化学发光免疫分析技术在动物疫病检测中的应用

化学发光免疫分析(chemiluminesecence immunoassay,CLIA)是用于疫病检测的一种免疫检测技术,是基于免疫反应原理,结合化学发光检测技术而建立的。与放射免疫分析、酶免疫分析等标记免疫技术相比,具有无放射性污染、灵敏度高和特异性强的特点,已被广泛应用于疫病流行病学调查、诊断、药物分析以及微生物检测等方面。本文简要介绍了CLIA技术的基本原理及发展,从细菌、病毒和寄生虫检测方面,综述了近年来该技术在动物疫病检测中的应用,提出该技术正向高特异性、高灵敏度、高通量、快速和自动化检测的方向发展,这为今后CLIA在动物疫病检测中的应用研究提供参考。     

呋喃妥因代谢物化学发光酶联免疫检测方法的研究

对呋喃妥因代谢物1-氨基乙内酰脲(AHD)进行半抗原改造,采用活化酯法将半抗原与卵清蛋白(OVA)偶联为包被原,与标准品竞争AHD单克隆抗体的抗原结合位点,加入辣根过氧化物酶标记羊抗鼠二抗,建立了AHD间接竞争化学发光酶联免疫(CLEIA)检测法,并对化学发光液、包被原与抗体最优稀释度、包被条件、封闭液和竞争时间五项参数进行优化。结果表明:该方法具有良好的特异性,IC50为0.753 ng/m L,在鸡肉组织中的检测限为0.028μg/kg,添加回收率在80.54%~102.64%之间,变异系数均小于10%。与国标中液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)和我国出入境行业标准中酶联免疫检测法(ELISA)相比,不仅降低了检测限,而且操作简便,为动物源性食品中呋喃妥因代谢物的残留提供了准确、便捷的分析检测手段。     

儿茶素及其组合物清除自由基能力的研究

应用化学发光方法研究了4种儿茶素及其组合物对超氧阴离子自由基（O^＊2^-）和羟自由基（OH^＊）的清除能力，并对其之间的清除能力进行了比较。结果表明：EGCG、ECG、EGC和EC的O^＊2^-清除率为50％时的浓度SC50分别为4．2、4．9、5．2和6．2μmol／L，而OH^＊清除率为50％时的浓度SC50则分别为0．22、0．25、0．26和0．30μmol／L。4种儿茶素的浓度相同时，其O^＊2^-和OH^＊清除率的大小顺序为：EGCG〉ECG〉EGC〉Ec。并应用正交试验设计方法来优化4种儿茶素的组合，结果表明：清除O^＊2^-和OH^＊的最佳组合是EGCG：ECG：EGC：EC为3：3：1：1。EGCG对自由基清除率影响是最大和最显著的。在4种儿茶素的组合中，当EGCG所占的比例较大时，其组合物的自由基清除率比单体的自由基清除率要大。文中最后还模拟了不同茶叶中4种儿茶素所占的比例不同时，其清除自由基的能力的大小。本研究为利用儿茶素的不同配伍寻找一种更能发挥其药用功效的复合物提供了一条新的途经。     

化学发光免疫方法的研究进展

化学发光免疫分析方法是将化学发光和免疫融为一体,是继放射免疫分析和酶联免疫分析的一种新型免疫分析技术。化学发光免疫分析以化学发光物为指示物,通过免疫反应和发光反应,对目标物进行检测,具有高灵敏度、高特异性、简便、快速和发展迅速的特点,并逐渐运用到临床检验、药物分析、环境监测和食品安全等领域。     

适合于杀虫剂检测的新工具

正澳大利亚皇家墨尔本理工大学(RMIT)的研究人员开发出能在澳大利亚的集水处直接检测残余的杀虫剂快速的检测新工具。David Beal博士研究开发的一种手提式轻便仪器检测存在水中通常施用的杀虫药剂是作为他的哲学博士墨尔皇家技术学院应用科学研究的一部分。他开发的这种方法利用化学发光能快速检测大容量水体--是一种高度敏感的技术,能检测微量的有机化合物。"当贮有水量减少时,施用的杀虫剂浓度增加     

不同萝卜品种的抗氧化性研究

通过在碱性介质中,抗氧化性物质能强烈地抑制鲁米诺—NaClO的化学发光,利用流动注射技术,建立了一种评价不同种类萝卜总体抗氧化活性大小的方法。结果表明:在最优的条件下,萝卜的抗氧化活性能力依次为:心里美萝卜广州白萝卜普通白萝卜。     

用化学发光免疫法检测有机氯农药DDTs的残留量

建立了检测有机氯农药DDTs残留的化学发光免疫分析技术（chemiluminescence immunoassay,CLIA）,以鲁米诺和过氧化氢作为化学发光底物,测定样品中有机氯农药DDTs残留。结果表明：发光底物液非催化下,5～7 min后发光值较稳定;在发光底物液酶催化下,反应10 min接近峰值;DDTs标准曲线线性范围为0.05～25 ng/mL,标准样品DDTs浓度与发光值呈现很好的线性相关,线性方程为y=-63.806x＋13426,R2=0.9945,检测最低限为0.05 ng/mL;回收率为91.4%～107.8%。     

皱纹盘鲍血细胞活性氧产生的研究↑（*）

在体外条件下用不同刺激物(海洋酵母细胞和酵母聚糖)对皱纹盘鲍血细胞进行刺激,测定血细胞吞噬活动中经历呼吸爆发产生活性氧的化学发光反应。结果表明,皱纹盘鲍血细胞经刺激诱导吞噬活动中有明显的呼吸爆发现象和很强的活性氧产生。不同的刺激物产生的化学发光强度不同;同一种刺激物的不同处理和不同浓度对血细胞产生活性氧的化学发完强度的影响不同。刺激物经皱纹盘鲍自体血清调理和未经调理对血细胞刺激所产生的化学发光强度不同。SOD和NaN3对血细胞吞噬过程中活性氧产生的化学发光有抑制作用。皱纹盘鲍血细胞在吞噬防御反应中能够通过产生活性氧对外源病原进行杀灭。     

流动注射抑制化学发光法测定原花青素的研究

建立了测定葡萄籽提取物中原花青素的流动注射抑制化学发光分析方法。本研究是将一定量的原花青素标准液或样品液与5×10-3 mol/LH 2O 2和3×10-3mol/LKIO 4溶液混合,注入到1×10-5mol/L鲁米诺载流中,以记录到的峰高定量。在碱性条件下,原花青素对鲁米诺 H 2O 2KIO 4体系的化学发光有显著抑制作用,其抑制程度的大小与原花青素的含量成线性关系。方法的线性范围为0.420.0 μg/mL,检出限为0.05 μg/mL;RSD为1.3%。采样频率为240次/h。此法快速简便,可方便地用于葡萄籽提取物中原花青素的测定。第2期刘步明等流动注射抑制化学发光法测定原花青素的研究     

流动注射化学发光法测定秋水仙碱

甲醛存在时,高锰酸钾可在酸性介质中氧化秋水仙碱产生较强的化学发光.根据这一实验现象并结合流动注射技术,建立了一种高锰酸钾-甲醛-秋水仙碱化学发光测定秋水仙碱的分析方法.在最优化条件下,化学发光强度与秋水仙碱浓度在1.0×10-7～6.0×10-5mol/L范围内呈线性关系.方法的检出限为3.0×10-8mol/L,相对标准偏差为1.9%(c=1.0×10-6mol/L,n=11).该方法用于药物制剂中秋水仙碱含量的测定,其分析结果与药典方法比较具有很好的一致性.