谷氨酰胺的抗疲劳生化机制研究

用两批各 48只小鼠分 4组 (n =12 )每天分别灌喂生理盐水和 3 4mmol·kg-1的谷氨酰胺、谷氨酸和天冬酰胺 ,连续 10d。结果显示 ,三者都可提高小鼠血清、肝和骨骼肌中的肌酸磷酸激酶活性 ,降低乳酸脱氢酶活性 ,并显著增加肝、骨骼肌糖原积累。其中有相同碳架结构的谷氨酰胺、谷氨酸能极显著提高小鼠的游泳耐力 ,但与谷氨酰胺有相等酰胺氮的天冬酰胺作用不强。结果提示 ,谷氨酰胺提高机体抗疲劳作用与其碳架结构有关     

高效液相色谱-串联质谱法检测牛组织和奶中咪多卡残留的研究

建立了一种检测牛组织和牛奶中咪多卡残留检测的高效液相色谱-串联质谱法。牛组织(肌肉、肝脏、肾脏、脂肪)和奶在NaAc缓冲体系中酶解,经HCl溶液提取,WCX固相萃取柱净化,以0.3 %甲酸水溶液(含20mM甲酸铵)和0.3 %甲酸乙腈为流动相进行梯度洗脱,在HILIC色谱柱上分离,在电喷雾正离子(ESI+⁾模式下,用多反应监测(MRM)模式检测,同位素内标法定量。结果表明：咪多卡在2.5～1000 ng/mL的浓度范围内呈现良好线性关系,相关系数(R2⁾大于0.99;咪多卡在牛组织和奶中的检测限均为10 μg/kg,定量限均为20 μg/kg;咪多卡在牛组织和奶中20～4000 μg/kg添加浓度水平上的回收率在70.9～109%范围内;批内RSD在0.55~9.59%之间,批间RSD在2.21~12.1%之间。该方法具有灵敏度高、定量准确,重复性好等特点,可以满足牛组织和奶中咪多卡残留检测的要求。     

四环素类药物多残留酶联免疫检测方法

 【目的】构建一种四环素类药物多残留酶联免疫检测试剂盒。【方法】将四环素类药物与载体蛋白相连作为抗原免疫动物,获得了抗四环素类药物的抗体,建立了动物性食品中四环素类药物残留的ELISA检测方法,并将该试剂盒的检测性能与进口试剂盒比较,对实际样品的测定结果与高效液相-串联质谱法比较。【结果】人工抗原中四环素与蛋白质分子的结合比约为15﹕1,血清效价达到1﹕2 000倍以上,50%抑制浓度(IC50)为3 μg?L-1左右,7种四环素类药物交叉反应率在58%～100%之间,牛奶和鸡肉中四环素类药物的检测限分别为6.6 μg?L-1和6.5 μg?kg-1, 在鸡肉中四环素、土霉素和金霉素的回收率在40%～120%之间。【结论】试剂盒的最低检测限为0.3 μg?L-1,检测范围为0.3～30 μg?L-1,可同时测定兽医常用的四环素、金霉素、土霉素和多西环素4种药物残留。灵敏度、精密度和准确度均能满足兽药残留检测要求。     

链霉素酶联免疫检测试剂盒的稳定性研究

通过对自制链霉素酶联免疫检测试剂盒和关键试剂的加速试验以及2～8℃保存6个月试验，考察试剂盒的稳定性。试验表明，加速试验后，试剂盒的标准曲线图形良好，呈双S曲线；2～8℃保存试验后，0浓度点OD值较高，100μg／L添加牛奶样品回收率在60％以上。结果说明，链霉素酶联免疫检测试剂盒可以保存6个月。     

恩诺沙星注射液在猪体内的残留消除研究

为研究恩诺沙星在猪体内的残留消除规律,验证休药期,以2.5 mg/kg体重肌内注射10%恩诺沙星注射液,每日2次,连续3 d。在最后一次给药后0、3、5、7、10 d时间点,采集肌肉、肝脏、肾脏、脂肪和注射部位肌肉,HPLC法测定组织中的恩诺沙星及其代谢物环丙沙星的残留量,并用WT1.4软件计算休药期。结果显示,恩诺沙星在猪肌肉、肝脏、肾脏、脂肪和注射部位肌肉的休药期分别是5.6、13.4、8.2、3.0、5.5 d。为保证兽药使用安全、消费者健康和食品安全,推荐恩诺沙星注射液在猪的休药期为14 d。     

ELISA法测定牛奶和鸡肌肉中四环素类药物残留

以本实验室研制的四环素类药物多残留检测试剂盒为基础，建立了牛奶和鸡肉中四环素、土霉素、金霉素药和多西环素的ELISA检测方法。该方法对牛奶和鸡肉中四环素的检测限为7μg／L（μg／kg）左右。在牛奶和鸡肉中，4种四环素类药物100μg／L（μg／kg）浓度的添加回收率范围为43．6％～101．4％，批内变异系数小于25％，批间变异系数在30％以内。牛奶的临界值为39．5μg／L，鸡肉的临界值为35.3μg／kg。     

《食品安全国家标准 食品中兽药最大残留限量》 （GB 31650-2019）的解读

本文主要对GB31650-2019《食品安全国家标准 食品中兽药最大残留限量》进行解读,通过与农业部公告第235号的比较,全面介绍新版标准的主要变化,并为正确使用新版标准提出建议。     

牛、羊奶中莫昔克丁残留高效液相色谱荧光检测方法的建立

建立了适用于牛、羊奶样品中莫昔克丁残留的高效液相色谱荧光检测方法。以乙腈为提取液,C18固相萃取柱净化,并用N-甲基咪唑-乙腈(1+1,V/V)和三氟乙酸酐-乙腈(1+2,V/V)进行衍生化。乙腈+水(90+10,V/V)为流动相,荧光法定量。经测定,该方法对牛、羊奶中莫昔克丁的检测限为2 μg/kg,定量限为5 μg/kg。空白牛、羊奶中标准品莫昔克丁添加量分别为5、20、40和80 μg/kg时,牛奶中莫昔克丁平均回收率范围为75.5%～110%,其批内变异系数小于738%,批间变异系数小于7.87%;羊奶中莫昔克丁平均回收率范围为77.5%～95.6%,其批内变异系数小于5.06%,批间变异系数小于5.92%。该方法准确性强、灵敏度高,适用于牛、羊奶中莫昔克丁的快速检测。     

牛奶中头孢噻呋残留消除规律及弃奶期试验

头孢噻呋(Ceftiofur),其分子式为C19H17N5O7S3,化学名为[6R-[6α,7β(z)]]7-[[(α-氨基-4-噻唑基)(甲氧亚氨基)乙酰]氨基]-3-[[(2-呋喃羰基)硫代]甲基]-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4,2,0]辛-2-烯-2-羧酸.该药是由Bernard labeeuw等人于1984年首次合成,其后美国法玛西亚-普强公司(Pharmacia & Upjohn)将其研制成钠盐的冻干粉及盐酸盐的混悬液,用于动物疾病的治疗.     

HPLC法分析动物血浆和组织中的谷氨酰胺

以邻苯二甲醛为衍生剂,柱前衍生,反相C18柱分离;pH6.85磷酸缓冲溶液,甲醇二元梯度洗脱,340 nm紫外检测.结果显示,谷氨酰胺(Gln)在15.7 min出峰,在0.053-1.054 mmol/L范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.984)且P<0.01,血浆、肝、肌肉和肾脏谷氨酰胺回收率在94%～99%之间.方法应用中测定鸡血浆谷氨酰胺浓度是0.63±0.12 mmol/L;谷氨酰胺在羊血浆、肝、肌肉和肾脏中的分别为0.42±0.073 mmol/L、1.80±0.13 μmol/g、1.84±0.11 μmol/g及0.74±0.11 μmol/g(n=3),以肝脏和肌肉组织含量最高.