鸡减蛋综合征的人工感染试验

用鸡减蛋综合征（ＥＤＳ－７６）郑州分离株（Ｚ１６）人工感染不同日龄ＨＩ抗体阴性的褐壳蛋鸡，除１０日龄雏组外均表现良好的抗体反应。攻毒后二周，１０，４０，７０，１２０，２００，３６０日龄各组鸡的ＨＩ抗体依次为２．７、６．３、９．７、９．８、８．９、９．０（ｌｏｇ２），２００，３６０日龄组鸡感染后出现典型的ＥＤＳ－７６症状，产蛋率分别下降４５％和１５％，但３６０日龄组异常蛋数量较少，恢复也快些。１２０     

鸡新城疫D10株和减蛋综合征GC2株鸭胚源二联灭活疫苗田间免疫 …

用同一鸭胚增殖鸡新疫Ｄ１０（ＮＤ－Ｄ１０）的减蛋综合征ＧＣ２（ＥＤＳ７６－ＧＣ２）两株病毒制成的异源二联灭活苗,与常规生产的新减二联灭活苗,分别免疫４月龄蛋鸡,均在免疫后第４周,产生的ＮＤ和ＥＤＳ７６ＨＩ抗体水平达到峰值,前者产生的ＨＩ抗体价分别为１０．６ｌｏｇ２和９．４ｌｏｇ２,后者为１０．１ｌｏｇ２和８．７ｌｏｇ２。免疫后第５２周,二者产生的ＮＤ和ＥＤＳ７６和ＥＤＳ７６ＨＩ抗体价均维持在７ｌｏ     

鸡产蛋下降综合症油乳剂灭活苗的免疫及攻毒保护试验

对应用当地分离病毒株研制的鸡产蛋下降综合症系列油乳剂灭活苗进行了免疫试验。结果表明,免疫后,鸡产蛋下降综合症（ＥＤＳ７６）油乳剂灭活苗、鸡新城疫（ＮＤ）－产蛋下降综合症二联油乳剂灭活苗及鸡新城疫－鸡传染性支气管炎（ＩＢ）－产蛋下降综合症三联油乳剂灭活苗免疫组的血清ＥＤＳ７６ＨＩ抗体迅速上升,维持４个月后仍在６．８－８（ｌｏｇ２）以上,并且能够抵抗强毒的攻击。证明所研制的ＥＤＳ７６油苗、ＮＤ－ＥＤＳ７６二联油苗、ＮＤ－ＩＢ－ＥＤＳ７６三联油苗对ＥＤＳ７６具有良好的免疫作用,能够抵抗ＥＤＳ７６强毒的攻击并产生高而持久的血清ＨＩ抗体。此外,对ＮＤ－ＥＤＳ７６二联苗、ＮＤ－ＩＢ－ＥＤＳ７６三联苗免疫组的血清ＮＤＨＩ抗体测定结果表明,上述二联苗、三联苗能产生与接种ＮＤ油苗一样良好的ＮＤ免疫效果,在免疫后１３０天时,其血清ＨＩ抗体仍高达９－１１（ｌｏｇ２）以上,与对照组有极显著的差异     

鸡新城疫—减蛋综合征蜂胶佐剂灭活二联苗的研究

首次用蜂胶作为佐剂，研制出鸡新城疫－减蛋综合征（ＮＤ－ＥＤＳ）二联灭活 ，在开产前１个月左右，用该苗按０．５ｍｌ／只的剂量皮下或肌肉注射免疫蛋鸡，接种后２０ｄ测ＮＤ抗体（ＨＩ法）效价为６．２５－７．０（ｌｏｇ２，）ＥＤＳ－７６抗体（ＨＩ法）效价为６．５－８．０，用ＮＤ－ＥＤＳ油乳剂灭活二联苗做对照，进行免疫持续期平行测定对比试验，免疫后１８０ｄ，蜂胶苗免疫组鸡的ＮＤ抗体滴度为８．５－８．７，ＥＤＳ     

间接法Dot—ELISA检测鸡减蛋综合症抗体的建立及应用研究

应用ＳｅｐｈａｄｃｘＧ－２００层析法纯化鸡减蛋综合症病毒，利用ＮＣ膜作为载体，成功建立了检测ＥＤＳ－７６血请抗体的斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）。抗原包被浓度为２μｇ／ｍｌ，被检血清浓度为１：２０，酶标兔抗鸡１ｇＧ浓度为１：２００．底物溶液最适ｐＨ值为７．２。对Ａ－Ｆ６个养禽场随机抽检血清１６０份，分别用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ、ＨＩ和ＡＧＰ检测，Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检出阳性率为５１．９％，ＨＩ检出阳性率为４６．９％，ＡＧＰ检出阳性率为３１．９％。对１４０日龄鸡人工感染试验，测定抗体消长规律。本方法不需特殊仪器。适用于基层兽医部门和养鸡场对ＥＤＳ－７６的血清学诊断和流行病学调查。     

蛋鸡非典型新城疫一例及其病原鉴定

１９９７年３月下旬，上海市郊区某蛋鸡场发生以产蛋下降为第一指征的非典型新城疫，通过临诊调查、抗体测定、病毒分离与鉴定进行了确诊。结果：感染鸡群产蛋下降的幅度可高达５０％；新城疫ＨＩ抗体滴度高达１２ｌｏｇ２或以上；用泄殖腔棉拭接种鸡胚的分离物用标准血清鉴定为新城疫病毒（ＮＤＶ），初代尿囊液的ＥＬＤ５０为１０－７．５（０．２ｍＬ），１日龄ＳＰＦ鸡胚脑内接种致病指数（ＩＣＰＩ）和６周龄ＳＰＦ鸡静脉接种致病指数（ＩＶＰＩ）分别为１．７２５和２．３２，其毒力接近标准毒株—ＮＤＶ北京株Ｆ４８Ｅ９。     

郑州地区家鸭EDS—76血清学调查

郑州地区９个鸭场鸭群中有７个鸭场为ＥＤＳ－７６ＨＩ抗体阳性，阳性率为６６～１００％，不同日龄和不同品种鸭群对感染无明显差异。被感染ＥＤＳ－７６病毒鸭群虽无可见临床症候，对产蛋率也无明显影响，但有一定流行病学意义，试验证明，使用ＥＤＳ－７６ＨＩ母原抗体４．８Ｌｏｇ２以下的鸭胚，用ＨＡ５×２＾１２的种毒接种，对其病毒增殖没有明显的影响，可用于制造ＥＤＳ－７６灭活疫苗，但鸭胚母原抗体超过４．８Ｌｏｇ２以     

陕,甘,宁,青部分鸡场减蛋综合症的血清学调查

用微量血凝抑制试验（ＨＩ）检测鸡减蛋综合症（ＥＤＳ－７６）的感染情况，结果表明，无减蛋症状鸡群平均阳性率为３３．８％（９７／２８７），ＨＩ抗体效价为１∶１６－１∶１２８；有减蛋症状鸡群平均阳性率为９２．７％（１６５／１７８），ＨＩ抗体效价多为１∶６４－１∶１０２４，最高可达１∶１６３８４     

鸡减蛋综合症蜂胶灭活疫苗的研究与应用

用纯化的天然免疫增强剂蜂胶研制成功鸡减蛋综合症蜂胶灭活疫苗。疫苗中蜂胶干物质含量为１０ｍｇ／ｍＬ。用该苗０．５ｍｌ免疫开产或临开产母鸡，接种后７ｄ ＨＩ抗体效为７￣１０（ｌｏｇ２），９０ｄ为９￣１２（ｌｏｇ２），１８０ｄ为８．７（ｌｏｇ２），３００￣３６０ｄ为６．５￣８．０（ｌｏｇ２）。免疫期为一年。－１５℃保存不冻结，保存期为１８个月，０￣８℃为１５个月，１０￣１５℃为１２个月，２５￣３０℃为３     

鸡减蛋综合征油乳剂灭活苗的制备及其免疫效果测定

以鸡减蛋综合征（ＥＤＳ－７６）当地流行毒株做为种毒，制备了鸡减蛋综合征油乳剂灭活苗。经实验室免疫试验和大田免疫试验证明，该苗在免疫后第１０天即可产生坚强的免疫力（ＨＩ效价为８．５ｌｏｇ２），到第３０天血清中ＨＩ效价达到高峰（１１．２５ｌｏｇ２），直到第１５０天，其ＨＩ效价仍为７．５ｌｏｇ２。对用苗鸡群（１０万余只）跟踪调查１０个月，未发现有发病鸡群，免疫效果普遍反应良好。该苗在４℃可保存１８个月以上，室温阴暗处可保存１０个月以上。证明该苗产生免疫力快、强而且持久，能有效地控制鸡减蛋综合征在本地区的流行，可进行推广应用。     

陕,甘,宁,青部分鸡场减蛋综合症的血清学调查

采用微量血凝抑制试验（ＨＩ）检测鸡减蛋综合症（ＥＤＳ－７６）的感染情况，共检测陕、甘、宁、青四省（区）未拉种过ＥＤＳ－７６疫苗的８个鸡场４６５份血清，结果表明，无减蛋症状鸡群美元阳性率为３３．８％（９７／２８７）；有产蛋下降症状鸡群平均阳性率为９２．７％（１６５／１７８）。     

郑州地区家鸭EDS－76血清学调查

郑州地区９个鸭场鸭群中有７个鸭场为ＥＯＳ－７６ＨＩ抗体阳性，阳性率为６６～１００％．不同日龄和不同品种鸭群对感染无明显差异．被感染ＥＤＳ－７６病毒鸭群虽无可见临床症候，对产蛋率也无明显影响，但有一定流行病学意义．试验证明，使用ＥＤＳ－７６ＨＩ母原抗体４．８Ｌｏｇ２以下的鸭胚，用ＨＡ５×２１２的种毒接种，对其病毒增殖没有明显的影响，可用于制造ＥＤＳ－７６灭活疫苗．但鸭胚母原抗体超过４．８Ｌｏｇ２以上，每增加１个滴度，所培养的病毒ＨＡ价下降５×２１．７．不宜作为制苗鸭胚．鸭群ＥＤＳ－７６血清抗体和卵黄抗体检测比较结果表明，被检的血清和卵黄抗体平均效价基本相同，可用卵黄代替血清作为血清学检查的被检材料．     

产蛋下降综合征病毒的分离鉴定

对我省几个暴发产蛋下降综合征的鸡群进行了流行病学调查。用９日龄的鸭胚从病鸡的输卵管和子宫内分泌到两株ＥＤＳ－７６病毒。该病毒对鸡红细胞的凝集作用可被ＥＤＳ－７６的标准阳性血清所抑制。用分离毒接种１８９日龄产蛋母鸡６只，６／６发病。接毒后５天，可从血中测出ＨＩ抗体，１５天时达最高峰，２５天后开始渐渐下降。卵黄ＨＩ抗体与血液ＨＩ抗体呈正相关，只是卵黄ＨＩ抗体价比血液的高一个滴度。接毒鸡所产的蛋，ＥＤＳ     

改革鸡产蛋下降综合症灭活苗制备工艺的研究

选用鸡产蛋下降综合症（ＥＤＳ７６）的两个地方毒株为种毒感染９日龄的鸭胚，感染后１２０小时采取鸭胚的尿囊膜制成浸出液，经甲醛灭活后，用以１０号白油为主的油佐剂乳化制成ＥＤＳ７６灭活苗，简称改革法，下同。     

鸡减蛋综合征蜂胶佐剂灭活苗免疫期的试验研究

用三批减蛋综合征（ＥＤＳ）蜂胶佐剂灭活苗（９４０９１２、９４１０２４、９４１１２１）分别免疫成年产蛋母鸡，定期采血，连续检测ＨＩ抗体动态变化，这三批苗６个月的平均ＨＩ抗体滴度分别为７．７、８和７．７（Ｌｏｇ２）；用鸭胚做ＥＤＳＶ血清中和试验，其保护率均为１００％（５／５，５／５，５／５）；用ＥＤＳ２０６油苗和ＥＤＳ白油苗同时分别免疫蛋鸡，做平行对比ＨＩ抗体检测，其６个月的平均ＨＩ抗体效价分别为７．     

斑点免疫金测定法检测鸡减蛋综合征抗体的研究

用胶体金标记提纯后的免抗鸡ＩｇＧ，建立了一件以微孔滤膜为固相载体，以红色胶体金作为标记物的检测ＥＤＳ－７６病毒抗体的斑点免疫金测定法（ＤＩＧＦＡ）．该法具有简便、灵敏、快速等优点，全过程于３～５分钟内完成，阳性结果在膜上呈现红色斑点；对鸡ＩｓＧ的最小检测量（灵敏度）为６３×１０－９ｇ；与其它病毒阳性血清无交叉反应。ＤＩＧＦＡ检测ＥＤＳ－７６抗体既可定性，也可定量。检测８０份待检血清，在ＨＩ检出的５６份阳性标本中（效价≥４ｌｏｇ２）用ＤＩＧＦＡ检出阳性标本５５份（效价≥６１ｏｇ２）二者阳性符合率为９８．２％．与ＨＩ比较，ＤＩＧＦＡ平均高２．５（ｌｏｇ２）。本技术为ＥＤＳ－７６和其它禽病的快速诊断和免疫监测提供了一个新的方法。     

鸡新城疫—传染性法氏囊炎母源抗体的监测

应用血凝抑制试验（ＨＩ），琼脂扩散试验（ＡＧＰ）对１￣２５日龄肉用及蛋用雏鸡的血清和１￣２１日龄鸡胚中的卵黄提取液、胚体浸液、血清进行了鸡新城疫（ＮＤ）、传染性法氏囊炎（ＩＢＤ）母原性免疫抗体消长动态的监测。试验结果表明，雏鸡母源抗体的消长动态呈下山峰势；鸡胚中卵黄内ＮＤ抗体效价１￣１７日胚龄持续在６￣９（ｌｏｇ２）１８日胚龄其抗体水平开始下降，ＩＢＤ抗体效价１￣１７日胚龄持续在２￣３（ｌｏｇ２）     

新城疫-传染性支气管炎-减蛋综合征三联油乳剂苗免疫对比试验

用血凝抑制试验（ＨＩ）监测自制ＮＤＲＩＢＥＤＳ、ＮＤＫＩＢＥＤＳ三联油乳剂灭活苗免疫鸡的抗体水平,并进行相应强毒攻击,同时以ＮＤＥＤＳ二联、ＲＩＢ、ＫＩＢ等自制油苗和进口ＮＤＲＩＢＥＤＳ三联油苗作对照。在此基础上,用自制三联苗免疫产前鸡４批共３８５２只,进行了田间免疫试验。结果表明：１用各种疫苗免疫后,第２０天鸡体ＨＩ抗体达峰值,维持３个月左右,至免疫后３６０天,ＮＤ抗体仍维持在８０ｌｏｇ２以上,ＲＩＢ、ＫＩＢ和ＥＤＳ的ＨＩ抗体均在７０ｌｏｇ２以上。经检验不同疫苗免疫的鸡相应抗体在同时期内均无显著差异（Ｐ＞００５）。２攻毒试验也表明,自制苗和进口苗具有同等的免疫效果,均获良好的免疫保护。３田间免疫试验表明,自制三联苗免疫效果良好。     

EDS76双毒株油佐剂灭活疫苗的研制及免疫原性测定

首先以ＥＤＳ７６－ＮＥ_４和ＥＤＳ７６－ＢＣ两个毒株的鸭胚培养物混合或单独分别接种鸡，证明混合接种的鸡，其ＨＩ价高于单独接种的鸡。应用混合培养物（ＨＡ价≥１∶３２７６８）制成３批灭活油佐剂ＥＤＳ７６疫苗，接种鸡６万只以上，接种鸡未出现不良反应，接种后１５、２１、３５和６０天时，鸡的平均ＨＩ价分别为７．５、８．３、９．３和８．０。     

新城疫—传染性支气管炎—减蛋综合征三联油乳剂苗田间免疫 …

用自制ＮＤ－ＲＩＢ－ＥＤＳ和ＮＤ－ＫＩＢ－ＥＤＳ两种三联油乳剂苗,各免疫产前蛋鸡４批,共１３８５２只,进行田间免疫试验,抽测不同免疫时期鸡血清或蛋黄样品中１６０份,并用９６只随机样鸡进行强毒攻击试验。结果表明：在免疫后的２０￣３４０ｄ,抽测样品中ＮＤ,ＲＩＢ,ＫＩＢ和ＥＤＳ ＨＩ抗体分别处于６．３ｌｏｇ２￣１１．４ｌｏｇ２、６．４ｌｏｇ２￣９．０ｌｏｇ２、６．０ｌｏｇ￣８．９ｌｏｇ、６．３ｌｏｇ￣