高效液相法测定陕西产延胡索中延胡索乙素、原阿片碱的含量

[目的]测定陕西产延胡索中延胡索乙素、原阿片碱的含量。[方法]采用HPLC法,色谱柱为Agilent ODSC18色谱柱（150mm×4．6mm,5μm）,流动相为0．1％磷酸缓冲液-甲醇（65：35,三乙胺调pH值至6．0）,检测波长为280mm,流速为1．0ml／min,柱温为25℃,进样量10μl。[结果]陕西产延胡索中延胡索乙素、原阿片碱的平均含量分别为0．977和0．651mg／g,2种成分平均加样回收率分别为98．02％（RSD=1．87％）和98．63％（RSD=1．43％）。[结论]陕西产延胡索中延胡索乙素、原阿片碱含量与其他文献资料相比较高,符合2005版药典含量要求。     

反相高效液相色谱法同时测定田七痛经胶囊中延胡索乙素和阿魏酸

建立了快速灵敏的高效液相色谱法测定田七痛经胶囊中延胡索乙素和阿魏酸的含量. 采用色谱柱为Hypersil C18柱, 流动相为V(甲醇)∶V(0.002 mol/L KH2PO4溶液, pH=4.5)=40∶60溶液, 柱温为室温时于288 nm波长处以外标法测定. 延胡索乙素和阿魏酸在0.13～1.29 μg和0.08～0.80 μg时线性良好, 平均回收率分别为97.96%和98.47%, 相对标准偏差分别为1.3%和1.1%(n=5).     

RP-HPLO法测定秦艽和元胡中龙胆苦苷和延胡索乙素的研究

建立同时测定秦艽和元胡中的龙胆苦苷和延胡索乙素含量的RP—HPLC分析方法。以RP-C18色谱柱为固定相，流动相为甲醇＋冰醋酸缓冲液（30＋70），等度10min，3min梯度变成68＋32，冰醋酸缓冲液的pH值为5．11，流速为1．0mL／min；紫外检测波长为230nm、270nm。龙胆苦苷和延胡索乙素的标准曲线范围分别是4．495～449．5μg／L、4．935～493．5μg／L（r=0．9998，0．9998，n=7）；检测限分别是0．2245μg／L、0．0987μg／L；加样回收率分别为98．92％～105．92％、97．09％～103．66％，RSD〈3.1％。该方法测定龙胆苦苷和延胡索乙素的含量稳定可靠、重现性好。     

不同产地初加工方法对延胡索5种生物碱含量的影响刘珍珍,白桥,徐皓

以延胡索药材中五种生物碱的含量作为评价指标分析水煮、水蒸、醋煮和盐煮四种初加工方法的效果。采用甲醇加热回流法提取,高效液相色谱法检测含量。以乙腈-0.01%磷酸水溶液为流动相,按22:78的比例进行等度洗脱,流速1.0mL/min;色谱柱(Inertsil ODS-3)温度：30℃;检测波长为283nm。结果显示,原阿片碱、延胡索乙素、掌叶防己碱、小檗碱、脱氢紫堇碱5种生物碱线性范围分别为1.568～78.4、3.444～172.2、0.72～36.0、0.78～39.0、2.632～131.6 μg/mL(r≥0.9993);平均回收率(n=6)为99.26%、98.85%、102.39%、98.06%、100.23%,RSD≤2.10%;四种延胡索加工方法中有效成分含量由高到低依次为水蒸＞水煮＞醋煮＞盐煮,其中以蒸制5min最佳。该方法简单、准确性高,可为延胡索产地初加工提供科学依据与技术支持。     

不同初加工方法对延胡索5种生物碱含量的影响

以延胡索药材中5种生物碱的含量作为评价指标分析水煮、水蒸、醋煮和盐煮4种初加工方法的效果。采用甲醇加热回流法提取,采用高效液相色谱法检测含量。以乙腈-0.01%磷酸水溶液为流动相,按22∶78的比例进行等度洗脱,流速1.0 mL/min,色谱柱(Inertsil ODS-3)温度30℃,检测波长为283 nm。结果表明,原阿片碱、延胡索乙素、掌叶防己碱、小檗碱、脱氢紫堇碱5种生物碱线性范围分别为1.568～78.400、3.444～172.200、0.720～36.000、0.780～39.000、2.632～131.600μg/mL(r≥0.999 3);平均回收率(n=6)为94.89%、97.13%、102.39%、98.06%、100.23%,相对标准偏差≤2.10%;4种延胡索加工方法中有效成分含量由高到低依次为水蒸>水煮>醋煮>盐煮,其中以蒸制5 min最佳。该方法简单、准确性高,可为延胡索产地初加工提供科学依据与技术支持。     

泡吴茱萸中吴茱萸碱·吴茱萸次碱和柠檬苦素含量测定方法研究

[目的]建立HPLC法同时测定泡吴茱萸中吴茱萸碱、吴茱萸次碱和柠檬苦素含量的方法。[方法]采用Agilent 5 TC-C_(18)(2)(250 nm×4.6 nm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水溶液(53∶47,V/V),等度洗脱,检测波长为215 nm,流动相的流速为1mL/min,色谱柱的柱温为25℃。[结果]在该检测方法下吴茱萸碱、吴茱萸次碱和柠檬苦素分离度良好,3种成分在对应范围内有良好的线性关系;吴茱萸碱、吴茱萸次碱、柠檬苦素的平均回收率分别为98.0%、97.8%、97.3%(n=6)。[结论]该方法简便、准确、分离度高、重复性良好,适用于泡吴茱萸的质量控制。     

HPLC法测定钩藤提取物中钩藤碱的含量

[目的]测定钩藤提取物中有效成分钩藤碱的含量。[方法]采用HPLC法测定钩藤提取物中钩藤碱的含量,色谱柱为DiamonsilC18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为无水甲醇-水(60∶40,V/V)并含10 mmol/L三乙胺,冰醋酸调pH 7.5;柱温为30℃;流速为1.0ml/min;紫外检测波长为254 nm。[结果]钩藤碱浓度在11.0～110.0μg/ml范围内与峰面积的线性关系良好(R=0.999 6),平均回收率为96.84%,RSD为1.46%。[结论]该方法简单、快速、准确,可用于钩藤提取物中钩藤碱的含量测定。     

HPLC法测定薏苡非种仁部位薏苡素的含量

[目的]建立薏苡非种仁部位中薏苡素的HPLC测定方法。[方法]采用高效液相色谱法。色谱柱为AgilentHC-C18色谱柱（4.6mm×250mm,5μm）;流动相为乙腈-0.1%磷酸水（V∶V=25∶75）;流速为1.0ml/min;柱温为25℃;检测波长为232nm。[结果]薏苡非种仁部位中薏苡素的含量：根〉皮〉茎。[结论]该方法准确、专属性强,可为薏苡非种仁部位的综合开发利用提供参考。     

不同微生物菌肥处理对延胡索产量和品质的影响

[目的]明确不同微生物菌肥对延胡索(Corydalis yanhusuo W.T.Wang)生长发育、产量和品质的影响,为微生物肥料在延胡索及其他中药材种植上的推广应用提供理论依据.[方法]采用盆栽试验,以不施微生物菌肥为对照(CK),设6个不同组分的微生物菌肥处理[复合微生物菌肥(S1)、NEB-26(S2)、拜沃(S3)、生物功能菌(S4)、激抗菌968(S5)、三炬灌金液(S6)],对比不同处理对延胡索光合色素含量、抗氧化酶活性、单株产量及有效药用生物碱含量等的影响.[结果]与CK相比,S3、S5和S6处理能显著提升延胡索叶片的叶绿素a、叶绿素b及叶绿素总量(P<0.05,下同),提升效果表现为S3>S6>S5.S1、S2和S6处理的叶片可溶性糖含量分别较CK显著增加113.28%、87.53%和104.33%;S3、S5和S6处理的可溶性蛋白含量有所提高,但仅S3处理与CK的差异达显著水平.除S6处理外,其余微生物菌肥处理的过氧化氢酶(CAT)活性均高于CK,以S3处理的提升效果最佳,其次为S2、S4和S5处理;S3处理的超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化物酶(POD)活性也较CK显著增加22.25%和12.19%.施用微生物菌肥后延胡索的产量及生物碱含量均有所变化,其单株鲜重排序为S5>S2>S4>S6>S1>S3>CK,S5处理的单株鲜重和单株干重分别较CK显著提升392.86%和341.71%.延胡索乙素是对微生物菌肥处理响应最显著的生物碱,含量均高于CK,但只有S1、S3和S5处理的含量高于现行国家标准(>0.050%),其中延胡索乙素百分含量和单株总产量分别在S3和S5处理中达最大值,S3处理的胡索乙素百分含量(0.0890%)为CK的9.89倍,S5处理的单株延胡索乙素产量(9.4562 mg)是CK的31.90倍.[结论]综合分析有效生物碱含量及产量等指标,含细黄链霉菌的激抗菌968能较好地适应延胡索根际土壤微生态环境,其提升延胡索单株产量和单株有效药用生物碱延胡索乙素含量的效果最佳,在延胡索种植中具有良好的应用潜力和推广价值.     

高效液相色谱法测定动物血制品中三聚氰胺的含量

[目的]研究高效液相色谱法（HPLC）测定动物血制品中三聚氰胺的最佳条件。[方法]用1%三氯乙酸溶液、乙腈超声提取样品;经SPE柱净化后,进行高效液相色谱分析。[结果]最佳色谱条件为色谱柱Zorbax SB-C8;流动相为离子对缓冲液/乙腈=95/5（V/V）;流速1.0 ml/min;柱温25℃;紫外检测器检测波长235 nm。三聚氰胺浓度为1.0～50.0 mg/L,线性相关系数为0.999 4,最低检出浓度为0.1 mg/kg,平均回收率为97.60%～100.65%,相对标准偏差为1.23%～3.04%。[结论]该方法快速简便,结果准确,重现性好。     

GA对元胡萌发的影响及NO对元胡不定根的作用

[目的]考察GA对元胡块茎萌发的影响,以及在不定根发生过程中NO的作用。[方法]以元胡块茎为材料,在不同温度下用不同浓度的GA处理元胡,考察其对元胡萌发的影响;利用NADPH-黄递酶作为NOS的标志酶,研究NO在不定根发生中的作用。[结果]室外低温（4℃）和室内温度（16℃）下,不同浓度的GA对元胡的萌发均有一定的促进作用,但恒温（22℃）不适宜元胡萌发。各温度下,0.6 mg/LGA处理下元胡萌发率较高。元胡不定根发生区域存在有类似动物NOS的酶,且阳性反应集中在根的分生组织中,尤其是在根原基先端的分生组织,遍及整个胞质。[结论]GA对元胡萌发具有促进作用,NO在元胡不定根的发生过程具有重要作用。     

硫酸锌胁迫对药用植物黄独带芽茎段生长发育的影响

【目的】研究硫酸锌（ZnSO4）胁迫对黄独带芽茎段生长发育的影响,为黄独的大田生产提供理论依据。【方法】以MS+KT 2 mg/L+NAA 0.1 mg/L为液体培养基,ZnSO4设0.0、0.1、0.5、1.0和2.0 mg/L 5个浓度,然后切取黄独带芽茎段进行接种并放入培养室进行培养。每7 d观察一次黄独带芽茎段的生长发育情况,分别记录芽数、芽长、根数、根长、叶数等5个指标。【结果】随着ZnSO4浓度的增加,黄独带芽茎段的芽数、芽长、根数、根长、叶数均减少;当ZnSO4浓度达1.0~2.0 mg/L时,黄独带芽茎段的生长发育完全被抑制,芽数、芽长、根数、根长、叶数均为0。【结论】在ZnSO4胁迫下,黄独的生长发育受到抑制,但是在黄独幼苗培养前期,在培养液中适当加入锌元素可促进生根,而在后期则应降低锌浓度。     

6-BA和2，4-D对黄独带芽茎段生长发育的影响

【目的】探讨6-BA和2,4-D对黄独带芽茎段生长发育的影响,为黄独的产业化生产提供理论依据。【方法】采用植物组织培养的方法,将黄独带芽茎段（0.5~1.5 cm）接种至液体培养基进行单因子试验。【结果】黄独带芽茎段芽增殖的最佳培养基为MS;黄独带芽茎段芽增长的最佳培养基为MS+6-BA 1 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L;黄独带芽茎段芽增粗的最佳培养基为MS+6-BA 2 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L;黄独带芽茎段生根的最佳培养基为MS;黄独带芽茎段茎长增加的最佳培养基为MS+6-BA 2 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L;黄独带芽茎段茎粗增加的最佳培养基为MS。【结论】黄独带芽茎段的芽增殖和生根最好不要使用6-BA与2,4-D组合,但黄独带芽茎段如在其他培养基诱导出新芽后,则可利用6-BA与2,4-D组合来促进芽的增长、增粗以及茎长的增加。     

2种叶型元胡叶片的显微特征及主成分分析

[目的]比较2种叶型的元胡（Corydalis yanhusuo W.T.W ang）（大叶元胡与小叶元胡）叶片在显微结构上的区别,为元胡的分类提供相关依据。[方法]采用石蜡切片法和临时装片法分别制作元胡的叶片横切片和表皮细胞临时装片,利用光学显微镜进行观察,并对其显微特征参数进行主成分分析。[结果]大叶元胡的叶片和叶肉组织厚度显著高于小叶元胡;其维管组织在数量上和大小上均优于小叶元胡;大叶元胡叶下表皮细胞垂周壁为深波状,气孔器呈椭圆形,小叶元胡下表皮细胞垂周壁为平直状,气孔器呈近圆形;大叶元胡的主成分值显著高于小叶元胡。[结论]大、小叶元胡叶片的显微结构存在显著差异。     

延胡索块茎干物质及两种生物碱积累动态研究

[目的]分析陕西汉中地区延胡索生长期块茎中的干物质含量变化及生物碱的积累动态。[方法]用称重法测定延胡索块茎的干物质含量,高效液相色谱法测定块茎的延胡索乙素和原阿片碱含量,进而研究干物质和生物碱在延胡索块茎中的积累动态。[结果]延胡索块茎的干物质积累呈“S”型变化,3月21日到4月30日,干物质积累量增加最快,含量从21．95％增加到了37．65％。3月1日至4月10日块茎的延胡索乙素含量缓慢增加。4月15日到4月30日块茎的延胡索乙素含量快速增加,由0．074％增加到了0．142％,5月7日后块茎的延胡索乙素含量出现下降趋势。原阿片碱的快速积累期略晚于延胡索乙素,但其在块茎中的含量明显高于延胡索乙素。[结论]生育后期延胡索的干物质和次生代谢产物含量显著增加。     

民族药草龙药材的质量控制研究

[目的]建立草龙药材的质量控制方法。[方法]采用薄层色谱法对草龙进行定性鉴别,并采用HPLC法测定草龙药材中有效成分没食子酸的含量。色谱柱为HypersilC18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-浓度0.05%磷酸(5∶95,V/V),流速为1.0ml/min,检测波长为270 nm。[结果]草龙药材中没食子酸的薄层色谱鉴别特征明显,专属性强;在0.40～2.40μg/ml范围内,没食子酸浓度与峰面积呈良好的线性关系(R=0.999 9),平均回收率为98.36%,RSD为2.28%(n=6)。[结论]建立的草龙药材定性定量测定方法简单准确,可为草龙药材的质量控制提供科学依据。     

壳聚糖胁迫对黄独带芽茎段生长发育的影响

[目的]研究壳聚糖胁迫对黄独带芽茎段生长发育的影响,以期为黄独的大田生产提供理论依据.[方法]将黄独带芽茎段(带1个腋芽)接种至MS+KT 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L的液体培养基中进行单因素4水平分组试验,壳聚糖浓度设0(CK)、0.5、1.0和2.0 g/L 4水平,定期进行观察并统计黄独试管苗的各种形态指标.[结果]低浓度的壳聚糖对黄独带芽茎段根长和芽长有一定的促进作用,浓度为0.5 g/L时促进作用最明显;高浓度的壳聚糖抑制黄独带芽茎段根和芽的生长,浓度为1.0和2.0 g/L时抑制作用最明显.壳聚糖也抑制黄独带芽茎段叶片的生长,且浓度为1.0g/L时的抑制作用最明显.[结论]壳聚糖胁迫对黄独带芽茎段生长发育的影响从总体上来说表现为低浓度促进高浓度抑制的特点.     

露水草加工粒径和其β-蜕皮激素释放的关系

[目的]比较不同粒径露水草（Cyanotis arachnoidea C.B.Clarke）对所含β-蜕皮激素释放的影响。[方法]采用GRACE ODS C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相甲醇∶水=40∶60（V/V,%）洗脱。柱温26℃,流速1.0 ml/min,检测波长248 nm。[结果]相同来源的露水草粉体（粒径10、30和50μm）β-蜕皮激素含量检测值和普通细粉（粒径180μm）相比,粉体中蜕皮激素激素的检测值平均高1倍多。[结论]露水草粉体中的蜕皮激素更容易溶于甲醇,其提取率明显高于普通细粉。表明露水草经过超微粉碎后,细胞破壁率到得明显提高,更有利于有效成分的溶出。     

露水草加工粒径和其β-蜕皮激素释放的关系

[目的]比较不同粒径露水草（Cyanotis arachnoidea C.B.Clarke）对所含β-蜕皮激素释放的影响。[方法]采用GRACEODSC18色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）,流动相甲醇：水=40：60（V/V,%）洗脱。柱温26℃,流速1.0ml/min,检测波长248nm。[结果]相同来源的露水草粉体（粒径10、30、50μm）β-蜕皮激素含量检测值和普通细粉（粒径180μm）相比,粉体中蜕皮激素激素的检测值平均高1倍多。[结论]露水草粉体中的蜕皮激素更容易溶于甲醇,其提取率明显高于普通细粉。表明露水草经过超微粉碎后,细胞破壁率到得明显提高,更有利于有效成分的溶出。