猪肠源性枯草芽孢杆菌耐逆性研究

研究了猪肠源性枯草芽孢杆菌对逆性因子的耐受性。将猪肠源性枯草芽孢杆菌作如下试验处理,在pH为2.0、3.0和4.0的营养液中培养3、6和9 h,在含0.1%、0.3%和0.5%胆盐营养液中培养4和8 h,在70、80、90和100℃的营养液中处理10和20 min,在Cu和Zn离子浓度分别为0、100、200、300、400和500 mg·L-1的营养液中培养24 h,测定细菌存活率;在常规营养液中和37℃条件下培养24和48 h,测定培养液中细菌分泌的蛋白酶和淀粉酶活性。试验结果显示,猪肠源性枯草芽孢杆菌对酸和胆盐有较强的耐受性,对70～90℃的高温也有不同程度的耐受力;微量元素铜离子对枯草芽孢杆菌的增殖有促进作用,但锌离子对其有抑制作用;枯草芽孢杆菌有较强的产蛋白酶能力,但产淀粉酶性能较弱。基于试验结果推断,猪肠源性枯草芽孢杆菌对酸、胆盐、高温和铜离子的耐受性较强。     

产酶益生芽孢杆菌的筛选

从畜禽动物胃肠道分离具有产酶能力及抑菌活性的芽孢杆菌,对其进行耐酸、耐胆盐、产酶能力及抑菌试验,并结合其形态特征进行生理生化试验鉴定。结果表明,J2、J3和J14具有较强的产淀粉酶和蛋白酶的特性,N7和N10产纤维素酶能力较强,5株芽孢杆菌均有较强的抑菌活性并且能抵抗高浓度胃酸、胆盐的不良环境,具有较高的存活数。初步鉴定J3为地衣芽孢杆菌,J14、J2为蜡样芽孢杆菌,N7、N10枯草芽抱杆菌。     

MS-D活性糖对肠道菌生长及部分生物学特性影响的初步探究

为研究MS-D活性糖对肠道细菌生长及其生物活性的影响,选择大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和嗜酸乳杆菌4种肠道菌的标准菌株作为受试菌种,进行MS-D对细菌的生长、酸碱耐受性、温度耐受性及耐盐性的影响等试验。结果表明:MS-D对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、嗜酸乳杆菌和金黄色葡萄球菌有增菌作用,最适作用量分别为5%、2%、0.1%和0.4%;MS-D对4种细菌的耐酸碱能力均有一定的保护作用;提高了对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的温度耐受能力;对嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌的胆盐耐受能力有一定的保护作用。     

枯草芽孢杆菌Y-3生长特性及抗性研究

[目的]为枯草芽孢杆菌Y-3规模化发酵和降低成本提供理论依据。[方法]以分离的枯草芽孢杆菌Y-3为研究对象,对其生长特性、耐热性、耐酸、耐胆盐以及抗菌性进行研究。[结果]枯草芽孢杆菌Y．3培养14h生物活性量达到最高。初始pH6．3-8．0、培养温度30～37℃、装液量为20—100ml枯草芽孢杆菌Y-3均生长较好。枯草芽孢杆菌Y-3热力致死曲线线性方程为：y=-4．3365x＋435．58。分别在80、90℃热接触30s。存活率为97．45％和95．93％;在pH2—4酸性环境中作用3h后存活率超过73％;在猪胆盐浓度为0．5％以下的存活率超过80％。培养枯草芽孢杆菌Y-3产生抗菌活性效果的最佳条件为：初始pH7,温度25℃、装液量50ml,最佳试验条件下的抑菌圈为3．09cm。[结论]枯草芽孢杆菌Y-3能满足发酵饲料菌种要求。     

产蛋白酶和淀粉酶芽孢杆菌SDYB-1的分子鉴定及酶学性能研究

对筛选到的一株产蛋白酶和淀粉酶的芽孢杆菌SDYB-1进行分子鉴定和酶学性能研究。克隆了SDYB-1菌株的16S r DNA序列,该序列全长1 548 bp。BLAST显示该菌株与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)同源。以同源性为基础构建了相关属种的系统发育树,该菌株在进化关系上也与枯草芽孢杆菌聚成一族。结合形态学、生理生化特征及16S r DNA分子鉴定,将其鉴定为枯草芽孢杆菌,命名为Bacillus subtilis SDYB-1。对枯草芽孢杆菌SDYB-1产酶性能研究表明,蛋白酶活性在接种4 h后快速升高,16 h达到最高值,之后快速下降;淀粉酶活性随培养时间不断增加,至24 h达到最高值,之后快速下降。SDYB-1蛋白酶活性的最适反应温度为60℃,50℃下的稳定性较好;最适p H为8.5,p H 8.5时比较稳定。淀粉酶的最适反应温度为70℃,50℃下表现了很强的稳定性,50 min仍保持原有酶活的97%;最适p H为5.6,在p H 4.6~7.0范围内比较稳定。     

枯草芽孢杆菌发酵产物有效磷变化及常规营养成分的评定

利用产植酸酶枯草芽孢杆菌为菌种,在由棉粕90g、玉米粉10g组成的发酵底物中接种菌液7.0mL·100g-1;在温度为37℃,时间为72h,底物初水分为30%,初始pH为7.0的条件下进行发酵,评定枯草芽孢杆菌发酵产物中有效磷及常规营养成分的变化。试验发现,通过枯草芽孢杆菌发酵,棉粕源发酵饲料中有效磷含量提高45.5%,差异极显著(P<0.01),植酸磷/总磷降低13.2%,差异显著(P<0.05),植酸酶活性提高103.72U·g-1,淀粉酶提高24.43U·g-1,蛋白酶活性提高23.21U·g-1,棉粕源生物蛋白饲料的营养价值均有不同程度的提高。     

犬源芽孢杆菌分离鉴定及其耐受性的研究

芽孢杆菌作为益生菌的一种,具备维持动物肠道菌群平衡、增强动物机体免疫力、提高动物生产性能等功能。本试验应用肉汤琼脂从正常比格犬的粪便中分离纯化出菌株,进行了染色镜检、生化试验、PCR测序及耐受性试验。结果表明:革兰氏染色阳性,镜检芽孢显著,生化试验及PCR测序的结果表明此菌株为芽孢杆菌;耐热性试验结果表明,在80℃条件下芽孢杆菌仍可以生长,有很高的热稳定性;耐酸试验结果表明其对酸的耐性较强,适宜的p H值应在3~5之间;在模拟胃液和肠液中,芽孢杆菌在1.5 h后的存活率均为80%左右。综合而言,分离的犬源芽孢杆菌具备耐胃液、耐高温、耐胆盐等理化特征,该试验结果为犬源微生态制剂的研制奠定了基础。     

一株抗逆性凝结芽孢杆菌的分离与鉴定

凝结芽孢杆菌是一类能形成芽孢的乳酸菌,作为动物和人类的益生菌广泛应用。本试验从健康猪肠道分离细菌,将分离到的细菌进行形态特征观察,以及生理生化鉴定,并进行耐酸、耐胆盐、热稳定性及抑菌试验。结果表明,分离菌为乳酸凝结芽孢杆菌,具有优秀的抗逆性能,能够抵抗pH 3.0处理3h,0.3%胆盐处理8h,能够耐受100℃、30min处理,抑菌试验表明,该菌株对大肠杆菌、沙门氏菌均有较强的抑制作用。这些特征使该菌具有作为益生菌候选菌应用的潜力。     

2株枯草芽孢杆菌的分离鉴定及特性研究

【目的】寻求适合制作水产类微生态制剂的益生菌。【方法】从养鱼塘底泥和健康鲫鱼Carassius auratus肠道中分离芽孢杆菌,结合细菌形态学、生理生化特征和16S rRNA序列分析对其进行鉴定,对菌株安全性、高温耐受性、酸性耐受性、拮抗性及产酶情况等特性进行研究。【结果】分离到2株芽孢杆菌,分别命名为B1和B2,细菌形态学、生理生化特征和16S rRNA序列分析的结果显示,B1和B2均为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。特性研究结果证实B1、B2菌株都具有较好的安全性、高温耐受性和酸性耐受性,可对致病性大肠埃希菌Escherichia coli、金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophila以及温和气单胞菌A.sobria有良好的体外抑菌能力,均具有产脂肪酶、淀粉酶、蛋白酶和纤维素酶的能力。【结论】分离到2株性能优良的枯草芽孢杆菌,可将其作为水产微生态制剂的候选菌株。     

猪源枯草芽孢杆菌的分离鉴定及其特性研究

为筛选高生物活性的益生菌菌株,通过热处理从健康猪肠道内容物、粪便、土壤等来源筛选具有较高抗逆性的菌株,综合形态特征、生理生化特性及16S r DNA序列分析进行鉴定;通过耐人工胃液、耐人工肠液、耐胆盐、耐高温、产酶试验、药敏试验、抑菌试验来研究菌株的特性。综合鉴定菌株ZZS16-3为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),其在p H为2.0的人工胃液中,存活率可达到65.8%,在胆盐浓度为0.3%时存活率为51.2%,在100℃处理3 min后其存活率达到11.2%,可产生蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等,对于绝大多数的药物是敏感的,对金黄色葡萄球菌则有明显的抑菌效果。枯草芽孢杆菌ZZS16-3具有较强的抗逆性和潜在的益生性能,为研制微生态制剂提供了优良的菌种参考。     

常见几种芽孢杆菌产淀粉酶的比较

探索地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌和纳豆芽孢杆菌产生淀粉酶的能力,以筛选和研制动物微生态制剂和饲料添加剂的使用菌种。将各菌种接于淀粉酶试验培养基,培养后滴加稀碘溶液,观察透明圈,判定产酶能力。结果:地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌和纳豆芽孢杆菌都能产生淀粉酶,以蜡样芽孢杆菌产生的淀粉酶较多,认为4种常见芽孢杆菌产淀粉酶能力依次为:蜡样芽孢杆菌>纳豆芽孢杆菌>枯草芽孢杆菌>地衣芽孢杆菌。     

几种芽孢杆菌共培养对产蛋白酶的影响

[目的]为了研究芽孢杆菌的共发酵对蛋白酶产量的影响。[方法]对4株具有产蛋白酶能力的芽孢杆菌,通过菌株两两配伍发酵或三者配伍共发酵培养,分别检测单一菌株发酵产物和不同菌株共发酵产物的蛋白酶活性。[结果]枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌均具有一定的产蛋白酶能力,枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌共发酵培养48 h后蛋白酶活力有显著提高。[结论]菌株之间的科学配伍在共发酵中可以显著提高蛋白酶的活性。     

富锗酵母蛋白粉对细菌生长及部分生物学特性的影响

为了研究富锗酵母蛋白粉对细菌生长及部分生物学特性的影响,选择大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和嗜酸乳杆菌的标准菌株作为受试菌种,进行富锗酵母蛋白粉对细菌的增菌、耐盐性、酸碱耐受性、温度耐受性的影响以及其对嗜酸乳杆菌产酸和抑菌效果的影响等试验。结果表明:富锗酵母蛋白粉对嗜酸乳杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌有增菌作用,其最适作用浓度分别为1、1、4、4 mg/mL。富锗酵母蛋白粉能一定程度地提高细菌的耐酸碱能力、胆盐耐受能力及温度耐受能力,提高嗜酸乳杆菌的产酸量和其细菌素对大肠杆菌的抑菌效果。本试验为富锗酵母蛋白粉在饲料中的添加提供一定的理论基础。     

菲律宾蛤仔中一株枯草芽胞杆菌的分离鉴定及生物学特征研究

从健康菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)肝胰脏中分离纯化出一株细菌,命名为G6,通过形态学观察、生理生化特性、16S r DNA序列测定、系统发育分析等方法鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。然后对其生长曲线、耐高温、耐酸性、耐胆盐等生物学特征进行研究。结果表明,G6菌株生长期较长,在26~34 h进入稳定期,具有较强的耐高温、耐酸性、耐胆盐等特性。本研究为枯草芽孢杆菌G6菌株作为水产动物益生菌菌株的开发应用奠定了基础。     

香猪肺源性枯草芽孢杆菌的分离鉴定及体外抑菌作用

为获得猪呼吸系统的益生菌,以对疾病具有较强抗性的从江香猪为对象,从肺组织中分离到1株细菌Bp-1并对其进行形态学观察和生理生化特性鉴定,经克隆测序分析16SrDNA核苷酸序列和二级结构的相似性,利用琼脂扩散法和混菌拮抗培养法研究Bp-1对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和猪链球菌3种致病菌的抑制作用。结果表明:菌株Bp-1与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)位于同一分枝,相似性达100%;与已知枯草芽孢杆菌菌株168的16SrRNA可变区二级结构相比无明显差异,因此将Bp-1鉴定为枯草芽孢杆菌。枯草芽孢杆菌Bp-1的液体培养物对3种致病菌均有抑制作用;对大肠杆菌的拮抗作用较强,对金黄色葡萄球菌的拮抗作用较弱。枯草芽孢杆菌Bp-1可作为猪呼吸系统的益生菌对其深入研究。     

枯草芽孢杆菌DZSY21抗菌肽的提取及其应用

为了提取枯草芽孢杆菌抗菌肽以探索其对食品的防腐效果,选用枯草芽孢杆菌DZSY21、解淀粉芽孢杆菌FZB42和枯草芽孢杆菌OKB105 菌种发酵,然后将这3个菌种的发酵上清液分别与丙酮按1:2的体积比混合,旋转蒸发浓缩得到3种菌的抗菌肽粗提物。对抗菌肽的热稳定性试验可知3种菌的抗菌肽经100 ℃加热30 min后抑菌效果均有小幅度降低,但抑菌活性仍较强。抗菌肽蛋白酶稳定性试验结果显示,3种菌的抗菌肽对胰蛋白酶和木瓜蛋白酶都很敏感;应用性试验中采用牛奶、苹果、肉等作为食品模型,结果显示经枯草芽孢杆菌DZSY21抗菌肽处理后的试验组品相均明显好于对照组。表明枯草芽孢杆菌DZSY21抗菌肽具有较好的防腐效果。     

猪源乳酸芽孢杆菌的筛选与鉴定

从健康仔猪粪中分离对仔猪黄白痢有一定防治作用的产乳酸芽孢杆菌.采用普通营养培养基37℃恒温培养24 h分离,将分离到的菌进行抑菌、耐酸、耐胆盐试验,并用相差显微镜对其进行形态特征观察,以及经生理生化试验鉴定.结果表明,两菌株经抑菌试验表明对埃希氏大肠杆菌、伤寒沙门氏菌等均有较强的抑制作用,并且能够抵抗高浓度胃酸、胆盐的...     

几种常见细菌受磁场作用后的生理生化反应

本试验在100mT和500mT磁场强度下,培养大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形菌及枯草芽孢杆菌四种细菌,通过生理生化检测,表明:糖发酵试验中500mT的磁场强度下24h内培养的细菌与对照组相比显色有明显不同;甲基红试验中产气肠杆菌和枯草芽胞杆菌可由阴性转变为阳性,但枯草芽胞杆菌在48h又恢复为阴性;伏普试验中磁场对不同的菌种影响程度不同甚至相反;吲哚试验中磁场促进了阳性反应的进行.     

3种微生态制剂的氨基酸组成及对鲤鱼消化酶活性的影响*

 采用HPLC法分析了枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌和复合微生态制剂的氨基酸含量,这3种不同的微生态制剂的氨基酸含量分别为53.2g/100g干基,56.4g/100g干基,59.5g/100g干基。在统一饵料的基础上,分别按0.1%,0.2%和0.5%添加纳豆芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和复合微生态制剂养殖鲤鱼45d,分析了鲤鱼肠道和肝胰脏中蛋白酶和淀粉酶的活性。结果表明,添加纳豆芽孢杆菌0.1%~0.5%的试验组能显著地提高鲤鱼肠道蛋白酶的活性,0.1%和0.2%剂量组可显著地提高鲤鱼肝胰脏蛋白酶的活性,0.1%剂量组可较显著地提高鲤鱼肠道和肝胰脏的淀粉酶的活性。枯草芽孢杆菌对鱼类消化酶的影响作用与纳豆芽孢杆菌不尽相同,其0.1%~0.5%试验组对鲤鱼肠道蛋白酶和淀粉酶均有较显著的提高作用,但对鱼类肝胰脏的消化酶活力影响不大。相对于蛋白酶而言,枯草芽孢杆菌对鲤鱼肠道淀粉酶活力的提高更为有效。复合微生态制剂0.1%~0.5%的各试验组能显著地提高鲤鱼肠道和肝胰脏的蛋白酶和淀粉酶的活力,其对鲤鱼肠道和肝胰脏的蛋白酶和淀粉酶的活力的提高率要优于单一菌种的微生态制剂。复合微生态制剂作为水产养殖生物的饵料添加剂使用,应根据不同食性的鱼类和不同的饵料组成加以选择和组配,合理的添加量在0.1%~0.2%之间为宜。     

宋河酒曲中产淀粉酶芽孢菌的分离鉴定及产酶特性

为了有效控制宋河酒曲的制曲过程和发酵进程,对宋河酒曲中产淀粉酶芽孢菌进行了分离鉴定并研究筛选菌株的产淀粉酶特性。结果表明:从宋河酒曲中共分离到12株产淀粉酶芽孢菌,均属革兰氏阳性杆状菌,初步鉴定归为1个属5个种,即芽孢杆菌属(Bacillus)、坚硬芽孢杆菌(Bacillus firmus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium),其中,坚硬芽孢杆菌是宋河大曲产淀粉酶芽孢菌的数量优势菌群,获得1株地衣芽孢杆菌SQ2为中温型高产淀粉酶菌株,其液态发酵产酶特性为37℃培养,前24h产酶较弱,此后,酶活力迅速上升,72h达到最大值为89μg/(mL.min),产酶旺盛期发生在菌体成熟期和衰亡初期,产酶过程pH值先稍偏酸性后接近中性。