广东1株H3N2亚型犬流感病毒的分离与鉴定

本试验采集一只具有流感临床症状的病犬鼻咽拭子经常规处理后接种SPF鸡胚,分离到一株流感病毒,并对其进行鉴定及生物学特性研究。结果表明,该毒株对1%鸡红细胞的血凝价为26,能被H3亚型流感病毒阳性血清中和,与H1、H5、H7、H9亚型阳性血清和阴性血清无交叉反应。序列分析显示,该毒株的HA和NA基因核苷酸序列分别与犬流感病毒(CIV)H3和N2亚型的病毒株同源性最高。确定该毒株为H3N2亚型CIV,并将其命名为A/canine/Guangdong/01/2011。     

牛瘤胃造瘘术

瘤胃瘘在研究反刍动物消化代谢方面得到广泛应用，大口径牛瘤胃瘘管由硅胶材料制成，可进行瘤胃掏空等试验，近几年被广泛应用。但相关资料所介绍的手术方法手术效果不尽相同。牛瘤胃造瘘手术主要问题是解决术后不感染、密闭性好，胃瘘可以长期保留、对牛正常瘤胃功能影响小。为实现一种操作简单、护理方便、影响小、恢复快、瘘管与腹壁、皮肤结合紧密，     

螺旋藻多糖与银杏叶提取物复方对四氧嘧啶模型小鼠的降血糖作用

为研究复合螺旋藻多糖与银杏有效成分的降血糖作用,试验选用SPF级昆明种雄性小鼠,腹腔注射0.2 mL 200 mg/(kg·d)四氧嘧啶,连续5 d,断尾采血测定空腹血糖,其值大于11.1 mmol/L时表明造模成功。试验小鼠随机分为空白对照组(C组)、模型组(M组)、阳性对照组(CY组)、单一用药组(螺旋藻多糖组(P组)、银杏黄酮组(F组)、银杏内酯组(L组),复合用药组将螺旋藻多糖(PSP)与银杏叶有效成分(GBE)配制成1:1(CP_1组)、2:1(CP_2组)、1:2(CP_3组)的复合组,每组10只,共9组。对照和CY组每只小鼠灌服2.5 mg/(kg·d)格列本脲,其余各组按200 mg/(kg·d)灌服相应药物,每天1次,连续灌服30 d,测定小鼠血糖值及体重、脾脏指数、胸腺指数及肝糖原等指标。结果显示,与M组相比,用药组小鼠体重均极显著增加(P0.01),复合用药组药效高于单一用药组;各用药组脾脏、胸腺指数均极显著升高(P0.01);肝糖原含量极显著增多(P0.01);血糖值极显著下降(P0.01);其中CP_2组的小鼠血糖值降幅最大,其降糖率为52.14%;肝糖原增加为61.88%。综上所述,螺旋藻多糖和银杏叶有效成分发生了协同增效作用,对由四氧嘧啶引起的高血糖小鼠有明显的降血糖作用。     

试验用大口径牛瘤胃造瘘术

瘤胃瘘在研究反刍动物消化代谢方面得到广泛应用,大口径牛瘤胃瘘管由硅胶材料制成,可进行瘤胃掏空等试验,近几年被广泛应用.但相关文献介绍的手术方法、手术效果不尽相同.     

热应激诱导猪肾小管上皮(LLC-PK1)细胞线粒体凋亡相关因子的时效表达

拟探讨热应激诱导LLC-PK1细胞线粒体凋亡相关因子的表达和活性情况,以及激活线粒体凋亡通路的时间。采用qRT-PCR方法和Caspase活性检测试剂盒分别检测42℃热应激处理后0,2,4,8,16 h以及37℃培养的LLC-PK1细胞中HSP72、Bcl-2、Bax、AIF和Cyt.c的基因表达以及Caspase-9和Caspase-3的活性。结果显示,42℃热应激1 h,LLC-PK1细胞Bcl-2/Bax(P0.05)和AIF(P0.01)基因表达以及Caspase-3(P0.01)活性从0 h开始升高(P0.01),到2 h达到最高(P0.01);HSP72基因表达和Caspase-9活性0 h即达到最高(P0.01);Cyt.c基因表达在2 h开始极显著升高(P0.01),并且此时最高,8 h以后全部因子恢复到正常水平。结果表明,42℃热应激1 h即激活LLC-PK1细胞线粒体凋亡通路,且热应激后的0~8 h线粒体凋亡通路处于活化状态,其中2 h时最为活跃。     

光动力学作用对犬乳腺肿瘤细胞IL-6和IL-2影响的试验

用HMME-PDT作用于犬乳腺肿瘤细胞株CHMm后,台盼蓝染色绘制各组细胞的生长曲线,放射免疫法检测PDT后不同时间点检测细胞IL-6、IL-2含量的变化。台盼蓝染色PDT组与对照组比较细胞死亡率明显上升,PDT后随时间延长IL-2含量增加,IL-6含量降低。说明PDT对犬乳腺肿瘤细胞株CHMm的杀伤效应可能是由于细胞IL-6、IL-2含量的变化而引起的。     

镉中毒对小鼠肾脏损害的研究

探讨镉中毒对小鼠肾脏的损害机制。给小鼠喂饮0.01 g·L-1氯化镉水溶液,复制小鼠镉中毒模型,分别于15天,30天和45天采取肾脏和血清,肾脏进行HE染色、PASM染色和Masson染色,并检测血清中IgG, IgM,IgA含量。结果:肾小管坏死,其上皮细胞脱落,肾小球血管球基底膜出现免疫复合物沉淀,血管球系膜增厚;免疫球蛋白含量45天<30天<15天。结果表明,镉中毒小鼠肾组织广泛损伤,免疫损害是其发生机理之一。     

黄芩苷对热应激犊牛睾丸支持细胞胶质细胞源性神经生长因子(GDNF)和干细胞因子(SCF)表达的影响

黄芩苷(baicalin)具有清热镇静、抑菌抗炎等作用,通过不同浓度黄芩苷对热应激下睾丸支持细胞(sertoli cells,SCs)表达胶质细胞源性神经生长因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)和干细胞因子(stem cell factor,SCF)的影响,探讨黄芩苷是否可以通过提高SCs的耐热性保护细胞,提高SCF与GDNF的表达。采用二步酶消化法分离犊牛(Bos taurus)睾丸组织获得SCs,4 h差速贴壁纯化,分别采用RT-PCR鉴定标志性基因GDNF和SCF的表达,福尔根染色鉴定细胞形态。选用第3代对数生长期的SCs,通过噻唑蓝(methyl thiazoletetrazolium,MTT)筛选黄芩苷安全使用浓度;设对照组(37℃)、42℃单纯热应激组和42℃热应激加黄芩苷(0.1,1,10和20μg/m L)组;用MTT检测细胞存活率,提取各组细胞总RNA和总蛋白,分别用实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,q RT-PCR)和酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测GDNF和SCF m RNA及其蛋白的表达。结果显示,第3代原代细胞生长良好,RT-PCR检测可见GDNF和SCF m RNA表达,福尔根染色显示有卫星核小体存在,表明分离培养的细胞为SCs。对第3代SCs进行热应激处理,与对照组(37℃)比较,42℃单纯热应激组细胞存活率极显著(P<0.01)下降,GDNF和SCF m RNA(P<0.01)与蛋白(P<0.05)的表达也降低。与42℃单纯热应激组比较,用浓度为1μg/m L(P<0.05)和10μg/m L(P<0.01)黄芩苷作用细胞的存活率升高;浓度在0.1~20μg/m L黄芩苷作用的细胞,其GDNF和SCF m RNA的表达量均极显著(P<0.01)高于42℃单纯热应激组,而在黄芩苷浓度为1μg/m L时,SCF(P<0.01)和GDNF(P<0.05)蛋白表达量高于42℃单纯热应激组,并且基因和蛋白的表达量随着黄芩苷浓度的增加呈现先上升后下降的趋势。结果表明,黄芩苷能提高热应激下SCs的存活率以及GDNF和SCF的表达量。本实验从分子水平研究黄芩苷对SCs的抗热作用,为在实践中增强机体抗热休克能力提供了理论依据。     

牛瘤胃造瘘术

<正>瘤胃瘘在研究反刍动物消化代谢方面得到广泛应用,大口径牛瘤胃瘘管由硅胶材料制成,可进行瘤胃掏空等试验,近几年被广泛应用。但相关资料所介绍的手术方法手术效果不尽相同。牛瘤胃造瘘手术主要问题是