计算S／P值，判定血清中副结核抗体阴、阳性。此方法具有快速、灵敏、准确的特点。     

猪瘟野毒感染抗体阻断ELISA检测方法的建立与初步评价

以猪瘟野毒E2蛋白为包被抗原、辣根过氧化物酶标记的猪瘟野毒单抗作为酶标抗体,建立检测猪瘟野毒抗体的阻断ELISA方法。猪瘟野毒E2最适包被浓度为0.03μg/mL,待检血清最适稀释度为1∶4,酶标猪瘟野毒单抗稀释度为1∶1 000。用建立的阻断ELISA方法检测369份临床阴性血清,计算阻断率,确定临界值,阻断率>40%为猪瘟野毒抗体阳性,阻断率≤40%为猪瘟野毒抗体阴性。用建立的ELISA方法检测84份血清,其中78份为免疫猪瘟疫苗的血清,6份为猪瘟病毒感染血清。结果显示,78份免疫血清均检测为猪瘟野毒抗体阴性,6份猪瘟感染血清均检测为猪瘟野毒抗体阳性。因此可初步判定该方法可用于鉴别诊断猪瘟病毒自然感染动物和C株疫苗免疫动物的血清抗体,并为临床检测猪瘟野毒抗体提供便捷、快速,精准的检测工具,对猪瘟的临床诊断、预防以及猪瘟净化工作具有非常重要的参考意义。     

石河子地区规模化猪场主要疫病血清流行病学调查

为了解石河子地区规模化猪场主要疫病的血清流行病学现状,为猪场制定更为科学合理的免疫程序提供依据,减少养殖户的损失,采集石河子地区4个规模化猪场(分别编号为A、B、C、D)猪只血清,用酶联免疫吸附试验(ELISA方法)检测3种疫病的血清抗体阳性率。结果显示检测的587份血清中,猪蓝耳病抗体总阳性率为88.42%;620份血清中,猪瘟抗体阳性率为81.77%;344份血清中,猪O型口蹄疫的抗体阳性率为87.79%。3种传染病中猪瘟的抗体阳性率最低,口蹄疫的抗体阳性率最高,说明石河子地区养殖场应加强对猪瘟的预防接种,防止猪瘟的暴发。     

猪瘟抗体致敏绵羊红细胞自凝现象的消除及其在反向间接血凝中的应用

1962年 Segre 即用反向间接血凝试验(RIA)诊断猪瘟病毒,但 RIA 推广应用发展很慢,除了其难以标准化、各批制剂结果差异较大外,一个很重要的原因是猪瘟抗体致敏绵羊红细胞(SRBC)容易发生自凝,不仅影响试验结果,而且使一些人对其特异性表示怀疑。本研究对猪瘟抗体致敏 SRBC 出现自凝的一些条件进行了一些探讨;对不同种动物血清在消除这种自凝方面进行了较系统的研究;将这种不同血清处理过的自凝致敏 SRBC 试用于 RIA 试验并与非自凝致敏 SRBC 的 RIA 试验进行了比较,现报告如下:一、材料与方法1.SRBC 采自健康成年公绵羊,以阿氏液抗凝和保存,以生理盐水洗涤三次后使用。2.正常兔、豚鼠、猪、鸡血清均采自成年     

用MAB-ELISA对仔猪母源猪瘟抗体的试验

用猪瘟兔化弱毒苗4头份免疫后的母猪3头，分别于分娩后定期日龄采血分离24头份血清样品，初生仔猪16头，分别于出生后定期日龄前腔静脉采血分离128头份血清样品，用单抗酶联免疫吸附试验检测血清猪瘟抗体滴度，结果表明，母猪猪瘟抗体效价持续较高，达100％保护率，哺乳前仔猪抗体效价为0，吃初乳后抗体水平不断提高，但抗体总体效价较低，仅有57．89％的保护率；仔猪20日龄前平源抗体水平差异较大，与母猪抗体水平不呈正相关。     

不同规模化种猪场经产母猪猪瘟抗体检测与免疫效果分析

<正>目前,我国防控猪瘟的主要手段仍然以高密度防疫为主,实践中猪瘟免疫失败的现象时有发生,因此了解猪场猪瘟免疫抗体的情况,为猪瘟的防控提供依据具有重要意义[1]。酶联免疫吸附试验(ELISA)作为目前应用最广、发展最快的免疫检测技术,是检测猪群抗体的主要方法,也是监测免疫后猪群抗体水平和评价免疫效果的主要手段[2]。笔者对8个不同规模猪场的母猪群的血清,用IDEXX公司的Herdchek猪瘟抗体检测试剂     

ELISA间接法检测猪瘟抗体的研究

本文介绍了以中国株猪瘟兔化弱毒乳兔组织冻干疫苗为原料提取猪瘟抗原,以酶标葡萄球菌蛋白 A(PPA)代替酶标抗猪IgG,建立ELISA间接法检测猪瘟抗体的方法。该方法与血清兔体中和试验对73份猪血清进行检测猪瘟抗体的同步试验,结果基本一致( P >0.05)。敏感性、特异性及准确性分别为100％、92.16％及94.52％。用该方法对1528头份猪血清及36头份猪扁桃体浸出液进行猪瘟抗体测定,结果稳定,重复性好。     

母猪繁殖障碍性疾病血清流行病学调查

重庆某规模化猪场仅进行了猪瘟的常规免疫,母猪发生流产、死胎等现象严重。采集的154份血清样品其中母猪血清样45份,仔猪血清样109份）用单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验检测猪温抗体水平,结果母猪血清猪瘟抗体阳性率为82.22%,仔猪血清抗体阳性率为0;用乳胶凝集试验检测伪狂犬病、细小病毒病抗体,母猪血清抗体阳性率分别为20％、6.67%,仔猪血清抗体阳性率分别为5.5%、4.59%;用间接血球凝集试验检测衣原体病、弓形体病抗体,母猪血清抗体阳性率分别为13.33%、0,仔猪血清抗体阳性率分别为10％、0;用试管凝集由氏杆菌病为阴性。     

应用FA及PPA-ELISA技术对猪瘟的检测

用免疫荧光抗体诊断技术及单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验诊断技术对疑为猪瘟病毒感染猪进行了检测 ,重点阐述了 2种方法的技术原理和操作过程。通过用免疫荧光抗体诊断技术检测了 5份病料 ,其中有 2份为阳性 ,阳性率为 40 % ;用单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验诊断技术检测了猪瘟血清抗体 ,在 40头母猪血清样品中 ,猪瘟弱毒抗体效价 OD值较高 ,有 1 0 0 %的保护率 ,但是发现母猪群中有 1 0 %隐性猪瘟感染 ,其强毒抗体效价 OD值大于 0 .5,体内带有猪瘟病毒。结果及过程表明此两种诊断方法检测快速、鉴别准确、分辨率高     

吉林市不同规模猪场种猪猪瘟抗体检测与猪瘟净化措施初探

本试验使用Herd Chek猪瘟抗体检测试剂盒针对吉林市5个不同规模养猪场的种猪猪瘟血清抗体进行检测。结果表明:试验的5个猪场种猪猪瘟抗体平均合格率(抗体阻断率≥50%)为81.58%,猪瘟抗体平均不合格率(抗体阻断率50%)为18.42%;针对抗体检测不合格种猪使用猪瘟脾淋苗结合黄芪多糖注射液加强免疫一次,种猪群猪瘟抗体平均合格率达到92.12%,比首次检测提高了10.54%,对于加强免疫后不合格的种猪予以淘汰进行净化。     

用单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验监测猪瘟抗体发现隐性猪瘟

用单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验监测瘟血清抗体。测得该场母猪４０份血清样品中，猪瘟弱毒抗体效价ＯＤ值较高，有１００％保护率，测得仔猛进４０份血清样品中，猪瘟弱毒抗体效价ＯＤ值适中，有８７．６％的保护率。     

不同日龄仔猪的猪瘟弱毒抗体水平的测定

利用猪瘟单克隆抗体纯化抗原酶联免疫吸附试验试剂盒分别对２０、３６和６７日龄三个不同时期共１８５份仔猪血清进行猪瘟抗体水平的检测。结果,猪瘟弱毒抗体阳性率分别为０、８３．３３％和２１．９５％。     

不同免疫程序对猪瘟活疫苗免疫效果的研究

为了解规模化猪场猪瘟疫苗免疫情况和猪瘟病毒感染情况,采用商业化ELISA试剂盒,对大庆市某规模化猪场530份血清样品分别进行猪瘟抗体水平和猪瘟病毒抗原检测。试验结果表明:经过二次免疫的猪群,猪瘟抗体阳性率为95.0%(115/121),比一次免疫的抗体阳性率66.1%(74/112)提高了28.9%,而且抗体水平整齐度较一次免疫显著提高。在530份受检猪只中,利用ELISA试剂盒检测血清中的猪瘟抗原,阳性检出率为0%,表明该猪场猪瘟病毒感染风险较低,对18份可疑样品用RT-PCR检测,没有检测出猪瘟病毒。研究表明,对当前的猪场仅仅实施一次免疫是不够的,只有实施二次免疫,才能获得较高的免疫抗体水平,有效地防控猪瘟疫病的发生。     

用微量酶标抗体血清中和试验检测猪瘟病毒抗体的初步研究

检测猪瘟病毒(HCV)抗体的实验室诊断方法有琼脂扩散试验、对流免疫电泳试验、补体结合试验、间接酶标抗体试验和间接荧光抗体试验等。但这些实验的敏感性都比较低,而且不能区分出HCV和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的抗体。据报道,用酶标抗体和荧光抗体血清中和试验检测HCV     

间接血球凝集试验法用于猪瘟抗体水平的监测

(一)华南农大传染病教研室与广东省农业厅合作,经过多方研究,现已研究成功间接血球凝集试验法。用于对猪瘟免疫猪群进行猪瘟抗体水平监测。通过对已知猪瘟阳性和阴性血清的反复检测;用羊肾细胞培养的猪瘟兔化弱毒对已知猪瘟阳性血清中和后进行间接血凝抑制试验;对沙门氏菌多价血清,肠道致病性大肠艾希氏菌多价血清,布     

乳猪猪瘟被动与主动免疫效果的监测报告

为了摸清猪瘟母源抗体的作用情况 ,了解乳猪实施接种猪瘟三联苗后产生免疫力的确切效果 ,笔者于 2 0 0 0年 3～ 6月对我州坝固种畜场的 4头孕猪 (大约克 )及其仔猪 (与长白杂交的后代共 36头 )进行了被动与主动免疫效果的监测。应用正向血凝试验检测生产母猪及其仔猪血清中的抗猪瘟抗体滴度 ,同时还检测实施主动免疫后乳猪不同时期血清中抗猪瘟抗体的消涨变化。发现孕猪有抗猪瘟抗体的比率为75 % ;其仔猪通过母体获得抗猪瘟抗体的比率为 41 67% ;对未满双月的仔猪接种猪瘟三联苗后 ,其血清中产生有效抗猪瘟抗体的比率比通过母体被动免疫而获…     

PRRSV ORF5基因和CSFV E2基因重组真核表达质粒的构建及小鼠免疫试验

根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)已知序列设计3对引物,采用RTPCR方法扩增PRRSV ORF5基因和CSFV E2基因,目的基因依次插入真核表达载体pcDNA4.0,经PCR、酶切及测序分析,重组质粒构建成功,并命名为pcDNA4.0-ORF5-E2.重组质粒回收提纯后,以100 μg/只剂量免疫小鼠,免疫3次.三免后10 d采血并制备血清,用间接ELISA检测小鼠血清中PRRSV及CSFV抗体效价.结果显示,所构建的重组质粒能够诱导小鼠产生PRRSV及CSFV抗体.     

云南省楚雄州部分地区猪瘟血清学调查

为了解楚雄州部分地区的猪瘟免疫情况,利用酶联免疫法(ELISA)对楚雄市、南华县和禄丰县随机采取的393份血清进行猪瘟抗体检测,并对各县(市)的调查数据加以比较,了解猪瘟在楚雄州部分地区的免疫情况。结果显示,楚雄州部分地区均有较高的猪瘟抗体阳性率,各县(市)的猪瘟抗体阳性率都在80%以上,有的县(市)猪瘟抗体甚至达到了100%。说明楚雄州部分地区的猪瘟免疫效果较好,猪瘟免疫成功。