灯盏花成分专用型种源评价与鉴定

收集和鉴定了云南省和贵州省共46份灯盏花种质资源,筛选出适合生产不同药品的成分专用型种源,为专用型品种选育提供参考。利用HPLC测定了灯盏花种源10种活性成分含量,相关分析阐明各成分含量间的相关性,聚类分析对种质资源进行分类。结果表明：16份灯盏花种源灯盏乙素（scutellarin, SE）含量在2.5%以上,是培育灯盏花素专用型品种的优良材料,其中4份种源同时含有高含量（>1.0%）的双咖啡酰奎宁酸酯（dicaffeoylquinic acids, diCQAs）,是培育灯盏细辛专用型品种的优良材料;同时,筛选出8份总黄酮（total flavonoids, TFs）含量高于3.5%的种源,适合选育总黄酮专用品种。相关性分析表明,SE含量与diCQAs和TFs含量均显著正相关,是灯盏花品质育种的标志性成分。聚类分析将灯盏花种源分为三大类,除1个种源的SE含量和diCQAs含量接近（第Ⅲ类）外,其他种源SE均占总活性成分的60%以上,其中第Ⅰ类为高TFs型种源,TFs占到总活性成分的80%以上,diCQAs占总成分的15%以下;第Ⅱ类为高diCQAs型种源,diCQAs占总成分的16.9%~28.9%,TFs占到总活性成分的80%以下。该结果表明灯盏花种源活性成分组成存在多种类型,为专用型品种选育提供了可能,灯盏乙素含量可以作为专用型种源筛选的首要指标。     

野黄芩苷抗肠出血大肠杆菌感染作用

为了更好的分析野黄芩苷对肠出血性大肠杆菌(enterohemorrhage E.coli,EHEC)感染的保护作用,本研究通过原核表达,亲和层析的方法纯化志贺毒素(Stx),利用细胞表型,通过LDH方法检测野黄芩苷对Stx活性的抑制作用。32 mg/L的野黄芩苷对Stx的抑制率为67%。通过动物试验,发现野黄芩苷对Stx中毒小鼠具有显著的保护作用,其保护率为70%。本研究中,我们筛选到了一种常用的中药黄酮类化合物,野黄芩苷可显著降低stx2引起的细胞死亡,同时有效抑制肠出血。基于以上结果,野黄芩苷可以作为抗Stx的潜在化合物。     

纤维素酶法提取制备复方半边莲注射液的工艺条件

探索纤维素酶法提取制备复方半边莲注射液的最佳工艺条件,采用单因素试验和正交试验设计,运用纤维素酶法提取制备复方半边莲注射液,并以HPLC法检测指标成分野黄芩苷含量为指标.结果表明,各因素的影响次序为酶解温度、pH、酶用量、酶解时间,最佳工艺条件为酶解温度45℃,酶用量为7.2 mg/g,最适pH为5.0,酶解时间为60 min.在此条件下,复方半边莲注射液中野黄芩苷含量为2.42mg/mL,明显大于注册标准中煎煮法野黄芩苷含量1.34 mg/mL.相对原注册标准煎煮法,纤维素酶法提取制备复方半边莲注射液工艺简单可行,具有提取效率高、生产周期短等优点.     

灯盏乙素抑制热应激诱导猪肾小管上皮细胞凋亡研究

灯盏乙素(Scu)为灯盏花中提取的单一黄酮类化合物,具有清热解毒和保护细胞免受热应激损伤的作用。试验将不同浓度Suc培养的猪肾小管上皮细胞(LLC-PK1)在42℃下热应激1 h,采用RNA干扰法沉默细胞HSP72基因表达,荧光定量PCR和Western blot检测细胞热休克蛋白(HSP)70、Bcl-2、Bax、细胞色素C(Cyt-c)和caspase-3裂解。结果表明,Scu显著增加细胞Bcl-2蛋白和HSP70蛋白水平,增加Bcl-2/Bax比值,抑制Cyt-c的释放及pro-caspase-3裂解和caspase-3表达;但沉默HSP70后,细胞Cyt-c释放和caspase-3表达均显著增加。由此可知,Scu抑制LLC-PK1凋亡,保护细胞免受热应激损伤。     

灯盏花产量和灯盏乙素含量的基因型与环境效应

为了解灯盏花产量和有效成分含量的基因型与环境及其互作效应。利用通过系统选育的灯盏花新品系,进行3品系2年4点的区域试验。灯盏花3个品系产量的变异系数平均为9.68%,大于灯盏乙素含量的变异系数（5.15%）;产量的基因型效应占总效应的54.10 %,效应显著,地点间和地点×基因型间也具有一定的效应,其余效应不显著;灯盏乙素含量的基因型效应占总效应的78.28%,地点间也具有一定的效应,其余年份间、地点×年份、基因型×年份、地点×基因型×年份间的效应不显著。综上,灯盏花基因型效应显著,可以通过品种选育提高灯盏乙素含量和产量。