细菌LSN02和LLGJ04菌株对烟草土传病害的田间防效研究

烟草黑胫病和烟草青枯病是烟草生产上的重要土传病害,主要危害烟草的根部和茎杆,严重影响烟草的产量和品质。本研究探讨了烟草内生菌LSN02菌株和烟草根际细菌LLGJ04菌株单独灌根处理和与有机肥混施对烟草土传病害的田间防效。结果表明,生防菌灌根处理防治烟草土传病害的效果明显优于与有机肥混施处理。     

生防菌剂对西瓜根际土壤微生物群落和尖孢镰刀菌属的影响

【目的】了解不同生防菌剂对西瓜根际微生物群落结构和尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum f.sp.）的影响,为生防菌剂抑制西瓜枯萎病的机理研究提供依据。【方法】将西瓜苗移栽到连作20年西瓜的土壤中,设置B6、WF19、BW和对照4个处理,分别根部注施生防菌剂解淀粉芽孢杆菌B6、油菜假单胞菌WF19、B6和WF19复合菌液（各菌液细菌含量均为1×10⁸ CFU/mL）及无菌水1 mL/株,在西瓜采摘后采集根际土壤,测定土壤pH、有机质（OM）、全氮（TN）、硝态氮（NO^-₃-N）、铵态氮（NH⁺₄-N）、全磷（TP）、有效磷（AP）、全钾（TK）、速效钾（AK）含量及过氧化氢酶（CAT）、碱性磷酸酶（ALP）、脲酶（URE）、蔗糖酶（SUC）活性,并利用高通量测序(Illumina Hiseq)技术分析西瓜根际土壤的微生物群落变化。采用路径分析和SEM结构方程评估土壤环境因子、生物酶活性和微生物功能对尖孢镰刀菌的影响。【结果】生防菌剂B6提高了土壤4种生物酶活性和TN、TP、AP、NO^-₃-N、NH⁺₄-N、OM含量,降低了AK和TK含量;WF19提高了土壤CAT、ALP和SUC活性,降低了URE活性和TN含量,增加了土壤TP、AP、TK、AK、NO^-₃-N、NH⁺₄-N和OM含量;BW提升了土壤NO^-₃-N含量、CAT和SUC活性,降低了URE和ALP活性,减少了土壤中TN、TP、TK、AP、AK、NO^-₃-N和OM含量。根部注施生防菌剂后,WF19和BW处理土壤中尖孢镰刀菌的相对丰度降低,B6处理土壤中赤霉菌属的相对丰度降低。AP、TP含量和URE活性与细菌群落结构的关联性最大,AP、TK含量和URE活性与真菌群落结构的关联性最大;硝酸盐呼吸、固氮和亚硝酸盐氨化对尖孢镰刀菌具有负效应,效应系数分别为-2.27,-1.55和-0.57。【结论】生防菌剂通过调节土壤养分含量和生物酶活性影响生态系统的养分循环,进而影响土壤微生物群落结构和功能多样性,降低病原菌的相对丰度,从而发挥防治枯萎病害的作用。     

潍坊滨海盐碱土几点基础性状的研究初探

通过对山东潍坊滨海盐碱土基础性状的初步研究,确定了主要的地被植物种类为白茅草、砂引草、白蒿,土壤的pH值为7.96,可溶性盐的含量为0.332%。同时测定出潍坊滨海盐碱土细菌数量为3.1×10_⁵ cfu/g,放线菌数量为1.03×10_⁴ cfu/g,真菌数量为1×10_³ cfu/g。     

烟草内生细菌对寄主根际生态的影响

[目的]研究烟草内生细菌对烟株根际生态的影响。[方法]用对烟草黑胫病菌有拮抗作用的10种内生细菌菌悬液对烤烟K326进行浸种、灌根和喷灌处理,测定土壤的理化性质、酶活性及微生物数量。[结果]Itb95灌根处理的土壤有机质含量最高,Itb220浸种处理的土壤全磷浓度增加了30%。Itb185和Itb220灌根处理的土壤过氧化氢酶活性最高,均为37.2ml/g,Itb162、Itb220、Itb95和Itb80处理的土壤脲酶活性明显下降,Itb185处理的土壤蔗糖酶活性明显升高。Itb57和Itb12处理的土壤真菌数量减少,Itb57灌根处理的土壤细菌数量最多,达1.58×106cfu/ml,Ata28灌根处理的土壤放线菌数量最多。[结论]该研究为进一步利用内生细菌提供了生态学理论依据。     

拮抗菌生物有机肥对植烟土壤和烟草青枯病的影响

以常规施肥为对照,比较分析移栽前、团棵期、旺长期、成熟期4个生长阶段施用拮抗菌生物有机肥对烟株根际与非根际土壤养分、微生物数量及烟草青枯病的影响。结果表明,与常规施肥相比,施用生物有机肥的土壤p H值有所降低,根际土壤碱解氮、速效磷的含量有所升高,非根际土壤的碱解氮含量没有明显变化,根际与非根际土壤的细菌数量均低于常规施肥;施用生物有机肥的烟草青枯病发病率、病情指数比常规施肥低,烟株移栽95 d时的防效为31.43%;烟叶产量、上等烟的比例高于常规处理,产值增加3 039.30元/hm~2。     

不同质地土壤烟株根际微生物菌群变化分析

为探究烟株根际土壤微生态与青枯病的发生关系,从福建省邵武市烟草青枯病发生较多的沿山镇徐溪村、城郊镇高南村和水北镇故县村采集烟株不同生育时期的根际土壤,测定分析土壤机械组成、根际微生物的数量及种群变化等指标,并调查了各试验点烟草青枯病的发病情况。结果表明,沿山镇徐溪村和城郊镇高南村的试验田土壤属棕色轻壤土,而水北镇故县村的试验田土壤属灰色砂壤土;轻壤土中根际微生物总量、细菌数量及其在土壤微生物总量中的占比高于砂壤土;不同试验田土壤中的优势菌群不同,同一试验田在不同时期土壤中的优势菌群也有差别,其中健康烟株根际土壤细菌多样性程度较高;轻壤土中细菌菌群与结构较稳定,其烟草青枯病发病率也显著低于砂壤土。     

大黄鱼腐败菌腐败能力分析与特定腐败菌鉴别

探讨了分别接种腐败希瓦氏菌和假单胞菌的无菌大黄鱼鱼块在5℃贮藏中的生长速率和腐败代谢产物的生成速率,以产生异臭味时的腐败菌数和腐败代谢产物的产量因子作为腐败菌腐败能力的定量指标。接种鱼块腐败时(产生明显异臭味)腐败希瓦氏菌与假单胞菌的菌数即最小腐败菌数(N_s)的对数值分别为9.14lg cfu/g和9.25lgcfu/g。由Gompertz方程得到腐败希瓦氏菌和假单胞菌的生长动力学参数:最大比生长速率(μ_max)分别为0.0714和0.0700,最大菌数(N_max)的对数值分别为9.45lg cfu/g和9.37lg cfu/g。结果表明,两种腐败菌在无菌大黄鱼鱼块中的μ_max基本一致,且N_max都超过N_s,这两种腐败菌都能引起大黄鱼的腐败。接种鱼块中腐败希瓦氏菌的腐败代谢产物(TVBN和TMA)的产量因子Y_TVBN/cfu和Y_TMA/cfu分别为1.38×10^-10mg-N TVBN/cfu和1.31×10^-10mg-N TMA/cfu,假单胞菌的腐败代谢产物(TVBN)的产量因子Y_TVBN/cfu为1.18×10^-10mg-N TVBN/cfu,比较产量因子可得,两菌的腐败能力相当。因为大黄鱼低温贮藏中的优势腐败菌是腐败希瓦氏菌,其次是假单胞菌,根据特定腐败菌的概念,大黄鱼低温贮藏过程中的特定腐败菌是腐败希瓦氏菌,其次是假单胞菌。     

茶叶内生菌的分离鉴定及其生防功能初探

对采自福建宁德地区的大白毫和福云六号茶叶进行内生菌的分离和脂肪酸鉴定.从7份样品中共分离到16株细菌、1株真菌.老叶中均未检测到内生菌,芽叶中内生菌数量为26.5×106-139.5×106cfu.g-1.有机种植的福云六号芽叶含菌量是大白毫的1.94倍.常规种植的大白毫芽叶含菌量为97.5×106-139.5×106cfu.g-1,明显高于有机种植的26.5×106-28.3×106cfu.g-1.大白毫带有红杆菌属、微杆菌属、根瘤菌属和贪噬菌属的内生细菌,福云六号仅含有根瘤菌属和贪噬菌属.有11株茶叶内生菌对10种供试病原菌表现出拮抗活性,其中放射根瘤菌Eb659菌株抑菌谱最广,具有作为生防菌防治植物病害的潜质.     

菌株SYT-SF的筛选鉴定及生防效果验证

为筛选拮抗烟草黑胫病病原烟草疫霉（Phytophthora parasitica var. nicotianae）的生防菌资源,本研究对连作烟田烟草黑胫病发病地块的健康烟株根际土壤中的细菌进行了分离培养、筛选,并对抑菌效果较好的菌株进行了鉴定及生防效果试验。结果表明：从根际土壤中共分离到35株菌,其中菌株SYT-SF对烟草疫霉的拮抗作用最强,抑菌率达到77.15%;菌株SYT-SF具有较好的抑菌广谱性;依据菌株SYT-SF的形态特征、生理生化特征、16S rDNA序列及gryA基因序列分析,将SYT-SF归属于假单胞菌属（Pseudomonas）,暂定名为Pseudomonas sp. SYT-SF。盆栽试验表明,菌株SYT-SF预防组和治疗组对烟草黑胫病的生防效果分别达到71.97%和65.05%。菌株SYT-SF在烟草黑胫病生防菌剂及植烟土壤保育菌剂开发方面具有良好的应用潜力。     

不同形态氮素配比对地膜烟的生长及烟叶品质和产量影响

 研究云南旱地烤烟生产在采用地膜栽培技术条件下,NH₄⁺-N和NO₃^--N不同配比对烟株生长及烟叶品质和产量的影响。研究结果表明:100%的NH₄⁺-N或NO₃^--N都对烟株生长及烟叶的品质均产生不利影响;烟叶的产量及上等烟比例有随 NH₄⁺-N比例增加而提高的趋势。在一定范围内烟叶中总糖、烟碱、K的含量随NH₄⁺-N比例的增加而升高,总N含量则呈下降趋势。因此,在烟草生产中施用的N肥应注意到两种形态N肥的合理配合,不应只片面强调某一种N素形态的肥料施用。     

防治烟草青枯病生物有机肥对土壤微生物菌群的影响及其抗病效果

通过大田试验研究了生物有机肥对烟田土壤微生物菌群的影响和对烟草青枯病的防治效果.结果表明,大田试验的4个处理中,施用生物有机肥的处理3和处理4对青枯病发病率降低较为明显.与对照相比,青枯病发病率分别降低21.9％和25.0％,烟叶产量提高5.7％和5.3％,上中等烟比例提高2.3％和2.6％.施用生物有机肥后,烟株根际土壤微生物不仅数量多,而且种类丰富;发病烟株根际土壤中细菌数量增加218.5％,种类比较单一.施用生物有机肥可以改善烟田土壤的生态环境、抑制病原菌生长、减少病害的发生和提高烤烟品质.     

连作和感病对烟株根际土壤真菌群落结构的影响

【目的】了解连作及其与根腐病感染对烟株根际土壤真菌群落结构及多样性的影响,为连作土壤微生态环境定向调控和根腐病精准防治提供理论依据和技术指导。【方法】分别选取连作2,4和8年烟田健株（依次记为HT2、HT4、HT8）和根腐病感病烟株（依次记为ST2、ST4、ST8）根际土壤,以同区域撂荒2年以上耕层土壤为对照（CK）,测定不同处理土壤理化性质,利用高通量测序技术分析不同连作年限烟田健株和病株根际土壤真菌群落组成和多样性的差异,并基于冗余分析探讨了土壤化学性质与真菌群落分布的相关性。【结果】与对照（CK）相比,连作和感病降低了烟株根际土壤真菌群落的丰富度和多样性。健株根际土壤真菌优势菌群累积相对丰度总和小于病株。属水平上,连作2年和4年烟田健株和病株根际土壤镰刀菌属（Fusarium）相对丰度增幅为81.3%～665.1%,随连作年限的延长,健株和病株根际土壤淡紫紫孢菌属（Purpureocillium）相对丰度降幅为295.2%～1 387.1%;种水平上,健株和病株根际土壤茄腐镰刀菌（Fusarium solani）相对丰度增幅为88.5%～844.3%。土壤指示物种相对丰度随连作年限的延长而降低。土壤化学性质与真菌群落丰度密切关联,其中pH值和速效钾含量是影响连作和感病烟株根际土壤真菌群落分布的核心环境因子。【结论】连作和感病降低了烟株根际土壤真菌群落及有益菌群落的丰富度和多样性,但提高了病原菌的相对丰度,茄腐镰刀菌可能是引起试验烟株根腐病的主要病原菌。     

生物有机肥防治烟草黑胫病效果及对烟株生长发育的影响

为了研究生物有机肥防治烟草黑胫病的效果及对烟株生长发育的影响,通过设置对照、施用土壤调理剂、施用生物有机肥和生物有机肥与土壤调理剂配合施用共4个田间试验处理,分别测定了移栽前、团棵期、旺长期和成熟期烟株根际土壤的细菌、真菌和放线菌的数量变化,调查了烟株的农艺性状和黑胫病发病率。研究结果表明,施用生物有机肥可大幅度提高烟株根际土壤中细菌、真菌及放线菌的数量,同时施用生物有机肥还可以提高烟株的株高、烟叶叶面积系数,并有效抑制烟草黑胫病的发病率。     

烟草赤星病生防菌的鉴定及其抑菌机理

由交替链格孢（Alternaria alternata）引起的烟草赤星病是烟草生长中后期重要的叶部病害，直接影响烟叶的产量和品质。为开发烟草赤星病的生防制剂，对生防菌XNB-01进行了多相分类鉴定，并通过盆栽试验、粗提物的抑菌机理等研究，进一步阐明了XNB-01的生防机理。皿内对峙结果表明，XNB-01对交替链格孢的抑菌半径达到 11.0 mm。菌株XNB-01短杆状，与Paenibacillus polymyxa ATTCC 842相似性为98.63%。次生代谢产物检测结果表明，XNB-01可以分泌多种真菌细胞壁降解酶，并具有溶解有机磷、解钾的能力。盆栽试验结果表明，XNB-01在 1×10⁴_{8 CFU/mL的施用浓度下显著增加了烟草幼苗的株高、鲜质量和干质量；在1×10⁹ CFU/mL的施用浓度下显著降低了烟草赤星病的病情指数，防效为60.94%，与菌核净（65.33%）相当。此外，XNB-01 的胞内粗提物可抑制交替链格孢菌丝的生长和孢子萌发，使菌丝膨大，孢子皱缩。经200 μg/mL XNB-01 胞内粗提物处理后，峰值处的胞外电导率、核酸和蛋白质泄漏量分别是对照组的2.97、1.83、8.28倍，丙二醛含量比对照升高1.36倍。综上所述，P.polymyxa XNB-01 具有防治烟草赤星病的生防潜力。}     

小麦蚕豆间作对根际土壤氮转化微生物的影响

通过田间小区试验,采用磷脂脂肪酸（PLFA）、实时荧光定量PCR研究了小麦蚕豆间作不同生育期对根际土壤微生物群落的变化、氨氧化细菌（AOB）、氨氧化古菌（AOA）以及反硝化细菌中亚硝酸还原酶（nirK）、一氧化氮还原酶（norB）和氧化亚氮还原酶（nosZ）基因拷贝数以及土壤酶活性和土壤硝态氮、铵态氮含量的影响。结果表明：与单作相比,小麦蚕豆间作显著提高了根际土壤中总的PLFAs生物量、细菌、真菌、放线菌和好氧菌的生物量。土壤样品中的amoA基因拷贝数在10⁵～10⁶范围内AOB的amoA基因数量高于AOA。在不同的生育期,根际土壤中nirK的基因拷贝数都是间作高于单作;在拔节期,间作蚕豆的norB基因显著高于其他种植模式（P<0.05）;在拔节期、抽穗期,nosZ基因均是间作显著高于单作（P<0.05）,并随着生育期呈现降低的趋势。间作降低了根际土壤NO₃^--N的含量,提高了NH₄⁺-N的含量（P<0.05）。说明小麦蚕豆间作后改变了根际土壤的微环境,使得土壤微生物群落结构发生改变,这种改变在一定程度上能够对土壤氮素的有效保蓄和供应、同时防止氮素损失和污染起到积极作用,为间作增产提供了氮素营养保障。     

豫西烟草不同生长阶段根际土壤微生物的区系变化

为探明豫西山区优质烟田烟草根际土壤微生物区系的变化,为烟田精准施用微生物菌剂改良烟田土壤提供参考,应用微生物常规分析法及分子微生态方法分析烟草根际主要微生物类群、生理群在不同生长阶段的变化。结果表明:烟草根际土壤的微生物数量高于对照(未栽植烟草的同一地块土壤),微生物总数在烟草生长前期不断增加,现蕾期后降低,细菌在各期土壤微生物组成中都占绝对优势;在烟草整个生育期内,根际土壤中自生固氮菌、硝化细菌、氨化细菌的数量均比对照高,纤维素分解菌则相反;生长后期,烟草根际与对照土中细菌的种类和数量越接近,表现出的相似性也越高。烟草根际土壤微生物区系的趋同性或土壤微生物多样性的消失是引起连作障碍的主要原因之一。     

鳗弧菌vah1缺失菌株构建及致病性评估

为了构建减毒鳗弧菌菌株,本文通过基因重组和Overlap PCR技术,敲除鳗弧菌中的毒力基因vah1,构建vah1缺失鳗弧菌菌株△vah1,缺失菌株△vah1的生长速率没有变化,溶血活性下降了9.5倍,生物膜形成能力下降。通过感染凡纳滨对虾,得出野生菌株的半数致死量为(3.16±0.8)×10_⁵ cfu/mL,缺失菌株△vah1的半数致死量为(9.77±0.5)×10_⁵ cfu/mL,缺失菌株的半数致死量提高了约3.09倍,在对虾体内的定植能力下降了约3倍左右,对凡纳滨对虾的肝胰腺细胞造成的溶解和空泡化的破坏程度下降了,引起凡纳滨对虾的免疫基因CAT、SOD、PO、LZM、ACP的表达水平低于野生菌株。△vah1鳗弧菌菌株为后续减毒疫苗菌株或抗鳗弧菌特异性免疫增强剂制备奠定基础。     

石灰性农田土壤-水稻系统根际与非根际土氮转化速率差异

为探讨石灰性农田土壤-水稻系统根际与非根际土的氮素转化特征差异,本研究以石灰性紫色土发育而成的水稻土为研究对象,通过采集水稻分蘖期和成熟期的根际与非根际土壤,开展¹⁵N成对标记室内好氧培养试验,并计算土壤各初级氮转化速率。结果表明：水稻分蘖期根际土初级矿化速率（4.45 mg·kg^-1·d^-1）和硝化速率（9.16 mg·kg^-1·d^-1）均显著低于非根际土（P<0.05）;水稻成熟期根际土初级矿化速率（6.75 mg·kg^-1·d^-1）和硝化速率（16.86 mg·kg^-1·d^-1）与非根际土无显著差异,但显著高于分蘖期根际土的初级矿化和硝化速率（P<0.05）。水稻分蘖期NH₄⁺-N固定速率显著高于成熟期,其中,分蘖期根际土NH₄⁺-N固定速率为19.75 mg·kg^-1·d^-1,与成熟期根际土相比增加了42.21%;此外,两个生育期的水稻根际土NO₃^--N固定速率均显著高于非根际土。水稻分蘖期根际土无机氮总固定速率显著大于有机氮矿化速率,有利于氮素的留存和周转,相应地,初级硝化速率显著降低,减少了土壤NO₃^--N损失。研究表明,水稻不同生育期对石灰性水稻土主要氮转化速率的影响具有差异,且这种差异可能受水稻生育期内土壤水分、根系分泌物及无机氮含量变化的调控。     

栽插密度与规格对杂交水稻泰优058产量影响初报

以高产优质杂交水稻品种泰优058为材料,研究了2个播期、3种插植密度、2种种植规格和2种土壤类型处理对水稻生长和产量的影响。结果表明,泰优058在高产插植期内,插植越早越好,并提倡大小行插植；水稻品种泰优058生产上应推广合理密植技术,油菜茬宽行(等行)窄株(9-10)×5寸插植,插植密度18～19.5万穴/hm_²,大小行采取(10＋6)×5寸的株行距,插植密度19.5万穴/hm_²；小麦茬宽行(等行)窄株9×5寸插植,插植密度19.5万穴/hm_²；大小行采取(10＋6)×5寸、(12＋6)×5的株行距,插植密度19.5-22.5万穴/hm_²；随着插植时间的推迟,插植密度应有所增加,但最高不能超过22.5万穴/hm_²。     

施氮水平对稻-稻-紫云英稻田土壤细菌数量及群落结构的影响

通过对稻-稻-紫云英稻田土壤细菌数量和群落结构多样性进行研究,揭示不同施氮水平对稻田土壤微生物的影响,以期为促进稻田土壤养分管理提供依据。以湖南省8年定位田间试验稻田土壤为对象,试验处理以冬闲水稻田不施氮肥为对照（CK）,设置冬种紫云英还田条件下水稻季三个施氮肥水平分别为不施氮肥（0 kg N·hm^-2,CN₀）、施中水平氮肥（100 kg N·hm^-2,CN₁₀₀）、施高水平氮肥（200 kg N·hm^-2,CN₂₀₀）。采用荧光定量PCR和Illumina MiSeq高通量测序平台分别研究了不同处理下稻田土壤的总细菌数量和群落结构。结果表明：稻田土壤总细菌数量为1.25×10⁸~8.47×10⁹拷贝数·g^-1干土;处理间物种多样性指数（Shannon和Simpson）和物种丰富度指数（Ace和Chao）均存在显著性差异;16S rRNA基因在门水平分类下3个主要类群是变形菌门（Proteobacteria）、绿弯菌门（Chloroflexi）和硝化螺旋菌门（Nitrospirae）,分别占总OTU比例的42.22%~54.54%、8.56%~20.73%、10.98%~15.08%;CN₁₀₀土壤样品中变形菌门的相对丰度低于CN₂₀₀、CN₀和CK,绿弯菌门的相对丰度分别为CN₂₀₀、CN₀和CK的2.26、1.58倍和1.17倍。相关性分析表明,土壤细菌16S rRNA基因拷贝数与铵态氮含量呈显著正相关。影响土壤细菌菌群结构的因子分析结果表明,土壤细菌与土壤pH值、铵态氮、硝态氮存在密切相关性。研究表明,在冬种紫云英还田条件下施加氮肥可以显著改变湖南省双季稻区土壤微生物数量与结构。