高效液相色谱法检测鸡可食性组织中的磺胺氯吡嗪残留

对建立的一种鸡组织中磺胺氯吡嗪钠残留检测的高效液相色谱法进行复核验证。鸡组织样品中磺胺氯吡嗪钠残留经乙腈提取,正己烷去脂肪,MCX固相萃取小柱净化。采用高效液相色谱紫外检测器检测,流动相为乙腈-0.02mol/L磷酸二氢钾水溶液(35:65,V/V),紫外检测波长为272nm,外标法定量。结果显示,磺胺氯吡嗪钠标准工作液在0.04~20.0μg/mL范围内具有良好的线性关系(R^2=0.9999)。在鸡肌肉、肝脏、肾脏、皮脂各组织中添加浓度分别为40、100、200μg/kg时,各组织样品中磺胺氯吡嗪钠的回收率范围为74.70%~93.67%。磺胺氯吡嗪钠的检测限为20μg/kg,定量限为40μg/kg。复核验证的鸡组织中磺胺氯吡嗪钠残留检测高效液相色谱法可行,方法简便快捷,回收率高,适合鸡组织中磺胺氯吡嗪的残留检测。     

脱氢乙酸钠在肉鸡组织中的残留消除

研究脱氢乙酸钠作为饲料防霉剂在鸡组织中的残留消除,为其在鸡组织中的残留监控及休药期的制定提供理论依据。黄羽肉鸡连续饲喂200 mg/kg脱氢乙酸钠30 d后,于不同时间分别取肌肉、肝脏、肾脏和皮脂样品,采用反相高效液相色谱(HPLC)方法测定样品中脱氢乙酸钠含量。休药1 d时,鸡肾脏、肝脏、肌肉和皮脂中脱氢乙酸钠残留量分别为0.68、0.59、0.34和0.20 mg/kg。随着休药时间延长,各组织中脱氢乙酯钠的残留量逐渐降低,脱氢乙酸钠在肉鸡各组织中的残留水平依次为肾脏、肝脏、肌肉和皮脂。在组织中的残留消除半衰期分别为肾脏5.86 d、肝脏6.02 d、肌肉8.88 d及皮脂为10.38 d。若以0.2 mg/kg为临时最大残留限量(MRLs),则脱氢乙酸钠在鸡不同组织中的休药期分别为肾脏12.37d、肌肉9.37 d、肝脏9.18 d、皮脂4.16 d。得出结论:200 mg/kg脱氢乙酸钠拌料饲喂肉鸡30 d,在肉鸡各组织中的残留水平较低,均低于0.7 mg/kg;残留消除相对较快。     

磺胺对甲氧嘧啶和二甲氧苄啶在肉鸡体内的残留消除

采用高效液相色谱-串联质谱法研究磺胺对甲氧嘧啶(SMD)和二甲氧苄啶(DVD)预混剂在白羽肉鸡体内各组织中的残留消除规律。对48只健康白羽肉鸡连续饲喂添加1 000mg/kg磺胺对甲氧嘧啶和二甲氧苄啶预混剂(含SMD 200mg,DVD 40mg)的全价饲料10d,在停药后4h,1、3、6、9、12、15d分别宰杀6只鸡,采集各组织进行药物残留测定。通过空白样品添加回收试验,所有基质中SMD和DVD的定量限分别为10μg/kg和5μg/kg,SMD和DVD分别在50、100、200μg/kg和25、50、100μg/kg 3个添加水平下的平均回收率为71.7%~102.3%,相对标准偏差为1.0%~11.9%。结果表明,磺胺对甲氧嘧啶和二甲氧苄啶预混剂在肾脏中残留量最高,肝脏其次;肌肉和皮脂中的残留量显著低于肝脏和肾脏,停药9d时,残留量低于药物残留限量。综合各组织中总残留量和最高残留限量规定,建议磺胺对甲氧嘧啶和二甲氧苄啶预混剂在鸡的休药期为7d。     

盐酸土霉素可溶性粉在肉鸡组织中的残留消除研究

在常规养殖环境中,对不同日龄肉鸡分别给予250 mg/L和333 mg/L 50%盐酸土霉素可溶性粉,集中饮水给药,每日1次,连续5 d。停药后4 h,1 d,3 d,5 d,6 d,7 d,8 d,9 d,10 d宰杀肉鸡,采集可食性组织(肌肉、肝脏和鸡胗)样品,肌肉、肝脏和鸡胗组织中的残留量采用UPLC-MS/MS测定。结果表明:土霉素主要残留在肝脏组织中;肌肉、肝脏和鸡胗组织的消除速率相似;停药5 d后,两个剂量组的肌肉、肝脏中土霉素残留量均低于最高残留限量(MRL)。休药期计算软件WTl.4结果显示,上述两种方法给药后,建议休药期分别为7、8 d。     

鸡蛋中磺胺嘧啶、磺胺氯哒嗪、磺胺间甲氧嘧啶残留消除规律研究

本研究旨在分析磺胺嘧啶、磺胺氯哒嗪、磺胺间甲氧嘧啶在鸡蛋中残留消除规律,为蛋鸡在开产前合理用药制定休药期提供依据,并建立一种检测3种磺胺类药物在鸡蛋中残留的超高效液相色谱法。将60只试验鸡随机分为4组(试验组I、试验组II、试验组III、空白组),各药物按照说明书剂量拌料给药,空白组饲喂不含任何抗生素的空白料,连续给药5 d。收集的鸡蛋样品经乙酸乙酯超声提取,正己烷除酯,复溶液复溶,高效液相色谱C18柱分离后用紫外检测器检测(该方法的检测限为0.01 mg/kg)。结果显示,停药后12 d,磺胺嘧啶检出浓度低于0.01 mg/kg;停药后9 d,磺胺氯哒嗪检出浓度低于0.01 mg/kg;停药后12 d,磺胺间甲氧嘧啶检出浓度低于0.01 mg/kg;该结果提示磺胺嘧啶、磺胺氯哒嗪、磺胺间甲氧嘧啶分别在产蛋前12 d、9 d、12 d停用。     

替米考星在黄羽肉鸡组织中残留消除规律研究

在常规饲养条件下,以200 mg/kg替米考星剂量水平添加到饲料中饲喂4种黄羽肉鸡,连续饲喂5d,停药后6h,1、3、5、7、10、14 d每1品种肉鸡分别宰杀5只,采集每只鸡的肌肉和肝脏组织,用高效液相色谱-串联质谱法进行残留量测定.结果表明,替米考星主要残留于肉鸡的肝脏组织中;肌肉、肝脏中替米考星残留消除速率相似.停药14 d后,肌肉、肝脏中替米考星残留量均低于最高残留限量.建议替米考星在黄羽肉鸡临床休药期以20 d为宜.     

氟苯尼考注射液在鸡体内残留消除研究

［摘 要］为研究氟苯尼考注射液在鸡体内的残留消除规律。本实验采用35只约3kg左右的健康白羽鸡,随机分为2组,给药组30只,对照组5只。给药组用药量为20mg/kg/次,每隔48小时用药1次,连用2次,对照组不给任何抗菌药物,与给药组同环境饲养。在最后一次给药6h、24h(1天)、72h(3天)、120h(5天)、168h(7天)时采集肉、肝、肾、皮脂样本,经LC-MS/MS法测定组织中的氟苯尼考及其标示物氟苯尼考胺残留量,并利用WT1.4软件计算休药期。结果显示：氟苯尼考注射液在鸡肌肉、肝脏、肾脏及皮脂中的休药期分别是3.41d、2.06d、2.25d、1.47d。为保证兽药使用安全、消费者健康和食品安全,推荐氟苯尼考注射液在鸡体内的休药期为4d。     

鸡组织中磺胺氯吡嗪和磺胺氯哒嗪残留的HPLC检测方法

建立了一种鸡组织样品中磺胺氯吡嗪和磺胺氯哒嗪残留量的HPLC测定方法.鸡组织样品中的药物残留经乙腈和丙酮提取,正己烷去脂肪和MCX固相萃取小柱净化.洗脱液经浓缩后,其样品中的药物残留采用HPLC紫外检测器检测,流动相为乙腈/0.017 mol/L磷酸溶液(32/68),紫外检测波长为270 nm.2种磺胺药对照品溶液在0.02～1 mg/L范围内呈良好的线性相关(r＞0.999 7).在50、100,200 μg/kg的添加水平上,磺胺氯吡嗪和磺胺氯哒嗪残在鸡组织(肌肉、肝脏和肾脏)中的回收率在70%%～85%之间,日内和日渐变异系数分别小于8%和10%.在该检测条件下,上述两种磺胺药物在鸡组织中的检出限为20μg/kg,定量限为50 μg/kg.该检测能够满足鸡组织中磺胺氯吡嗪和磺胺氯哒嗪残留的检测要求.     

磺胺氯吡嗪钠-甲氧苄啶可溶性粉对鸡的安全性试验研究

本研究旨在评价磺胺氯吡嗪钠-甲氧苄啶可溶性粉对靶动物鸡的安全性,以指导临床安全合理用药。选择40只15日龄黄羽肉鸡,随机分为4组,每组10只,公母各半。以磺胺氯吡嗪钠计,各组分别以0(0 mg/L)、1(300 mg/L)、3(900 mg/L)和5(1500 mg/L)倍的推荐剂量混饮,连用7d。试验期间观察鸡的临床表现、体重变化和饲料利用率,试验结束后进行病理学检查,并测定血液学和血液相关生化指标的变化。结果表明,磺胺氯吡嗪钠-甲氧苄啶可溶性粉以3倍以下剂量饮水给药对鸡的生长性能无明显影响,在血液生理指标及生化指标方面,不具有剂量依赖性的显著变化。说明磺胺氯吡嗪钠-甲氧苄啶可溶性粉按推荐剂量(300 mg/L,以磺胺氯吡嗪钠计)饮水给药对靶动物鸡具有较大的安全性。     

恩诺沙星在黄羽肉鸡组织中残留消除规律研究

为了掌握恩诺沙星在黄羽肉鸡不同组织内的残留消除规律,确定该品种肉鸡的合理休药期。饲料中分别添加50、100和200mg/L三个梯度剂量的乳酸恩诺沙星,喂饲50日龄黄羽肉鸡,连续用药7d,分别在停药后0、3、5、7、8、9、10、12、15、20d时间点对肌肉、肝和肾等组织采样,用UPLC-MS/MS方法测定乳酸恩诺沙星残留浓度。结果100mg/L试验组(临床用药量)动物肌肉、肝、肾在分别停药10、7、7d后,药物残留量才低于最高残留限量,分别为0.055、0.178、0.159mg/kg。结果表明临床用药量乳酸恩诺沙星对于黄羽肉鸡的休药期应在10d以上。     

复方磺胺氯吡嗪钠不同组方与剂型对鸡球虫病的疗效

通过动物体内试验,比较复方磺胺氯吡嗪钠的不同组方与剂型对鸡球虫病的疗效。第一次试验设磺胺氯吡嗪钠+三甲氧苄啶(TMP)溶液组(0.02%,5 d)、磺胺氯吡嗪钠+TMP混悬液组(0.02%,5 d)、磺胺氯吡嗪钠+二甲氧苄啶(DVD)混悬液组(0.02%,5 d)、药物对照组(磺胺氯吡嗪钠可溶性粉,0.03%,5 d)、感染不用药组和不感染不用药组。第二次试验设磺胺氯吡嗪钠+TMP混悬液组(0.02%,5 d)、磺胺氯吡嗪钠+DVD混悬液组-1(0.02%,5 d)、磺胺氯吡嗪钠+DVD混悬液组-2(0.02%,3 d)、药物对照组(磺胺氯吡嗪钠可溶性粉,0.03%,3d)、感染不用药组和不感染不用药组。每组30只鸡。以血便记分、存活率、增重及相对增重率、病变记分与病变值、卵囊产量与卵囊值、抗球虫指数(ACI)等指标综合评定抗球虫效果。结果显示:磺胺氯吡嗪钠+TMP混悬液组(0.02%,5 d)和磺胺氯吡嗪钠+DVD混悬液组(0.02%,5 d)的抗球虫指数始终大于或接近180,为抗球虫高效水平;磺胺氯吡嗪钠+TMP溶液组(0.02%,5 d)、磺胺氯吡嗪钠+DVD混悬液组(0.02%,3 d)的抗球虫指数大于160,为抗球虫中效水平。提示:磺胺氯吡嗪钠+TMP混悬液(0.02%,5 d)和磺胺氯吡嗪钠+DVD混悬液(0.02%,5 d)对鸡球虫有较好的疗效。     

恩诺沙星可溶性粉在北京油鸡体内残留消除规律研究

为研究恩诺沙星可溶性粉在北京油鸡体内的残留消除规律，以确定休药期，试验采用推荐剂量（75 mg/L）和2倍推荐剂量（150 mg/L）恩诺沙星自由饮水方式连续对北京油鸡给药5 d，在最后一次给药后0（停药后4 h）、1、3、5、7、9、12和15 d，采集北京油鸡肝脏、肾脏、肌肉和脂肪，采用高效液相色谱串联质谱法测定各组织中的恩诺沙星及其代谢物环丙沙星的残留量，并用WT1.4软件计算休药期。结果显示，推荐剂量5%恩诺沙星可溶性粉在北京油鸡各组织的休药期分别为肝脏7.1 d、肌肉3.8 d、肾脏5.2 d、脂肪4.4 d,2倍推荐剂量的休药期分别为肝脏9.6 d、肌肉4.2 d、肾脏6.4 d和脂肪8.4 d。结果表明，恩诺沙星在北京油鸡的休药期可设置为8 d。     

磺胺氯吡嗪钠-二甲氧苄啶混悬液对鸡的靶动物安全性试验

为评价磺胺氯吡嗪钠-二甲氧苄啶混悬液对靶动物鸡的安全性,选择40只15日龄健康黄羽肉鸡,随机分成4组,每组10只.各组分别以0 mg/L、推荐剂量(300 mg/L)、3倍推荐剂量(900 mg/L)、5倍推荐剂量(1 500 mg/L)的磺胺氯吡嗪钠-二甲氧苄啶溶液饮水给药,连用5d.试验期间观察临床表现和体重变化,试验结束后进行病理学检查,并测定血液学和血液相关生化指标的变化.结果表明,磺胺氯吡嗪钠-二甲氧苄啶溶液在鸡以3倍以下推荐剂量用药,连用5d是安全的,在炎热季节可适当降低混饮时药物的浓度.     

阿莫西林在鸡组织中的残留消除规律

本试验旨在研究阿莫西林在鸡组织中残留消除规律。鸡组织样品经磷酸二氢钠溶液提取,乙腈去蛋白,正己烷去脂肪,饱和二氯甲烷萃取,上清液经水杨醛在酸性条件下沸水浴衍生化后,在激发波长358nm、发射波长440nm处用高效液相色谱荧光检测器检测。该方法测定鸡组织中阿莫西林的检测限为5μg/kg、定量限为13μg/kg。阿莫西林在鸡组织样品中平均回收率为73.64%~88.82%,相对标准差为6.21%~9.63%。各试验组京海黄鸡分别按体质量以30、60mg/kg剂量内服阿莫西林,每天1次,连续给药7d,休药4h后(零休药期)各组织中阿莫西林残留量最高,休药第3天各组织中阿莫西林残留量均迅速降低;休药后第5天阿莫西林残留量低于最高残留限量(50μg/kg);休药第9天所有组织中阿莫西林残留量均低于检测限;休药后相同时间点鸡肌肉中药物残留量最低,肝脏中的药物残留量最高;阿莫西林在鸡肾脏中残留比鸡肌肉、肝脏消除缓慢且消除时间长;阿莫西林在鸡组织中的残留量与给药剂量呈正相关。根据WT1.4软件计算所得,建议黄羽肉鸡按体质量以30、60mg/kg剂量给药,每天1次,连续7d后,其休药期(WT)分别为3、4d。     

基于生理模型和蒙特卡洛模拟预测多次灌胃后氟苯尼考在肉鸡体内的残留休药期

为了预测氟苯尼考在肉鸡体内的残留休药期,在前期建立的生理药动学模型基础之上,加入了氟苯尼考胺生成及处置模块,并与蒙特卡洛模拟相结合预测得到了肉鸡连续5次灌胃氟苯尼考(25 mg/kg·d)后各组织中氟苯尼考胺的浓度,最终以氟苯尼考胺为残留标示物计算得到氟苯尼考在肉鸡体内的残留休药期为1 d,并且多次灌胃给药后,氟苯尼考胺在肉鸡肝脏和肾脏中残留浓度较高,在皮脂中残留浓度较低,但自皮脂中消除最慢,且存在一定蓄积效应。     

头孢喹诺在黄羽肉鸡可食组织中残留消除规律研究

目的:为了掌握头孢喹诺在黄羽肉鸡可食组织中的残留消除规律,测算该品种肉鸡的合理休药期。方法:头孢喹诺原料药分别以0.5、1.0、2.0mg/kg 3个梯度剂量颈部皮下注射50日龄黄羽肉鸡,连续用药5d,分别在0、0.5、1、2、3、4、5、6、7、8d时间点对肌肉、肝和肾等组织采样,用UPLC-MS/MS方法测定头孢喹诺残留浓度。结果:1.0mg/kg试验组(临床用药量)动物肌肉、肝、肾在分别停药1、4、3d后,药物残留量分别为0.021、0.085、0.127mg/kg。结论:临床用药量头孢喹诺对于黄羽肉鸡的休药期应在4d以上。     

恩诺沙星混悬液的研制及其在鸡组织中的残留研究

以恩诺沙星为主药,采用正交试验筛选配方,研制恩诺沙星混悬液,并对该制剂的药剂学特征及其在鸡组织中的残留进行研究。药剂学研究表明,混悬液的性状、pH及药物含量均符合混悬剂质量要求,且稳定性良好、易于再分散。健康鸡在饮水中添加75 mg/L(以恩诺沙星计)混悬液,自由饮水,连续用药5 d后休药;休药第5天,肌肉、肝脏及"皮肤+脂肪"组织中药物总残留量(恩诺沙星+环丙沙星)分别为11.12±10.53、79.29±28.86、50.08μg/kg±22.09μg/kg,而肾脏组织未检出;休药第8天,肌肉、肾脏、肝脏组织中均未检出恩诺沙星及环丙沙星,"皮肤+脂肪"的总残留量为13.84μg/kg±10.82μg/kg。采用WT1.4软件处理数据,计算出该混悬液在鸡体内的休药期为6 d。     

氨苄西林在鸡组织中的残留消除规律

旨在研究氨苄西林在鸡组织中残留消除规律。鸡组织样品经磷酸二氢钠溶液提取,乙腈去蛋白质,正己烷去脂肪,饱和二氯甲烷萃取,上清液经甲醛在酸性条件下沸水浴衍生化后,在激发波长327nm、发射波长409nm处用高效液相色谱荧光检测器检测。结果显示:该方法测定鸡组织中氨苄西林的检测限为3.5μg·kg-1(S/N=3)、定量限为10.0μg·kg-1(S/N=10)。氨苄西林在鸡组织样品中平均回收率在75.31%~85.87%,变异系数均低于10.20%。各试验组京海黄鸡分别按体重以120、240mg·(kg·d)-1剂量内服氨苄西林,每天1次,连续7d给药后,休药4h(零休药期),各组织中氨苄西林的残留量最高,并在休药后第3天迅速降低。休药第5天后所有组织中氨苄西林残留量均低于最高残留限量(50μg·kg-1),休药第9天各组织中氨苄西林残留量均低于检测限。休药后相同时间点鸡肌肉中药物残留量最低,肝中的药物残留量最高;氨苄西林在肾中残留比肌肉、肝消除缓慢且消除时间长。氨苄西林在鸡肌肉、肝和肾中的残留量均与给药剂量呈正相关。根据WT1.4软件按95%置信区间计算所得,建议黄羽肉鸡按体重以120、240mg·(kg·d)-1剂量给药,每天1次,连续7d后,其休药期(WT)分别为4和5d。     

几种药物抗小鼠弓形虫感染的初步效果

为寻找有效的抗弓形虫药物,选择了临床上使用较多的6种药物进行抗小鼠弓形虫感染初步实验。用刚地弓形虫（Toxoplasma gondii）长宁株（CN株）速殖子,按1×104/鼠腹腔接种昆明系雄性小白鼠,接种后4 h用药组通过灌服或饮水用药,每鼠剂量分别为阿奇霉素（Azithromycin）150、120、90 mg/（kg·d）,泰妙菌素（Tiamulin）100 mg/（kg·d）,克拉霉素（Clarithromycin）15 mg/（kg·d）,磺胺氯吡嗪钠（Sulfachloropyrazine sodium）150、120、90 mg/（kg·d）,甲硝唑（Metronidazole）150 mg/（kg·d）,甲氧苄胺嘧啶（Trimethoprim）10 mg/（kg·d）,连续用药5~6 d,接种后10 d结束实验。结果阿奇霉素、磺胺氯吡嗪钠组的平均存活天数明显高于感染不用药组（P〈0.05）,泰妙菌素、克拉霉素、甲硝唑、甲氧苄胺嘧啶组在所用剂量下的存活天数与感染不用药组无明显差异（P〉0.05）;用药后4－7 d,取腹腔液镜检速殖子,与感染不用药组相比,阿奇霉素组减少70%以上,磺胺氯吡嗪钠组减少99%以上。研究结果提示,磺胺氯吡嗪钠具有良好的抗弓形虫效果,其推荐剂量与用药疗程还有待进一步研究。     

复方磺胺氯吡嗪钠溶液对人工诱发鸡球虫病的疗效试验

为评价复方磺胺氯吡嗪钠溶液防治鸡球虫病的疗效,将200只15日龄健康黄羽肉鸡随机分成10组,其中受试药物分别设300mg/L、150mg/L和75mg/L三个剂量组,磺胺氯吡嗪钠可溶性粉为对照药物。受试药和对照药各剂量组均同时设连用3d或5d的给药方案。结果显示,复方磺胺氯吡嗪钠溶液按300mg/L浓度连用3d或5d的抗球虫指数分别达181.3和193.3,按150mg/L浓度连用5d的抗球虫指数为183.1。以上3种给药方案的抗球虫指数均大于180,具有高效抗球虫作用,且均好于磺胺氯吡嗪钠可溶性粉对照药物组(169.6;149.9);按150mg/L浓度连用3d或按75mg/L浓度连用5d的抗球虫指数分别为164.4和175.4,也均好于磺胺氯吡嗪钠可溶性粉,但受试药物按75mg/L的剂量混饮给药连用3d的抗球虫指数仅为135.5,属低效抗球虫药。建议复方磺胺氯吡嗪钠溶液的临床推荐用量为每升水中加本品1.0~2.0mL(相当于150～300mg/L),连续饮用3~5d。