吖啶橙简易免疫荧光术用于快速检出鸡白痢和禽伤寒沙门氏菌的方法研究

本文提出一种快速检出S.p.和S.g.的简易方法——吖啶橙免疫荧光菌团培养浓集法(AOIFBC法)。此法将吖啶橙高倍稀释后与少量沙门氏菌0:9单因子血清混合,配制成吖啶橙荧光抗体(AOFA),然后取少量加入经4小时增菌的液体标本中,再孵育1—4小时,可使与抗体结合的S.p.或S.g.凝集繁殖成亮绿色荧光菌团,低速离心沉淀后,在低倍荧光镜下容易检出。荧光菌团可取出培养进一步验证。试验表明,此法敏感度比无吖啶橙的显微沉淀凝集试验和玻片凝集试验分别高100倍和2500—5000倍。作AOIFBC法检查,特异性强:与鼠伤寒沙门氏菌等七种常见细菌无交叉荧光菌团形成;敏感度高:每毫升含S.p.活菌84×10~2个和S.g.活菌76×10~1个以上,可呈“++”→“++++”荧光菌团。本法对雏鸡粪液模拟标本检测,获得肯定的阳性结果。     

分离LDH和酯酶同工酶的聚丙烯酰胺凝胶制备和LDH活性与反应时间关系的探讨

用正交试验方法,考察了聚丙烯酰胺凝胶电泳分离乳酸脱氢酶同工酶和酯酶同工酶的分离胶制备的三因素(丙烯酰胺浓度、丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺、缓冲液PH)、三水平,即L_9(3~3),采用综合评分法衡量电泳结果,经方差分析选出分离胶制备的最佳条件:乳酸脱氢同工酶,Acr=7.5％、C=2.6％,Acr/Bis=37.5、分离胶缓冲液PH8.9;酯酶同工酶,Acr=7.0％、C=2.3％。Acr/Bis=42.5分离胶缓冲液PH8.9。乳酸脱氢酶同工酶的活性与反应时间呈“S”型曲线关系。     

奶牛钙磷代谢障碍早期诊断研究——尾椎骨矿物质含量X线测定法及其临床意义

本文报导了适宜于奶牛尾椎骨矿物质含量的X线密度测定方法。即以特制的铝梯状标准体与末端部尾椎同时直接拍摄X线照片,用软组织密度差值法求出骨内矿物质含量。试验结果表明,成年奶牛尾椎骨矿物质含量正常参考值为0.547±0.076(g/cm~3)。钙磷代谢障碍病牛尾椎骨矿物质含量降低(减少14.3～38.9％),差异极显著(P<0.01)。与血清碱性磷酸酶活性、血清无机磷和血清钙变化资料比较,骨内矿物质含量变化具有更为灵敏的早期诊断价值。本方法精确度达94.4％,同其灰化值比较差异不显著(P>0.05)。     

汉源县花椒的土壤理化特性与产量关系的初步研究

汉源花椒主要生长在黄棕壤地带内,以棕色石灰土花椒产量最高,白浆化黄棕壤最低.花椒生长的土壤类型间在有机质、全氮、全磷、有效锌和石砾含量等方面的差异达极显著水准;碱解氮、有效磷、有效钾的差异达显著水准;全钾、有效锰、有效铁、有效钼无显著差异;有效硼含量均低.     

应用酶联免疫吸附试验检测鸭瘟病毒的实验研究

用酶联免疫吸附试验检测77例雏鸭,30例成年鸭人工感染鸭瘟病毒后病料中的抗原,能在临床症状出现之前从肝脏、脾脏、粪便和血液中检出病毒,达到早期诊断的目的。用本法检测了鸭瘟病毒在四种病科中的出现情况,找出了临床采样检测的最佳部位和时间。该方法具有特异性(不与NDV毒株,DPV弱毒株及巴氏杆菌发生交叉反应)、敏感性(雏鸭最高检出率可达94.6％,成年鸭最高检出率可达100％)可行性(样品易保存、结果易观察、试剂设备简单)、快速性(一天能得出结果)。可用于现场诊断及检疫。比目前常用于诊断鸭瘟的方法更具有实用和推广价值。     

立枯丝核菌菌丝融合群培养性状的比较

本文采用立枯丝核菌菌丝融合群的标准菌株和中国西南地区融合群的部分菌株,在25℃,PDA和查氏培养基上培养,比较了各融合群的菌丝生长速度和培养性状,试验结果表明:除AG—4与AG—5,以及AG—8,AG—9和AG—BI外,菌丝融合群互相间的菌丝生长速度差异显著;菌丝融合群内分离菌的培养性状是比较一致的,而融合群间分离菌的培养性状差异较明显。     

兔类胚胎干细胞的体外培养

为了确立兔类胚胎干细胞(ESCs-like)体外培养方法,研究探讨了兔囊胚形成环境与饲养层细胞对内细胞团(ICM)增殖、ICM原代集落形成以及集落碱性磷酸酶(AKP)阳性率的影响,并在MEF和REF饲养层上进行了兔ESCs-like的体外培养。结果显示,去除透明带桑葚胚在体外具有较高的囊胚发育率和囊胚贴壁率(P<0.05),体外发育囊胚ICM原代集落的AKP阳性率却显著低于体内发育囊胚(P<0.05);与MEF饲养层相比,REF饲养层上ICM原代集落的形成率显著偏低(P>0.05),但原代集落的AKP阳性率却显著高于其余各组(P<0.05);MEF饲养层与REF饲养层均支持兔ESCs-like的传代培养,但F3代后MEF组中ESCs-like的集落形成率显著高于REF组(P<0.05)。     

基层医院外科病房610例患者感染细菌分析

目的了解基层医院外科不同性质疾病感染病原菌的不同及耐药性差异,为临床用药治疗提供依据.方法常规分离、培养鉴定细菌,K-B法进行药敏试验,分析其临床分布及耐药性.结果 610份阳性标本中,分离率较高的常见菌主要为：金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌等.其中内脏器官感染组和软组织感染组分离...     

柑桔上胶孢炭疽菌生理分他的研究——Ⅲ、培养及生长特性的测定

对中国柑桔上分离到的25个柑桔胶孢炭疽菌分离系,进行培养及生长特性测定。结果表明,25个分离系在培养及生长特性上存在着差异,但这种差异不能说明柑桔上的胶孢炭疽菌存在着生理分化,同时也与该菌致病性差异不相关。     

城市餐饮泔水油分离方法的研究

 研究采用传统收集法和泔水收集罐法、水洗过滤法和离心法对城市餐饮泔水进行了收集和泔水油的分离,从分离出的油含量、油纯度以及工作效率等方面判断各种方法的分离效果,最终开发出一套快速、高效、低成本的城市餐饮泔水油分离方法。采用泔水收集罐法得到的提油率极显著高于传统法（P<0.01）,粉碎离心极显著高于加水稀释离心（P<0.01）,3000r/min极显著高于2000r/min（P<0.01）;不同温度离心处理时,随着城市餐饮泔水温度的升高提油率也随之增加,50℃和80℃间差异不显著,但与20℃ 相比显著提高（P<0.01）;水洗过滤法的提油率高于在30℃和粉碎条件下的离心法,但二者间差异不显著。综上所述,泔水收集罐法和水洗过滤法是一种有效分离城市餐饮泔水油的新方法,可应用于城市餐饮泔水的大规模处理     

羊耳菊提取物的抑菌动力学研究

[目的]研究羊耳菊不同浓度提取物对细菌存活率随时间变化的关系,以及不同pH值条件下提取物的抑菌效果。[方法]以金黄色葡萄球菌、甲型副伤寒沙门氏菌为供试菌种,绘制时间杀菌曲线和浓度杀菌曲线。在提取物浓度为最低抑菌浓度（MIC）时培养24h,测定不同pH值条件下的抑菌率。[结果]羊耳菊提取物对金黄色葡萄球菌和甲型副伤寒沙门氏菌的MIC、最低杀菌浓度（MBC）分别为62.5、125.0mg/ml和125.0、250.0mg/ml。绘制了羊耳菊提取物16MIC、4MIC、2MIC、MIC、1/2MIC和对照条件下的杀菌曲线。羊耳菊水提物抑菌作用最适pH值为6～8。[结论]羊耳菊提取物对金黄色葡萄球菌的杀菌作用在较高浓度时并没有进一步提高杀菌速度,表现为时间依赖性,但对甲型副伤寒沙门氏菌表现为浓度性依赖性。     

牛泰勒焦虫血源细胞的生长与代谢

探讨了含致弱的牛环形泰勒焦虫裂殖体的血源白细胞 (简称牛泰勒焦虫血源细胞 )在方瓶中的生长与代谢特性。结果表明 ,牛环形泰勒焦虫血源细胞在小方瓶中接种 7.5× 10 4cells/ml,经 84h达最高值 11.6× 10 4cells/ml,接种后在 4 8h内 ,细胞基本处于生长的适应期 ;4 8～ 84h ,细胞快速增殖 ,处于对数生长期 ;在 84～ 12 0h ,细胞基本处于稳定期状态 ;当细胞培养到 12 0h以后 ,活性开始急速下降 ,细胞进入衰亡期 ,到 14 4h ,活细胞只有8.5 6 %。在细胞培养 10 8h以内 ,葡萄糖基本处于缓慢的直线消耗状态 ,由起始浓度 2 .2 91g/l降至 0 .0 3g/l。葡萄糖耗竭 12h后 ,细胞开始快速死亡     

ABC─Dot─ELISA快速检测食品中沙门氏菌

本试验采用生物素—亲和素酶复合物—斑点酶联免疫吸附试验（ＡＢＣ—Ｄｏｔ—ＥＬＩＳＡ）检测食品中沙门氏菌。该法可检出ＩＳＣ液中接种的沙门氏菌。其敏感性可达１０４—１０５千个／Ｌ，比常规免疫酶法和免疫荧光法提高１０—１００倍。特异性检测表明，其与大肠杆菌、变形杆菌、产气杆菌未发生交叉反应。该法在２４ｈ内可报告结果，比常规法至少快３—４ｄ。对２００份食品检样进行检测，检出１９份，检出率９．５％，与常规法检测结果平行比较，漏检率仅为０．５％，结果相差不显著（Ｐ＞０．０５）。进行３次重复性试验，结果完全相同。试验结果表明，该法操作简便、敏感、快速，具有较高的特异性，适于对大批样品进行快速检测。     

测定痕量锗的高灵敏度显色反应的研究

本文较详细地研究了锗—对二甲氨基苯基荧光酮—十六烷基三甲基溴化铵显色体系水相光度法则定痕量锗的新方法。络合物的最大吸收峰在504mm 处,表观摩尔吸光系数为1.52×10~5L·mol~(-1)·cm~(-1),Sandell 灵敏度为4.77×10~(-4)μgG_e/cm~2。锗(Ⅳ)含量在0～7μg/25mL 范围内遵守比尔定律。方法用予煤炭中痕量锗的测定,结果满意。     

微生态制剂存放期内菌群活性检测

[目的]了解微生态制剂存放期内菌群的变化规律。[方法]采用活菌平板计数法,测定存放0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、20、30、40、50、60 d的自制微生态制剂的菌群活性,对保存6个月的微生态制剂进行活化处理并比较效果。[结果]自制微生态制剂存放10 d内随着天数的增加,菌落总数先增加后减少,可稳定在2.25×1010个/ml水平,存放30 d时菌落总数为1.98×1010个/ml,降低了12%,60 d时为8×108个/ml,但不影响应用效果。5‰的红糖水活化处理后的微生态制剂菌落总量达7.4×107个/ml,比未经活化的提高了23%,提高了利用效果。[结论]保质期内的微生态制剂活菌数量相对稳定,存放期在10 d内的微生态制剂的使用效果最好。     

磷矿粉、骨炭和油菜秸秆对重金属复合污染土壤细菌和古菌数量的影响

微生物的活动在土壤生态系统中发挥着重要的作用,作为检测土壤质量的敏感指标,其基因拷贝数的变化是响应外界环境的一种方式.通过土壤盆栽试验,结合Real-time PCR技术研究不同改良剂添加对重金属复合污染土壤细菌和古菌16S rRNA基因拷贝数的影响.结果表明:各处理中土壤细菌16S rRNA基因拷贝数在每克干土6.02×109～1.82×10m个之间,古菌在每克干土7.99×106～2.97×107个之间.污染土壤中添加不同改良剂对土壤中古菌和细菌16S rRNA基因拷贝数的影响有差异,种植玉米与否也影响这两种微生物在土壤的基因拷贝数.不种植玉米时,与对照相比,添加磷矿粉、骨炭和油菜秸秆处理导致土壤细菌基因拷贝数提高116.8％～163.2％;磷矿粉和骨炭处理导致土壤古菌基因拷贝数分别提高171.1％和224.8％.种植玉米时,添加骨炭和油菜秸秆处理导致土壤细菌的基因拷贝数分别比对照处理提高104.2％和92.0％;土壤中古菌的基因拷贝数除了添加骨炭处理显著比对照处理提高231.3％外,其他处理对土壤古菌基因拷贝数均没有影响.     

苏云金杆菌对菜青虫的毒力测定及田间防治效果

本文报导1974—1980年间利用苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis)的几个变种对菜青虫(Pieris rapae L.)的毒力测定和田间防治试验结果。室内菌效试验结果指出,不同菌剂的1×10~8/ml孢子、晶体混合液处理后2天可获90％以上死亡率,某些菌剂的1×10~7/ml悬液2天内可获55—100％死亡率。室内毒力测定结果看出,HD-1和B-Hm-18对3龄幼虫毒力随菌剂浓度递减相应减低,致死中浓度(LC_(50))随作用时间增长而降低。田间防治实践所用浓度不宜过低。对菜青虫的毒力直线回归的斜率b值经多次测定范围为0.44—2.65。田间防治试验结果表明,1×10~8/ml的菌液浓度一般可使虫口减退90％以上,以B-Hm-18效果较好。0.1×10~8/ml菌液的防治效果与80％敌敌畏1:800药液防治效果相同,0.4×10~8/ml菌液防治效果显著高于敌敌畏。同浓度的HD-1(美国高效菌种)和B-Hm-18(我院分离菌株)菌剂间防治效果无显著差异。结果指出利用苏云金杆菌可以在生产上有效地防治菜青虫。     

氟罗沙星-铜络合物与DNA的电化学研究

采用单扫描法和循环伏安法研究了氟罗沙星-铜-DNA三元体系的电化学行为,建立了利用电活性物质氟罗沙星-铜测定DNA的新方法。在0 05mol/L、pH=7 12的KH2PO4-NaOH缓冲溶液中,氟罗沙星-铜络合物在-0 36V(vs.SCE)处产生一个不可逆的并具有吸附性质的还原峰,DNA的加入使其峰电流降低,但峰电位不变。在最佳实验条件下,峰电流的差值(Δip)与DNA的浓度成正比,小牛胸腺DNA的线性范围为5 0×10-7～2 0×10-5g/mL,检出限为8 0×10-8g/mL。采用本方法测定了合成样品中DNA的含量,结果满意。     

小春作物上冰核细菌种群动态研究

 采用平板稀释分离计数法,在小春作物蚕豆、小麦和油菜生长期间,连续两年定点定期对冰核细菌种群数量动态变化进行检测。结果表明,在云南省昆明地区自然条件下,冰核细菌的数量最大密度出现在2月中旬至3月中旬,可达9.2×10⁹ CFU／g。