中草药对兔球虫卵囊体外发育的影响

为探讨白头翁、常山、南瓜子、青蒿、柴胡、绞股蓝、秦皮、石榴皮、板蓝根、黄柏、槟榔、马齿苋等12味中草药水煎剂对兔球虫卵囊孢子化的影响,选用100%、50%、25%不同浓度的单味药物对未孢子化的兔球虫进行体外抑制试验,于第3、5d 分别计数。然后,洗去中药组的药液,加等量2.5%的重铬酸钾溶液,继续培养3天,计算每组卵囊的孢子化率。结果表明,所选用的12种中草药中白头翁、南瓜子、柴胡、绞股蓝的3个浓度均可以明显抑制卵囊的孢子化;而石榴皮、马齿苋、板蓝根仅100%浓度抑制球虫卵囊有一定效果;常山、青蒿、秦皮、黄柏、槟榔抑制球虫卵囊孢子化的作用效果不明显。洗去中药后,只有100%、50%浓度的绞股蓝有部分卵囊没有孢子化,白头翁、南瓜子、柴胡、马齿苋组兔球虫在重铬酸钾环境中仍可继续生长,这说明单味中药对卵囊只能抑制其发育而不能有效杀灭,即脱离开中药环境,兔球虫仍可继续发育。     

用紫茎泽兰预防鸡球虫病

用紫茎泽兰叶的8种不同试剂提取物处理鸡球虫卵囊,并将球虫卵囊进行培养,结果显示,经处理后的球虫卵囊平均死亡率显著高于对照组,表明紫茎泽兰提取物能抑制球虫卵囊的发育。再分别用8种提取物处理球虫孢子囊,用处理过的孢子囊接种小鸡,结果显示,处理后的孢子囊感染能力下降,表现为试验组小鸡的病情明显轻于对照组。     

8种中药材水提物对兔球虫卵囊孢子化的影响

【目的】探明土荆皮、穿心莲、川楝子、桉叶、枯矾、蛇床子、石榴皮和苍术8种中药材的抗球虫卵囊孢子化作用,为中草药应用于兔球虫病的防治提供参考。【方法】采用土荆皮、穿心莲、川楝子、桉叶、枯矾、蛇床子、石榴皮和苍术8种中药材不同浓度(25mg/mL、50mg/mL、75mg/mL、100mg/mL、125mg/mL)水提物对兔球虫卵处理不同时间(2h、4h、16h),观察其对兔球虫卵囊孢子化的影响。【结果】8味中药材水提物对兔球虫卵囊孢子化均具有不同程度的抑制作用,大部分中药材浓度越高,抑制效果越好,与作用时间有一定的相关性。抑制兔球虫卵囊孢子化的效果与药材种类有关,蛇床子的抑杀效果与时间和浓度共同作用有关,土荆皮、桉叶、穿心莲、枯矾等7种药物的浓度是影响体外抗球虫卵效果的重要因素。【结论】根据卵囊孢子抑制率,125mg/mL土荆皮作用16h效果最好,其对兔球虫卵的抑卵囊孢子率为83.10%;125mg/mL川楝子作用16h的效果最差,其对兔球虫卵的抑卵囊孢子率为13.27%。     

条石鲷胚胎及仔稚鱼的发育

通过对条石鲷胚胎发育和仔鱼发育形态的观察,确定了条石鲷早期发育的进程。条石鲷的受精卵为圆球形、透明、浮性,卵径为0．90～0．95mill,油球1个,卵裂为盘状卵裂。在水温23～24℃,盐度26～28的条件下,受精后7h 10mirh胚胎发育至原肠期;受精后12h,眼囊形成;受精后20h 30min,心跳开始搏动;受精后26h 30min仔鱼孵出。初孵仔鱼全长1．78～2．03min,至5日龄全长3．25～3．30min时,卵黄囊完全消失;至8～15日龄,全长3．50～4．97mm时,鳔形成;至18．20日龄,全长7．10～7．31min时,尾鳍鳍条发育完整。     

净球散对球虫病雏鸡部分血液指标的影响

以120只15日龄AA肉仔鸡为试验对象,研究人工感染球虫卵囊后,净球散对球虫病雏鸡部分血液指标变化的影响及其机制。结果表明:净球散对正常雏鸡红细胞数、白细胞总数、血红蛋白含量、白蛋白和血糖浓度的影响与对照组比较,差异不显著(p>0.05);应用净球散的球虫感染雏鸡的血液指标与感染对照雏鸡比较,红细胞数、血红蛋白含量、白蛋白和血糖的浓度显著升高(P<0.01或P<0.05),白细胞总数显著降低(P<0.01)。所以净球散可对抗球虫使感染雏鸡的红细胞数、血红蛋白含量、白蛋白和血糖浓度降低和白细胞总数升高的作用,其机制是药物杀灭球虫卵囊或抑制球虫卵囊在肠粘膜上的生长繁殖,而不是药物能促进雏鸡血液指标的改变。     

条石鲷胚胎及仔稚鱼的发育

通过对条石鲷胚胎发育和仔鱼发育形态的观察，确定了条石鲷早期发育的进程。条石鲷的受精卵为圆球形、透明、浮性，卵径为0．90～0．95mill，油球1个，卵裂为盘状卵裂。在水温23～24℃，盐度26～28的条件下，受精后7h 10mirh胚胎发育至原肠期；受精后12h，眼囊形成；受精后20h 30min，心跳开始搏动；受精后26h 30min仔鱼孵出。初孵仔鱼全长1．78～2．03min，至5日龄全长3．25～3．30min时，卵黄囊完全消失；至8～15日龄，全长3．50～4．97mm时，鳔形成；至18．20日龄，全长7．10～7．31min时，尾鳍鳍条发育完整。     

尿素溶液对兔球虫卵囊作用效果对比试验

利用尿素溶液、饱和食盐水、硫酸镁溶液和砂糖溶液作漂浮液,通过漂浮、离心方法收集兔球虫卵囊,在相同条件下进行3个试验比较。其一,不同漂浮液对浮集兔球虫卵囊作用比较;结果表明利用尿素溶液浮集效果最好(2.872 51×105个),其次是硫酸镁溶液(2.184 25×105个),最低的是砂糖溶液(1.792 81×105个)。其二,不同漂浮液对兔球虫卵囊破坏作用比较;结果表明20 m in时硫酸镁溶液对卵囊破坏率最低,破坏率最大的是饱和食盐水,随着时间延长各种破坏作用增大,60 m in时饱和食盐水和尿素溶液中有极少卵囊破损和卵囊变形现象。其三,不同漂浮液对兔球虫卵囊发育影响作用比较;结果表明硫酸镁溶液影响率最小(4.94%)最大的是饱和食盐水(7.47%)。     

8种中药水提物对兔球虫卵孢子化的影响

【目的】探明土荆皮、穿心莲、川楝子、桉叶、枯矾、蛇床子、石榴皮和苍术8种中药的抗球虫卵囊孢子化作用，为中草药应用于兔球虫病的防治提供参考。【方法】采用土荆皮、穿心莲、川楝子、桉叶、枯矾、蛇床子、石榴皮和苍术8种中药不同浓度（25mg/mL、50mg/mL、75mg/mL、100mg/mL、125mg/mL）水提物对兔球虫卵处理不同时间（2h、4h、16h），观察其对兔球虫卵囊孢子化的影响，筛选对兔球虫卵孢子化抑制效果好的中药。【结果】所选用的8味中药水提物对兔球虫卵囊孢子化均具有不同程度的抑制作用，大部分中药浓度越高，抑制效果越好，与作用时间有一定的相关性。抑制兔球虫卵孢子化的效果与药材种类有关，蛇床子的抑杀效果与时间和浓度共同作用有关，土荆皮、桉叶、穿心莲、枯矾等7种药物的浓度是影响体外抗球虫卵效果的重要因素。【结论】根据卵囊孢子抑制率，125mg/mL土荆皮作用16h效果最好，其对兔球虫卵的抑卵囊孢子率为83.10%；125mg/mL川楝子作用16h的效果最差，其对兔球虫卵的抑卵囊孢子率为13.27%。     

武定县滇中黄牛粪样寄生虫调查及其防治

为了解武定县滇中黄牛寄生虫感染情况和提供防治措施．对规模化奶牛养殖场和散养户．随机采集新鲜粪样43份．通过漂浮法和沉淀法检查寄生虫．结果：规模化奶牛养殖场22份,7份检出线虫卵,检出率为31．8％．2份检出吸虫卵,检出率为9．1％．6份检出球虫卵囊．检出率为27．3％：散养户21份,8份检出线虫卵,检出率为38．1％,未检出吸虫卵和球虫卵囊。结果表明：线虫卵检出率高,吸虫感染相对较低．规模化牛场球虫感染高。建议加强寄生虫病的监测和诊断,并采取综合防治措施。     

单味中药对兔球虫卵囊孢子化抑制效果的研究

研究单味中药在不同时间及不同浓度下对兔球虫卵囊孢子化抑制效果。首先,在同浓度单味中药培养的条件下进行观察,发现随着时间的延长,除鸦胆子中卵囊孢子化率没有升高外,其余中药球虫卵囊孢子化率均有不同程度的升高;鸦胆子对兔球虫卵囊孢子化有显著的抑制作用,仙鹤草、常山、青蒿、马鞭草、使君子和柴胡有一定的抑制作用;各组洗去中药继续培养3 d,发现各组卵囊孢子化率均呈上升趋势。这表明,虽然有些中药对兔球虫孢子化有一定的抑制作用,却不能杀灭卵囊。不同浓度中药抑制实验结果表明,仙鹤草、常山、青蒿、鸦胆子随浓度增高孢子化率改变明显,100%浓度抑制球虫卵囊孢子化的效果优于50%和25%浓度,而马鞭草、使君子、柴胡随浓度变化改变不明显。     

一株和缓艾美耳球虫的致病性和免疫原性

笔者对新分离到的和缓艾美耳球虫进行了致病性和免疫原性的研究。结果表明雏鸡感染1 000和5 000孢子化卵囊表现正常,肠道没有肉眼可见的病理变化。20 000个卵囊感染引起轻微病变。100 000个卵囊和500 000 个卵囊感染则产生较为明显的致病作用,与不感染对照组相比增重分别为70．3％和56．8％,肠道外观也产生明显可见的病变,根据0-4分肠道计分标准,分别为1．43和2．37。所有实验鸡都没有出现死亡。该虫株免疫原性较强,一次免疫5 000个卵囊/只,就能够对200 000个卵囊/只感染产生坚强的保护作用。     

γ——射线辐射对兔球虫孢子化卵囊致病性及免疫原性的影响

本试验研究了不同剂量(5KR、15KR、25KR、35KR、45KR)的γ-射线辐射对家兔的E.stiedai球虫的孢子化卵囊致病性及免疫原性的影响。结果证明:γ-射线辐射可以降低E.stiedai球虫的致病性,同时也减弱它的免疫原性。其程度取决于辐射剂量。通过辐射卵囊和未受辐射卵囊的比较试验,認为用辐射致弱的球虫卵囊作为疫苗来預防球虫病是可能的。     

The Effects of Exogenous Nitric Oxide on Eimeria tenella Oocysts

The effects of exogenous NO on Eimeria tenella oocysts were studied. The E. tenella oocystsfreshly isolated from feces of experimental chickens infected with E. tenella and sporulated E. tenella oocystswere treated in vitro by the well-known NO-donors, SNP, SPER/NO and GSNO. The results showed thatamong the 3 NO donors, only GSNO had significant effects on the percentage of sporulated oocysts, the inhibi-ting rate of purified oocysts was from 93 to 97%, and reached 100% on the oocysts in the feces of chickenswith E. tenella infection. GSNO also significantly decreased the virulence of E. tenella oocysts, and the oo-cysts treated by 2 -8 mmol L-1 GSNO almost lost their pathogenicity to chickens.     

Inhibitory Effects of S-Nitroso-Glutathione on Sporulation Process of Eimeria tenella Oocysts

To study the inhibiting effects of S-Nitroso-Glutathione (GSNO) on sporulation process of Eimeria tenella (E. tenella) oocysts by detecting the sporulation rate, GSNO as nitric oxide donor was used to treatE. tenella oocysts sporulated for different times; Several kinds of antioxidants and oxidants were used to investigate the inhibitory effects of GSNO on sporogony process of E. tenellaoocysts. The results showed that GSNO still inhibited the oocysts sporulated 10 h, but had few inhibiting effect on the oocysts sporulated for 14 h; the antioxidants, such as Vitamin C (VC), mannitol and sodium salicylate, could not eliminate the inhibitory effects of GSNO on oocysts; neither did the ferrous sulfate (FeSO4) nor Dithiothreitol (DTT). However, the oxidants, potassium dichromate (K2Cr2O7) and potassium permanganate (KMnO4) could obviously repress the effects of GSNO on oocysts. At present, the inhibitory mechanism of GSNO on unsporulated oocysts was still unclear.     

兔球虫病的诊断及虫种鉴定

为探讨兔球虫病的诊断方法,对新乡市某兔场以消瘦下痢为主要症状的病兔进行临床检查、粪便直接涂片检查、饱和食盐水漂浮检查,并对粪样中检出的球虫卵囊及其孢子化卵囊进行形态学观察和虫种鉴定。在粪便中检出大量的球虫卵囊,经鉴定,分别为盲肠艾美耳球虫、黄艾美耳球虫、肠艾美耳球虫、梨形艾美耳球虫、大型艾美耳球虫、中型艾美耳球虫和长型艾美耳球虫,最后确诊该兔场发生的是由多种艾美耳球虫混合感染引起的兔球虫病。     

鸡堆型艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA文库的免疫学筛选

[目的]寻找鸡球虫保护性抗原基因,为研究基因功能和研制抗鸡球虫疫苗奠定基础.[方法]将纯化的堆型艾美耳球虫孢子化卵囊于兔皮内多点注射,制备堆型艾美耳球虫抗血清,用间接酶联免疫吸附试验（ELISA）检测其效价,进行免疫学筛选.利用PCR对获得的阳性克隆进行初步鉴定.[结果]间接酶联免疫吸附试验结果表明堆型艾美耳球虫抗血清检测结果呈阳性,初步筛选到的疑似阳性斑经3次复筛后获得6个阳性克隆,1～3号克隆约为1 000bp,4～6号克隆约为1 500 bp.[结论]对堆型艾美耳球虫孢子化卵囊cD-NA文库获得的阳性克隆成功进行了免疫学筛选.     

柔嫩艾美耳球虫抗马杜拉霉素、地克珠利虫株特异消减文库的构建

 以遗传背景一致的柔嫩艾美耳球虫（Eimeria tenella）敏感株孢子化卵囊为驱动组，马杜拉霉素抗药株和地克珠利抗药株孢子化卵囊为试验组，利用抑制消减杂交（SSH）方法，通过两轮杂交和两次PCR分别构建了富含两个抗药株孢子化卵囊与敏感株孢子化卵囊之间差异表达基因的消减cDNA文库。随机从两个消减文库中分别挑取50个克隆，经PCR鉴定马杜拉霉素抗药株和地克珠利抗药株孢子化卵囊的消减文库重组率分别为96%和98%，差异基因片段大小分布在250 bp～1.0 kb之间。从每个文库中随机挑取65个阳性克隆经斑点杂交试验，分别选择表达量上调的6个克隆进行序列分析和同源性比较。结果发现，有4个cDNA片段可能是新基因片段，与地克珠利抗药株的产生有关；有3个新的cDNA片段可能与马杜拉霉素抗药株的产生有关。这些结果将为克隆全长cDNA和探索球虫抗药性产生及发展的分子机理奠定了一定的基础。     

柔嫩艾美耳球虫子孢子抗原的制备

[目的]为进一步研究柔嫩艾美耳球虫（E.tenella）的单克隆抗体奠定基础。[方法]给肉鸡雏接种E．tenella纯种孢子化卵囊：第5～10天收集鸡的粪便并标记、粗提，经卵囊孢子化、纯化孢予化的卵囊、计数卵囊后，最终制备出子孢子抗原。[结果]该方法制备E．tenella子孢子抗原较其他方法简单易行，不需太多专门仪器和培养液，一般实验室均可进行，效果良好。但所用时间较长。[结论]该试验成功分离提纯出了鸡的E．tenella卵囊，并获得了蛋白浓度较高的抗原，为单克隆抗体的制备提供了有力保障。     

中药复方口服液对鸡柔嫩艾美尔球虫病的疗效

将180只 13日龄供试公雏随机分成A、B、C、D、E、F 6组.每组30只.除F组外,其他各组每只鸡于15日龄经嗉囊感染8×104个柔嫩艾美尔球虫卵囊.依据抗球虫指数对中药复方治疗鸡柔嫩艾美尔球虫病的效果进行评价.结果表明,B组(含2%中药)的相对体质量增加率97.22%,存活率100%,病变值14,卵囊值5,抗球虫指数为178.22,药效良好.