单味中药对兔球虫卵囊孢子化抑制效果的研究

研究单味中药在不同时间及不同浓度下对兔球虫卵囊孢子化抑制效果。首先,在同浓度单味中药培养的条件下进行观察,发现随着时间的延长,除鸦胆子中卵囊孢子化率没有升高外,其余中药球虫卵囊孢子化率均有不同程度的升高;鸦胆子对兔球虫卵囊孢子化有显著的抑制作用,仙鹤草、常山、青蒿、马鞭草、使君子和柴胡有一定的抑制作用;各组洗去中药继续培养3 d,发现各组卵囊孢子化率均呈上升趋势。这表明,虽然有些中药对兔球虫孢子化有一定的抑制作用,却不能杀灭卵囊。不同浓度中药抑制实验结果表明,仙鹤草、常山、青蒿、鸦胆子随浓度增高孢子化率改变明显,100%浓度抑制球虫卵囊孢子化的效果优于50%和25%浓度,而马鞭草、使君子、柴胡随浓度变化改变不明显。     

8种中药水提物对兔球虫卵孢子化的影响

【目的】探明土荆皮、穿心莲、川楝子、桉叶、枯矾、蛇床子、石榴皮和苍术8种中药的抗球虫卵囊孢子化作用，为中草药应用于兔球虫病的防治提供参考。【方法】采用土荆皮、穿心莲、川楝子、桉叶、枯矾、蛇床子、石榴皮和苍术8种中药不同浓度（25mg/mL、50mg/mL、75mg/mL、100mg/mL、125mg/mL）水提物对兔球虫卵处理不同时间（2h、4h、16h），观察其对兔球虫卵囊孢子化的影响，筛选对兔球虫卵孢子化抑制效果好的中药。【结果】所选用的8味中药水提物对兔球虫卵囊孢子化均具有不同程度的抑制作用，大部分中药浓度越高，抑制效果越好，与作用时间有一定的相关性。抑制兔球虫卵孢子化的效果与药材种类有关，蛇床子的抑杀效果与时间和浓度共同作用有关，土荆皮、桉叶、穿心莲、枯矾等7种药物的浓度是影响体外抗球虫卵效果的重要因素。【结论】根据卵囊孢子抑制率，125mg/mL土荆皮作用16h效果最好，其对兔球虫卵的抑卵囊孢子率为83.10%；125mg/mL川楝子作用16h的效果最差，其对兔球虫卵的抑卵囊孢子率为13.27%。     

8种中药材水提物对兔球虫卵囊孢子化的影响

【目的】探明土荆皮、穿心莲、川楝子、桉叶、枯矾、蛇床子、石榴皮和苍术8种中药材的抗球虫卵囊孢子化作用,为中草药应用于兔球虫病的防治提供参考。【方法】采用土荆皮、穿心莲、川楝子、桉叶、枯矾、蛇床子、石榴皮和苍术8种中药材不同浓度(25mg/mL、50mg/mL、75mg/mL、100mg/mL、125mg/mL)水提物对兔球虫卵处理不同时间(2h、4h、16h),观察其对兔球虫卵囊孢子化的影响。【结果】8味中药材水提物对兔球虫卵囊孢子化均具有不同程度的抑制作用,大部分中药材浓度越高,抑制效果越好,与作用时间有一定的相关性。抑制兔球虫卵囊孢子化的效果与药材种类有关,蛇床子的抑杀效果与时间和浓度共同作用有关,土荆皮、桉叶、穿心莲、枯矾等7种药物的浓度是影响体外抗球虫卵效果的重要因素。【结论】根据卵囊孢子抑制率,125mg/mL土荆皮作用16h效果最好,其对兔球虫卵的抑卵囊孢子率为83.10%;125mg/mL川楝子作用16h的效果最差,其对兔球虫卵的抑卵囊孢子率为13.27%。     

紫茎泽兰处理鸡球虫卵囊的免疫效果评价

为了评价紫茎泽兰对鸡柔嫩艾美尔球虫卵囊活性的抑制效果,采用不同浓度紫茎泽兰提取液处理新鲜的鸡球虫卵囊,计算各组的孢子化率,并将处理后的孢子化卵囊接种幼鸡,再进行攻毒保护试验,通过测克卵囊数(指1 g粪便中含有的卵囊数)、抗球虫指数等指标,综合评价紫茎泽兰对鸡球虫卵囊活性的影响。结果显示,紫茎泽兰处理组的球虫孢子化率受到不同程度的抑制,与对照组存在显著差异(P0.05),对处理组幼鸡进行免疫攻毒,其存活率(100%)、抗球虫指数(186.6)、增质量率(99.6%)和病变记分(+0.7)均优于阳性对照组,且免疫组与阳性对照组抗球虫指数之间差异极显著(P0.01),表明紫茎泽兰可致弱鸡球虫卵囊活性,为紫茎泽兰研制成病原致弱剂或杀虫剂奠定了基础,也为球虫致弱和球虫基因缺失苗的研究提供了新思路。     

兔球虫病的诊断及虫种鉴定

为探讨兔球虫病的诊断方法,对新乡市某兔场以消瘦下痢为主要症状的病兔进行临床检查、粪便直接涂片检查、饱和食盐水漂浮检查,并对粪样中检出的球虫卵囊及其孢子化卵囊进行形态学观察和虫种鉴定。在粪便中检出大量的球虫卵囊,经鉴定,分别为盲肠艾美耳球虫、黄艾美耳球虫、肠艾美耳球虫、梨形艾美耳球虫、大型艾美耳球虫、中型艾美耳球虫和长型艾美耳球虫,最后确诊该兔场发生的是由多种艾美耳球虫混合感染引起的兔球虫病。     

抗球虫中草药添加剂抗鸡柔嫩艾美尔球虫的研究

为研究中草药添加剂对鸡柔嫩艾美尔球虫的抗球虫效果, 将14日龄的鸡150只,随机分为阴性对照组,阳性对照组,1%、2%和5%中草药添加剂组。对照组饲喂基础日粮,给药组在基础日粮的基础上分别添加1%、2%和5%中草药添加剂。除阴性对照组外,每只鸡接种孢子化艾美尔球虫卵囊5×10⁴个。根据成活率、相对增重率、卵囊值、病变计算抗球虫指数,并对肠道分离的球虫卵囊进行了体外的孢子化培养,评价对球虫卵囊孢子化的抑制作用。结果显示, 2%中草药添加剂抗球虫指数为169,对体外卵囊孢子化抑制作用最高。     

兔球虫病的诊断及虫种鉴定

探讨兔球虫病的诊断方法,为兔球虫病的诊断和防治提供理论依据.对河南省新乡市某兔场以消瘦下痢为主要症状的病兔进行临床检查、粪便直接涂片检查、饱和食盐水漂浮检查,以及对粪样中检出的球虫卵囊及其孢子化卵囊进行形态学观察和虫种鉴定.结果发现,粪便中检出大量球虫卵囊,分别为盲肠艾美耳球虫、黄艾美耳球虫、肠艾美耳球虫、梨形艾美耳球虫、大型艾美耳球虫、中型艾美耳球虫和长型艾美耳球虫,因此,确诊该兔场发生的是由多种艾美耳球虫混合感染引起的兔球虫病.     

家兔感染黄艾美耳球虫的病理学变化及卵囊形成的观察

用２０００个孢子化的黄艾美耳球虫卵囊灌胃感染无球虫兔，２４０ｈ手术后取肠道样品，制片，光镜观察，结果表明，黄艾美耳球虫为家兔的强致病种，感染后盲肠的组织病理学变化最严重；盲肠基部是卵囊形成的主要部位．圆小囊，蚓突，结肠是卵囊形成的次要部位。     

对氯间甲酚及复方对氯间甲酚对鸡柔嫩艾美耳球虫卵囊的抑杀效果

为验证苯酚类消毒剂对鸡球虫卵囊的抑杀作用，采用不同浓度的单体和复方对氯间甲酚消毒剂与未孢子化的柔嫩艾美耳球虫卵囊共孵育，检测其对卵囊孢子化率的影响；与孢子囊共同孵育，通过子孢子脱囊率评价其对子孢子释放的干扰。孢子化卵囊经过不同浓度消毒剂直接浸泡、粪便干扰下浸泡或喷雾处理后经口接种雏鸡，通过OPG和盲肠病变记分探究消毒剂处理对卵囊的繁殖力和鸡的致病性的影响。结果显示， 2种消毒剂均可使孢子化率和子孢子脱囊率显著下降，且3种浓度的复方对氯间甲酚与3%氨水对照组（PC）的消毒效果无显著差异。直接浸泡处理试验结果显示，2%和3%复方对氯间甲酚 （HTS2和HTS3）具有更为显著的抑杀效果，与PC无显著差异；粪便干扰试验结果显示，粪便作用下这两种消毒剂对球虫卵囊仍有理想的抑杀效果；喷雾处理试验结果显示，3%对氯间甲酚（HT3）对球虫卵囊抑杀效果最好，显著优于PC组（P＜0.05），而2%对氯间甲酚（HT2）、HTS2和HTS3组的抑杀效果与PC组无显著差异。研究结果表明，不同浓度下这2种消毒剂对孢子化和未孢子化的柔嫩艾美耳球虫卵囊都有一定的抑杀作用，综合比较，复方对氯间甲酚消毒剂具有更强的抑杀球虫卵囊效果，具有代替氨水成为鸡球虫消毒剂的潜能。     

鸡球虫的分离与感染试验

[目的]为探讨长期有效的鸡球虫病防控方法奠定基础.[方法]分离并培养鸡球虫卵囊,通过感染雏鸡试验研究其卵囊发育和感染的过程.[结果]分离到的球虫卵囊大多形态饱满,为宽椭圆形,少数为卵圆形,壁光滑,中间明显可见1个圆形核,原生质呈淡褐色,卵囊大小约为18.5～25.5 μm× 16.7～22.5 μm.正常的孢子化卵囊多能见到分化明显的4个孢子,18 h可看到部分卵囊孢子化,36h孢子化达80％.接种后发病雏鸡的体重缓慢增加,血便明显,死亡率较高,同时解剖可见盲肠病变明显,肠壁增厚,严重者因充满大量血液而盲肠肿大.[结论]根据卵囊的形态、发病鸡的临床表现、卵囊寄生部位和盲肠病理变化等特征,初步判断分离的球虫主要为柔嫩艾美耳球虫.     

亚硝基谷胱甘肽对鸡球虫脱囊的影响

为了解胆酸盐浓度、作用时间两种因素对亚硝基谷胱甘肽——GSNO处理鸡柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)孢子化卵囊脱囊的影响,试验采用L9(34)正交试验方法,通过镜检子孢子脱囊率来确定鸡球虫卵囊经GSNO处理后体外脱囊的最佳条件。结果表明,在胆酸盐浓度为0.75%,作用时间为2 h时,GSNO处理孢子化卵囊的脱囊率最高。     

西北地区高床平养模式下------ 5种球虫疫苗免疫效果的对比分析

为西北地区高床平养模式下筛选免疫效果较好的球虫疫苗,本试验分别对4个不同厂家的5种球虫疫苗进行免后效果评估对比试验。试验均采用2日龄海兰褐蛋鸡进行球虫的首次免疫及免后效果评估,在首免成功的前提下采用鸡只自然啄食粪便和收集粪便后人工孢子化孵育后进行球虫二次免疫,同时在人工孵育球虫孢子化卵囊时分别用沙子、谷糠和木糠作为球虫孢子化孵育的不同介质,经镜检后将孵育好的孢子化卵囊进行人工二免后对粪便中球虫卵囊数量、肠道损伤情况进行综合对比分析。通过试验筛选得出5种疫苗中E组为西北地区高床平养模式下球虫防控使用的最佳疫苗,人工孢子化孵育后拌粪二免效果优于自然二免,且在球虫卵囊孢子化孵育时对谷糠、木糠、沙子三种不同孵育介质孢子化孵育效果以及对肠道损伤的综合对比显示人工二免孵育介质应首选粒度适中的谷糠。     

猪等孢球虫纯种卵囊扩增及生物学特性研究

应用单卵囊分离技术,获得猪等孢球虫纯种卵囊,给6头3日龄长大二元仔猪每头经口一次人工感染30个纯种猪等孢球虫孢子化卵囊,收集纯种后代,再对6头3日龄长大二元仔猪每头人工感染2 000个孢子化卵囊继代扩增.观察人工感染仔猪的排卵囊规律包括潜隐期、显露期、排卵囊高峰期及每克粪便中卵囊数（OPG值）和仔猪感染后的临床症状,进行了扩增卵囊的孢子化过程及形态结构观察和显微照像.结果表明,感染30个猪等孢球虫孢子化卵囊的仔猪最早在感染后第8d（8 days post-inoculation,DPI 8）从粪中检出卵囊,排卵囊高峰期在DPI 17～21,持续4～5 d,显露期15～18 d;感染2 000个猪等孢球虫孢子化卵囊的仔猪最早在DPI 5从粪中检出卵囊,排卵囊高峰期在DPI 8～13,持续4～6 d,显露期7～13 d.潜隐期、显露期、OPG值与感染剂量存在相关关系,即感染剂量越小,潜隐期越长,显露期越长,OPG值越小;反之亦然.感染30个卵囊的仔猪无临床可见病征;感染2000个卵囊的仔猪呈现腹泻甚至黄色水样腹泻等明显症状.常规培养新收集的猪等孢球虫卵囊,2 h时胚孢子开始分裂,8 h分裂成2团,12 h形成2个孢子囊,20h开始形成子孢子并可见内残体,最早26 h卵囊完全孢子化;72 h时孢子化率达50%,96 h达80%.本试验扩增和继代扩增所获球虫卵囊,与亲本和文献报道的猪等孢球虫生物学特性相一致.     

猪等孢球虫纯种株的建立及其生物学特性研究

从哺乳仔猪的腹泻粪样中分离出等孢球虫卵囊,感染仔猪建立球虫纯种株.通过卵囊形态结构观察与18S rRNA PCR鉴定,鉴定该球虫分离株为猪等孢球虫.将6只24日龄断奶仔猪分为2组,分别感染4×102和104个孢子化卵囊,观察仔猪的临床表现及虫株的潜伏期、显露期和卵囊产量.结果表明,感染4×102个卵囊后仔猪未出现腹泻症状,感染104个卵囊后仔猪出现腹泻且持续6 d.感染4×102个孢子化卵囊时,潜隐期为5 d,显露期为7 d,每个卵囊产出5.72×103个卵囊;感染104个孢子化卵囊时,潜隐期为5 d,显露期18 d,每个卵囊产出6.41×102个卵囊.由此可见,该株猪等孢球虫对仔猪具有致病性,可用于构建猪等孢球虫病动物模型及其疾病学研究.     

杭州地区鸡球虫种类研究

对杭州地区的杭州市区、桐庐及建德等地的大型鸡场及个体养鸡场球虫感染情况进行了调查，通过对球虫卵囊的分离、培养，孢子生殖阶段虫体的形态观察，卵囊、孢子囊大小及卵囊孢子化时间的测定，初步将卵囊分为A型、B型、C型三种类型。分别用这三种卵囊接种雏鸡纯繁后，收集的卵囊人工感染15日龄的小鸡，观察并记录接种后的发病时间，症状及病理变化等，参照有关文献，鉴定球虫种类。经分析判定，杭州地区主要存在3个种，它们分别是柔嫩艾美耳球虫（Eimeria tenella)，毒害艾美耳球虫（E.necatrix)和巨型艾美耳球虫（E.maxima)。     

中药方剂孢囊净对鸡球虫病的防治效果研究

[目的]筛选和探讨有效防治鸡球虫病的中药方剂。[方法]首先使用球虫孢子化抑制试验对常用的抗鸡球虫中药进行筛选,结合出血抑制试验筛选出常用的止血中药,并组成中药方剂＂孢囊净＂。选择120只15日龄海兰灰蛋雏鸡随机分为6组,阴性对照组饲喂正常饲料,不接种柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊,其他5组均同时接种感染柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊1.0×104个/只,阳性对照组饲料中不添加任何药物,3个中药组分别按质量分数为0.5%、1.0%和1.5%孢囊净添加于饲料当中,西药组添加质量分数为0.01%磺胺喹啉钠饮水作为治疗对照,测定各组理化指标和抗球虫指数。[结果]1.0%和1.5%中药组均能明显减少红细胞的损失,与阳性对照组比较差异极显著（P〈0.01）,与西药组比较,差异显著（P〈0.05）;1.0%和1.5%中药组白细胞数量明显低于阳性对照组,差异极显著（P〈0.01）,凝血时间明显缩短,与阳性对照组相比差异显著（P〈0.05）;1.5%中药组抗球虫指数达到了193.53,为高效抗球虫中药。[结论]中药方剂孢囊净通过抑制球虫孢子化、杀灭球虫、减少出血等途径对鸡球虫病进行防治,达到良好的效果。     

γ——射线辐射对兔球虫孢子化卵囊致病性及免疫原性的影响

本试验研究了不同剂量(5KR、15KR、25KR、35KR、45KR)的γ-射线辐射对家兔的E.stiedai球虫的孢子化卵囊致病性及免疫原性的影响。结果证明:γ-射线辐射可以降低E.stiedai球虫的致病性,同时也减弱它的免疫原性。其程度取决于辐射剂量。通过辐射卵囊和未受辐射卵囊的比较试验,認为用辐射致弱的球虫卵囊作为疫苗来預防球虫病是可能的。     

蒜瓣浸出液抗柔嫩艾美耳球虫效果研究

为了考察大蒜浸出液在抗鸡球虫临床上的应用。试验设Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组,第Ⅰ组:卵囊分别投入50%、20%、10%的蒜瓣浸出液、2.5%重铬酸钾液中,恒温培养24、48、72 h后计算卵囊孢子化率。第Ⅱ、Ⅲ组:分别以50%蒜瓣浸出液抑杀的未孢子化、孢子化卵囊,恒温培养48 h洗净感染1×105个/只卵囊;第Ⅳ组:感染1×105个/只孢子化卵囊,以20%的蒜瓣浸出液作为驱虫中药替代饮水;第Ⅴ组:感染1×105个/只孢子化卵囊后不给药;第Ⅵ组:不感染不给药。结果表明,50%、20%浓度蒜瓣浸出液于24、48、72 h后卵囊孢子化率与对照组差异均显著(P<0.05);以第Ⅱ组雏鸡的平均增重及相对增重率最高,组间差异不显著,与感染对照组(Ⅴ)差异显著;第Ⅲ组平均OPG数仅次于感染对照组(Ⅴ),远高于Ⅱ、Ⅳ组差异显著;第Ⅱ、Ⅳ组卵囊比值在25%~50%区间,卵囊值均为10;第Ⅲ组卵囊比值在75%~100%区间,卵囊值为40;第Ⅲ、Ⅴ组部分鸡只出现血便;第Ⅲ组病变值(11.7)仅次于第Ⅴ组(23.3),第Ⅲ、Ⅳ组间差异显著;在第Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ3组中,ACI以第Ⅱ组(173.95)为最高,第Ⅳ组次之,2组均判为中等效果。第Ⅲ组ACI为117.55,小于120判为无效。蒜瓣浸出液对体外抑杀未孢子化卵囊感染、体内阻断球虫发育效果较好。     

治疗家兔球虫有良方

1.球虫散。配方:白头翁2份,黄柏1.5份,黄连1份,秦皮1.5份。共研细末过筛,按2%比例加入饲料中喂兔,可预防兔球虫病;按3%加入饲料喂兔,连喂5～7天,可治疗球虫病。2.白头翁汤。配方:白头翁15克,陈香、檬红藤各9克,常山、广木香各6克(供幼兔10只用量)。共煎汁,拌料喂兔,连喂5天,效果良好。     

肉兔球虫病的综合防治

球虫病是家兔的主要疾病之一,常以地方流行病的形式发生,家兔球虫病是由艾美尔科艾美尔属的多种球虫寄生于兔的肠道(斯氏艾美尔球虫寄生于胆管上皮细胞)上皮细胞内引起的.兔球虫卵囊在湿度55%～75%、温度20℃的外界环境中经过2～3d即可发育成熟而具有感染性.家兔感染球虫病,是由于家兔吃到了孢子化卵囊而引起的.断奶、变换饲料、营养不良、兔笼卫生差、饲料和饮水常被兔粪污染等都能促使球虫病的发生和散布.鼠类和苍蝇也可机械地搬运卵囊而散布病原、各个品种和不同年龄的家兔都容易感染球虫病,但以1.5～4月龄的幼兔最容易发病,死亡率也高.成年兔发病轻微,家兔耐过球虫病后无免疫性,且可长期带虫而不显症状,成为感染源.