家蚕二分浓核病毒NS1蛋白单克隆抗体的制备及其特异性验证

家蚕二分浓核病毒(Bm BDV) NS1蛋白是一个与病毒复制相关的多功能蛋白。为获得NS1蛋白的单克隆抗体,设计并合成了12条NS1蛋白的抗原表位肽段,分别免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,获得了18株能分泌抗体的阳性杂交瘤细胞。在大肠埃希菌中表达NS1作为抗原,通过Western blot对所获得的单克隆抗体进行验证。结果表明,由8/C278细胞株获得的单克隆抗体能特异识别重组的NS1蛋白,所用抗原表位序列为DIPPEEYRELRT。利用该抗体能检测到Bm BDV感染家蚕中肠组织中NS1蛋白的表达。该研究为深入探索NS1蛋白的功能打下了基础。     

菌株XXJ15的分离及其活性评估

采用平板分离技术从烟草根际土壤中分离到一个菌株,编号为XXJ15。对该菌株的几种活性功能进行了评估,结果表明：XXJ15在魔芋粉液体鉴别培养基经过48 h发酵后,发酵液中的β-甘露聚糖酶活性达到4.6 U/mL；在解磷液体鉴别培养基中培养72 h后,培养基上清液中游离态磷含量达到102 μg/mL；XXJ15不具备解钾活性。菌株XXJ15可作为后期诱变育种、烟草专用菌肥和土壤保育剂开发等研究的备用菌株。     

耕作模式对烤烟根系生长和烟叶钾、氯含量的影响

为探讨豫南烟区适宜的烤烟耕作模式,采用田间试验,设置T1(常规耕作,耕作深度25 cm)、T2(原位不动土层耕作,耕作深度45 cm)、T3(起垄带下原位条状深耕,耕作深度45 cm)3个耕作模式处理,研究了耕作模式对烤烟根系生长和烟叶钾、氯含量的影响。结果表明,烤烟采收结束,20～40 cm和40～60 cm土层土壤容重和含水率均表现为T1T2T3,其中,3个处理间土壤容重差异不显著,T2、T3处理20～60 cm土层的土壤含水量较T1处理显著降低。移栽后75 d,与T1处理相比,T2、T3处理烟株根系体积、根干质量、一级侧根和不定根数量均显著增加。与T1处理相比,T2、T3处理烟叶产值分别显著提高9.8%、10.6%,均价和上等烟比例均以T3处理最高,分别为23.6元/kg和46.7%。从烤后烟叶的钾、氯含量看,与T1处理相比,T2、T3处理均提高了中部叶和上部叶的钾含量,降低了氯含量。综合分析,在豫南烟区,生产中较适宜的耕作模式为起垄带下原位条状深耕。     

烟草钾离子通道基因AKT1蛋白的生物信息学分析

本研究对普通烟草钾离子通道基因AKT1蛋白进行生物信息学分析。结果表明,钾离子通道蛋白为4个亚基组成,一半作为跨膜结构通道,一半在膜外边作为辅助开关结构。9条烟草钾离子通道蛋白质中6条为碱性,3条为酸性;5条为疏水性蛋白,4条为亲水性蛋白。其中,3条短的钾离子通道蛋白有5个跨膜结构,且排列位置与顺序基本一致;3条蛋白的磷酸化位点在蛋白两端分布比较密集,中间分布相对较稀疏;3条蛋白的基因在器官的表达具有特异性,在不同生长发育阶段,有不同钾离子通道基因发挥作用。本研究为通过分子技术提高烟叶钾含量和提升烟叶品质奠定理论基础。     

烟草黑胫病生防菌的筛选鉴定及其防效

从毒鹅膏菌(Amanita phalloides)栖生土壤中分离筛选烟草疫霉(Phytophthora parasitica var. nicotianae)拮抗菌株，通过盆栽试验考察拮抗菌株对烟草黑胫病的防效。结果表明：从毒鹅膏菌栖生土壤中分离筛选的DE4–5菌株对烟草疫霉的抑菌率达78.22%；DE4–5具有广谱抗真菌活性；依据DE4–5的形态和生化特征初步判断为假单胞菌属(Pseudomonas)，结合16S rDNA保守序列及辅助gyrA基因片段序列分析，确定DE4–5为亚麻假单胞菌，定名为Pseudomonas lini DE4–5；生物活性测定显示，菌株DE4–5具有解磷和解钾能力，产IAA、蛋白酶、纤维素酶和脲酶；盆栽试验结果表明，菌株DE4–5预防组与治疗组的烟草黑胫病发病率分别为24.79%和39.24%，病情指数分别为26.31%和29.37%，防效分别达到69.14%和63.98%。