新流二联灭活疫苗与禽流感抗体不同组合免疫产蛋鸡、肉鸡后的抗体水平监测

为探讨鸡新城疫、禽流感(H9N2 HP株)二联灭活疫苗与禽流感抗体不同组合免疫商品蛋鸡与商品肉鸡后的抗体消长规律,试验选用商品蛋鸡与商品肉鸡各40只,商品蛋鸡随机分为A、B、C、D组,商品肉鸡随机分为E、F、G、H组,每组10只,A、E组鸡于7日龄颈部皮下注射新流二联灭活疫苗0.25 m L/只;B、F组鸡于7日龄颈部皮下注射新流二联灭活疫苗0.25 m L/只,同时肌肉注射0.5 m L/只的禽流感抗体;C、G组鸡于7日龄颈部皮下注射新流二联灭活疫苗0.25 m L/只,于免疫后第7天肌肉注射0.5 m L/只的禽流感抗体;D、H组鸡不免疫,作为阴性对照组。各组鸡均于免疫前及免疫后的第2,6,10,14,21,28,35天采血检测新城疫与禽流感抗体水平。结果表明:商品蛋鸡B、C组在免疫疫苗过程中配合注射禽流感抗体,禽流感的抗体效价呈先上升然后下降再上升的变化趋势,而A组未注射禽流感抗体的鸡,禽流感抗体效价则呈先下降然后上升的变化趋势;商品肉鸡各免疫组禽流感抗体效价均呈先下降然后上升的变化趋势,疫苗免疫后的前期注射禽流感抗体组的禽流感抗体效价相对高些。说明商品蛋鸡免疫新流二联灭活疫苗时配合注射禽流感抗体对机体的禽流感抗体短期提升效果较明显,可提高禽流感疫苗的免疫效果;而在商品肉鸡上配合注射禽流感抗体对机体的禽流感抗体提升效果不明显。     

禽流感疫苗对禽类免疫效果的分析与评估

目的 分析与评估禽流感疫苗对禽类的免疫效果.方法 采用疫苗接种、抗体试验和分组试验法,在非疫区对禽类用H5亚型和H5、H9二价禽流感油乳苗进行免疫接种试验,并对结果分析比较.结果 不同日龄蛋鸡免疫接种20天后HI抗体效价不同、饲养方式不同、家禽种类不同疫苗效果不同.85日龄蛋鸡产生的HI抗体效价达到7log2,鸡、鸭、鹅混养HI抗体效价低于平养和笼养,H5亚型禽流感疫苗免疫鸡和鸽其HI抗体效价达到了5log2以上,而对鹌鹑和鸭为1log2和3.2log2.结论 单价禽流感疫苗和二价疫苗对鸡群免疫的效果不同,2价疫苗的免疫效果较单价疫苗差.     

禽流感疫苗对禽类免疫效果的检测与分析

禽流感大流行时，在非疫区对禽类用H5亚型和H5、H9二价禽流感油乳苗进行免疫接种试验，并对其结果进行比较和分析。得出不同日龄的蛋鸡免疫接种20d后其HI抗体效价不同，不同的饲养方式、不同种类的家禽及不同种类疫苗的免疫效果均不同。85日龄蛋鸡产生的HI抗体效价达到7log2，鸡、鸭、鹅混养HI抗体效价低于平养和笼养，H5亚型禽流感疫苗免疫鸡和鸽其HI抗体效价达到了5log2以上，而对鹌鹑和鸭为1log2和3．2log2；单价禽流感疫苗和二价苗对鸡群免疫的效果不同，二价苗的免疫效果不如单价苗。     

瘟疫消散对禽流感H5N1亚型灭活苗免疫后抗体产生的影响

试验通过给21日龄不免疫鸡注射H5N1亚型禽流感灭活苗0.35 mL,同时每只鸡每天口服瘟疫消散0.5 g,分别于接种疫苗1,3,5,7,14,21天采血测抗体效价,与只用疫苗组相比较,现将结果报道如下。1材料及方法1.1试验动物21日龄不免疫鸡60只,由哈药集团黑龙江省生物制品一厂提供。1.2疫苗H5N1亚型禽流感灭活苗,哈尔滨兽医研究所生产,批号20050104。1.3试剂血凝抑制试验用H5N1亚型血清和血凝素,哈尔滨兽医研究所生产。1.4分组将60只鸡随机分成3组,每组20只。1.5疫苗接种Ⅰ组每只鸡颈部皮下注射H5N1亚型禽流感灭活苗0.35 mL,同时口服瘟疫消散颗粒;Ⅱ组…     

H9亚型禽流感病毒HF株灭活疫苗对流行毒株的免疫保护研究

为评价H9N2亚型禽流感病毒HF株灭活疫苗对流行毒株的免疫保护效果,将禽流感病毒HF株灭活疫苗和商品化鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗分别以0.3 mL/只接种21日龄SPF鸡,3周后采血测定HI抗体效价,并用2018年-2019年分离的4株H9亚型禽流感病毒分别进行攻毒。结果显示,免疫后21 d, HF株灭活疫苗免疫组HI抗体效价达到9.1 log2以上,商品化疫苗HI抗体效价几何平均值则为6.3 log2以内。4株H9亚型禽流感病毒流行毒株以10~(7.0)EID_(50)的剂量静脉攻毒后,HF株灭活疫苗免疫组可抵抗流行毒株的攻击,保护率为100%;而商品化疫苗对流行毒株的攻毒保护率仅为40%～60%。说明H9N2亚型禽流感病毒HF株灭活疫苗具有较强的免疫原性,能使免疫鸡抵抗流行毒株的攻击。     

免疫不同剂量禽流感疫苗对蛋鸡抗体效价的影响

禽流感作为家禽养殖业的最大威胁,通过科学使用禽流感疫苗进行免疫能够有效预防暴发禽流感疫情。本试验对蛋鸡在相同条件下注射不同剂量的禽流感疫苗,间隔相同时间后采样测定抗体的效价,结果表明:首次免疫的剂量0.3 m L/羽、0.4m L/羽、0.5 mL/羽,一个月后测定的(H5+H7)抗体滴度平均值随着免疫剂量的增加而提高,60日龄加强免疫剂量为0.5 mL/羽、0.7 mL/羽、0.9 mL/羽,一个月及两个月后测定的(H5+H7)抗体滴度平均值均保持在最高水平10。试验表明:首次免疫禽流感疫苗剂量为0.5 m L/羽的抗体效价水平最高,加强免疫的不同剂量均能使抗体效价在较长一段时期保持最高水平。     

重组禽流感灭活疫苗抗体消长规律分析

重组禽流感灭活疫苗(H5N1,Re-1株)3批,按重组禽流感灭活疫苗(H5N1,Re-1株)规程规定的检验方法免疫28日龄SPF鸡,免疫后定期采集血样,测定血清HI抗体效价,绘制各批疫苗免疫鸡HI效价消长曲线,结果表明,重组禽流感灭活疫苗(H5N1亚型,Re-1株)能诱导SPF鸡产生高的抗体而且维持时间长 .     

重组禽流感病毒H5+H7亚型三价灭活疫苗(H5N1 Re-11株、Re-12株+H7N9 Re-2株)对白羽肉鸡免疫抗体监测试验

为了评估重组禽流感病毒H5+H7亚型三价灭活疫苗(H5N1 Re-11株、Re-12株+H7N9 Re-2株)对白羽肉鸡免疫效果以及对白羽肉鸡最佳免疫时间,试验选取3个厂家(a、b、c厂)重组禽流感病毒H5+H7亚型三价灭活疫苗(H5N1 Re-11株、Re-12株+H7N9 Re-2株)分别在1日龄和7日龄进行接种,于接种前(1,7日龄)、14,21,28,35,42日龄采血进行抗体检测,以了解不同厂家高致病禽流感疫苗对白羽肉鸡免疫效果以及最佳免疫时间。结果表明:3个厂家高致病性禽流感疫苗对白羽肉鸡免疫效果没有明显差异,在21日龄后H5N1 Re-11、H5N1 Re-12、H7N9 Re-2抗体效价均在4 lb以上,各毒株抗体效价在28,35,42日龄时,1日龄抗体效价要高于7日龄,且a厂家疫苗产生的抗体效价要略高于b、c厂。说明1日龄免疫效果要好于7日龄,最佳免疫时间为1日龄。     

家禽H5亚型禽流感(Re-6株)疫苗免疫抗体消长规律研究

为了解H5亚型重组禽流感Re-6株灭活疫苗在鸡、鸭免疫后的抗体消长规律,本实验分别选择一个鸡场和鸭场开展了临床免疫实验。实验鸡群于14日龄首免单价疫苗(Re-6株)和H5亚型二价疫苗(Re-6株+Re-4株)后,在30日龄~200日龄不同时间点采血检测Re-6抗体,结果表明,二价疫苗比单价疫苗免疫后的Re-6免疫抗体产生早、效价高、抗体整齐度好;40日龄二免后20 d,二价疫苗和单价疫苗的Re-6免疫抗体消长规律趋于一致。实验鸭群于17日龄分别采用禽流感(H5+H9)双价灭活疫苗和单价灭活疫苗(H5N1亚型,Re-6株)进行免疫,免后45日龄~205日龄不同时间点检测Re-6抗体,结果表明,双价疫苗与单价疫苗均可以诱导免疫鸭产生高水平抗体,而且两种疫苗的消长规律相似。此外,45日龄二免Re-6株疫苗的免疫程序要优于70日龄二免的免疫程序。本研究评估Re-6疫苗的防控效果,为家禽H5亚型禽流感免疫防制提供了实验依据。     

悬浮MDCK细胞源与鸡胚源H9亚型禽流感疫苗免疫效力比较研究

为探讨MDCK纯悬浮细胞制备的H9亚型禽流感灭活疫苗的免疫效果,使用10日龄SPF鸡胚和MDCK纯悬浮细胞分别接种H9亚型禽流感 BX13株病毒,收获抗原液,制备2种单价油佐剂灭活疫苗,按照不同免疫剂量对21日龄SPF鸡进行免疫接种,测定免疫后不同时间的血清HI抗体,免疫后21 d翅静脉攻毒,测定疫苗的保护率。结果表明：2种疫苗分别以0.3、0.2、0.1、0.02 mL/只的剂量接种21日龄SPF鸡后,7 d HI抗体均为0log2,免后14 d、21 d时2种疫苗相同免疫剂量组间HI抗体无明显规律性差异。免疫后21 d,2种疫苗0.1mL/只～0.3mL/只的免疫剂量,各组间HI抗体水平无明显差异,可以达到1∶128以上。攻毒试验表明,鸡胚源疫苗0.1 mL/只、MDCK细胞源疫苗0.2mL/只的免疫剂量可以达到10/10保护。本研究为使用MDCK纯悬浮细胞制备的H9亚型禽流感疫苗的深化研究和应用奠定了基础。     

樱桃谷肉鸭H5N1亚型禽流感灭活疫苗(Re-6+Re-8)免疫程序研究

选取1日龄健康无免疫的樱桃谷肉鸭600只,随机分成A、B、C、D 4组,每组150只。B、C和D组在7日龄分别免疫H5N1亚型禽流感灭活疫苗(Re-6+Re-8)0.5、0.6和0.8 m L/只。A组为非免疫对照组。采用HI方法检测其母源抗体和免疫抗体水平,根据母源抗体和免疫抗体消长规律探讨樱桃谷鸭H5NI亚型禽流感灭活疫苗(Re-6+Re-8)的合理免疫程序。结果表明:樱桃谷鸭Re-6与Re-8母源抗体效价和抗体合格率在1日龄最高,分别为7.8log2和100%、7.6log2和100%,14日龄下降至3.93 log2和53.3%、3.78 log2和50.0%,21日龄之后几乎没有保护力;3个剂量试验组免疫抗体水平和抗体合格率在统计学上差异不显著(P0.05)。建议樱桃谷肉鸭在7日龄免疫,剂量为0.5m L/只。     

北疆地区4个规模化白羽肉鸡养殖场H9亚型禽流感抗体监测

试验通过对北疆地区4个规模化商品代白羽肉鸡饲养场的H9亚型禽流感抗体进行监测,以期为制定科学的免疫程序提供试验依据。随机收集4个规模化白羽肉鸡养殖场7、14、21、28及42日龄的鸡群血样,每个养殖场每个日龄鸡群采样30份,共600份血样,共分离获得453份血清,采用血凝抑制试验对其H9亚型禽流感抗体进行检测。结果发现：H9亚型禽流感抗体效价在白羽肉鸡7日龄时离散度较低、趋于集中;11日龄免疫H9亚型禽流感疫苗后,14日龄时H9亚型禽流感抗体效价低且离散度较高,21日龄时抗体效价更低且离散度更高,但28日龄时抗体效价较高,42日龄时抗体水平很高且离散度很低。表明现有的免疫程序完全可以保护鸡群免受H9亚型禽流感侵袭。     

清远麻鸡重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活疫苗免疫程序的优化

为了优化重组禽流感病毒(H5+H7)二联三价灭活疫苗在黄羽肉种鸡的免疫程序,本研究对广西玉林一大型养鸡场的清远麻鸡群进行两种免疫程序的比较试验。首先将鸡群分为A、B两组,A鸡群在11日龄进行首免,肌肉注射重组禽流感病毒(H5+H7)二联三价灭活疫苗,0.3mL/只,然后在33日龄进行第二次免疫,0.5mL/只;B鸡群使用同种疫苗相同剂量分别进行免疫,首免在14日龄,二免在28日龄。鸡群免疫当天和免疫后不同时间分别采血,并用血凝抑制试验(HI)检验血清中相应H5和H7亚型的抗体效价。结果表明,B鸡群在14日龄进行首免,28日龄进行二免时,抗体平均效价上升较快,两个亚型在56日龄的抗体合格率均达到100.0%,而A鸡群要达到同样合格率则需要到61日龄。本试验研究证明,采用B鸡的免疫程序效果更佳。     

重组鸡白细胞介素2对H9亚型禽流感灭活疫苗的免疫增效作用研究

为研究重组鸡白细胞介素2对体液免疫的影响,将600只7日龄海兰褐蛋鸡随机分为2组,试验组在H9亚型禽流感灭活疫苗免疫同时使用重组鸡白细胞介素2注射液,对照组只进行H9亚型禽流感灭活疫苗的免疫。试验组与对照组鸡群分别于免疫后0、7、14、21、28、35 d进行鸡H9亚型禽流感病毒HI抗体的检测,并统计分析各组抗体效价的差异性。结果表明:试验组HI抗体效价均高于对照组,且在免疫后7 d试验组与对照组HI抗体效价差异极显著(P0.01),免疫后14 d、21 d试验组与对照组HI抗体效价差异显著(P0.05),试验组保护性抗体提前一周产生且抗体高峰提前一周到达。     

H7亚型禽流感病毒灭活疫苗的研制及其免疫效果研究

以H7N3亚型禽流感病毒接种鸡胚,收取鸡胚液为抗原研制禽流感病毒灭活疫苗,并对制苗抗原以及疫苗的物理性状、安全性、免疫效力、免疫剂量和保护期等进行了试验,结果表明,该灭活疫苗安全性好,对28日龄鸡的最佳免疫剂量为0.5 mL/只,抗体临界保护值为5log2,免疫后6周HI效价达到高峰值9.4log2,以后逐渐下降,第20周抗体仍能维持较高水平。此外,交叉免疫保护试验表明,同一亚型之间具有良好的免疫保护作用,而亚型间缺乏坚强的交叉保护作用。     

柔嫩艾美耳球虫对禽流感疫苗的免疫增强作用研究

为了研究柔嫩艾美耳球虫对雏鸡免疫禽流感疫苗的免疫增强作用,试验将7日龄AA肉鸡随机分为4组,每组20只,1组试验鸡皮下注射柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊,同时免疫禽流感H5亚型灭活疫苗;2组试验鸡皮下注射柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊,同时免疫磷酸盐缓冲液;3组试验鸡皮下注射磷酸盐缓冲液,同时免疫禽流感H5亚型灭活疫苗;4组试验鸡皮下注射磷酸盐缓冲液,同时免疫磷酸盐缓冲液。在免疫后第7,14,21,28天,各组随机取5只鸡采血、称重,采集胸腺、脾脏、法氏囊,计算免疫器官指数,采用血凝抑制试验检测血清中禽流感抗体效价。结果表明:各组试验鸡的平均体重差异不明显,柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊与禽流感灭活疫苗共免疫不会影响试验鸡的日增重;柔嫩艾美耳球虫与禽流感疫苗联合免疫可以促进雏鸡免疫器官的生长发育,提高雏鸡免疫器官指数和禽流感抗体效价。说明柔嫩艾美耳球虫可以调节机体对疫苗的免疫反应,促进雏鸡的体液免疫应答。     

禽流感灭活疫苗（H5N2亚型，D7株）与同类产品对鸭和鸡免疫后血清学比较试验

为评价禽流感灭活疫苗（H5N2亚型,D7株）与同类产品对不同日龄鸭及SPF鸡的免疫效果,将该疫苗与国内两家禽流感生产企业的2批重组禽流感灭活疫苗（H5N1亚型,Re-5株）分别免疫鸭和SPF鸡,免疫后14、21、28、42 d采血测定各免疫组的HI抗体效价。禽流感灭活疫苗（D7株）以0.25 mL剂量免疫鸭后14 d,所有免疫组鸭的HI抗体几何平均滴度（GMT）即能达到6㏒2以上,28 d HI抗体GMT达到峰值9.1㏒2,而两批重组禽流感灭活疫苗以0.5 mL剂量免疫鸭21 d后HI抗体GMT均没有达到6㏒2;两种疫苗分别免疫21日龄SPF鸡21 d后各免疫组的HI抗体GMT基本相似。试验结果表明,禽流感灭活疫苗（D7株）对鸭的免疫效果要明显优于重组禽流感灭活疫苗(Re-5株),而对鸡的免疫效果相似。     

免疫禽流感疫苗HI抗体的试验研究

对30日龄雏鸡肌注郑州中牧股份生产的禽流感疫苗每只0.5ml,分别于免疫后第3、6、9、12周进行血清学HI检测,3周后H5亚型HI、H9亚型HI抗体均达到6Log2以上,其效价12周时已处于免疫保护临界值状态,60日龄雏鸡免疫疫苗后,其H5、H9HI抗体效价较30日龄雏鸡上升幅度快;对另一批雏鸡分别于30、120日龄免疫两次后第1、2、3、4、5月进行HI检测,抗体较首免产生水平高,1月后抗体可达到8Log2以上,5个月后抗体还达5Log2以上。     

新城疫-H9N2亚型禽流感嵌合型病毒样颗粒免疫效果分析

为了测定新城疫-H9N2亚型禽流感嵌合型病毒样颗粒(ND-H9N2 VLPs)作为疫苗候选株的免疫效果,试验将ND-H9N2 VLPs联合铝佐剂制成ND-H9N2 VLPs疫苗,测定ND-H9N2 VLPs疫苗的最小免疫剂量及一次超剂量接种的安全性。选取7日龄非免疫雏鸡30只,随机分为3组,每组10只。第1组为ND-H9N2 VLPs联合佐剂免疫组,以350μL/只的剂量进行皮下注射免疫;第2组为商品疫苗组[鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗(La Sota株+F株)]依照商品说明书进行免疫;第3组为阴性对照组,以相同方式注射同等剂量的生理盐水;初免两周后,以同等剂量和免疫方式进行加强免疫,加强免疫3周后,所有鸡用新城疫强毒TY-1株和H9N2亚型禽流感病毒SX-1株进行滴鼻、点眼攻毒,每周定时进行鸡翅下静脉采血,分离血清,用血凝抑制试验测定每只鸡的抗体效价,攻毒后连续14 d每天定时观察各组鸡群的临床症状,统计死亡数,计算免疫保护率。结果表明:ND-H9N2 VLPs疫苗的最小免疫剂量为30μg蛋白/只,用此疫苗以5倍剂量进行免疫,免疫鸡未出现新城疫、禽流感临床症状,表明此疫苗安全性良好。ND-H9N2 VLPs联合铝佐剂免疫组与商品疫苗组比,两组鸡在临床症状和存活率上表现一致,在抵抗当前流行毒株的感染时,都能够提供100%保护作用;两组鸡免疫后新城疫和H9亚型禽流感抗体效价都是在第5周达到峰值,之后缓慢下降,但是ND-H9N2 VLPs联合铝佐剂疫苗免疫组鸡的血清抗体效价与商品疫苗比要相对高些。说明本试验研制的ND-H9N2 VLPs作为疫苗候选株具有很大的防控优势。     

鸡禽流感H5N1和新城疫疫苗混合后接种对抗体水平的影响

为了探索高致病禽流感H5N1亚型和鸡新城疫疫苗混合免疫对其产生抗体水平的影响,将4 000只10日龄同品种雏鸡随机分为试验组和对照组,试验组雏鸡用禽流感H5N1亚型疫苗和新城疫疫苗混合注射免疫,对照组雏鸡用禽流感H5N1亚型和新城疫疫苗同时分别注射免疫,35日龄时按相同的方法加强免疫1次,分别于免疫前及首次免疫后第7,14,21,28,35,50,66天随机采集血液样品不少于30份,进行H5N1 Re-6株、Re-7株、Re-8株和新城疫抗体检测。结果表明:鸡禽流感和新城疫疫苗混合后注射和同时分别注射的免疫效果一致,对禽流感、新城疫疫苗的免疫效果影响不大;但降低了劳动强度、减少了物力成本、降低了免疫应激次数。说明可以将禽流感H5N1亚型疫苗和新城疫疫苗混合注射免疫。