新型穿膜肽介导 p53融合蛋白的表达及其免疫原性分析

目的：原核表达新型细胞穿膜肽RDP介导p53融合蛋白,并检测其免疫原性的强弱．方法：以质粒pET28a‐p53为模板扩增p53基因,并克隆至原核表达载体pET28a‐RDP中,构建重组表达质粒pET28a‐RDP‐p53,转化至大肠杆菌Rosetta ,IPTG诱导表达蛋白并纯化,SDS‐PAGE确定该蛋白准确性．同时,将昆明小鼠分为空白对照组（等容生理盐水）和RDP‐p53融合蛋白高、中、低剂量（4 mg／kg ,2 mg／kg ,1 mg／kg）组,经腹腔注射免疫,每隔2 d给药1次,30 d后眼球取血,用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清中IgG的含量．结果：双酶切及测序结果显示, p53基因已克隆入表达载体中;RDP‐p53融合蛋白在上清和沉淀中均获得表达．ELISA测定结果表明,与对照组比较,低、中剂量组小鼠血清中IgG含量没有明显升高（p＞0.05）,高剂量组显著升高（p＜0.05）．结论：成功表达并纯化RD P‐p53融合蛋白,其免疫原性较弱且与给药剂量相关,为进一步研究RD P‐p53融合蛋白对脑肿瘤的药理作用奠定基础．     

胰蛋白酶水解酪蛋白生产CPP水解工艺条件的研究

本研究利用胰蛋白解水解酪蛋白制取ＣＰＰ,通过旋转回归设计研究了底物浓度为１５％,水解１ｈ时酶－底物浓度比（〔Ｅ〕／〔Ｓ〕）,ｐＨ值和温度（Ｔ）对水解度（ＤＨ）的影响,建立了数学模型,根据Ｎ／Ｐ,ＣＰＰ得率优化水解条件为：〔Ｅ〕／〔Ｓ〕＝０．８２％,ｐＨ＝７．５,Ｔ＝４８℃,ｔ＝２ｈｒ,得出最适水解度为９．５％。     

Construction and Application of Model of Appraising Land Resources for Its Productive Potentiality in Huangyukou Small Watershed

对土地资源及其综合生产潜力的评价,在于阐明特定时空土地资源的性质、特点、生产潜力和利用价值的水平,为合理利用土地、充分挖掘生产潜力提供科学依据;对于地形起伏大、生态环境脆弱、土地类型丰富,但总体质量偏低的北京石质山区的进一步治理、规划和建设来说,显得尤为重要,亦有着鲜明的实际意义．该文在分析土地评价概念的基础上,界定了土地综合生产潜力的内涵,利用模糊数学、统计学、系统分析等手段,采用定性和定量分析相结合的方法,结合北京石质山区特定时空上土地单元的自然及社会属性,对土地综合生产潜力评价指标选取的基本条件、构建指标体系的基本原则和方法等加以探讨,提出了土地综合生产潜力评价模型,并应用于密云水库上游黄峪口小流域,得到理想效果．     

玉米花粉多糖对猪瘟免疫效果的研究

本研究采用醇沉淀法从 350 g玉米花粉提取得粗提复合物 38.3 g。经用蒽酮反应、α萘酚反应、间苯二酚反应、碘化反应及高效液相色谱法鉴定 ,证实为多糖。用上述多糖作为免疫增强剂按剂量 50、 1 0 0、2 0 0 mg分别与猪瘟弱毒细胞冻干苗共同免疫猪 ,测定其免疫效果。结果表明 ,各剂量组的 IHA抗体效价均高于对照组 ;T细胞活性 E花环试验测得各剂量的活性 E花环百分率分别为 2 1 .84 %、2 5.4 6%、2 1 .92 % ,均高于对照组 1 5.91 % ;T淋巴细胞转化试验显示 ,各试验组的 T淋巴细胞转化率分别为 55.32 %、 56.39%、54.2 7% ,均高于对照组 4 7% ,上述三种方法测定的结果均显示显著差异。对 T淋巴细胞亚群的测定结果为 ,各试验组的 CD3、CD4、CD8T淋巴细胞的测定平均值均明显高于对照组 ,但 NK细胞的变化不显著。根据试验结果选取 1 0 0 mg剂量组在两个猪场进行田间扩大试验 ,测得的 IHA抗体效价亦高于对照组。研究结果表明 ,玉米花粉多糖既可增强体液免疫 ,又能增强细胞免疫。     

Effects of various diet formulations (experimental and commercial) on the morphology of the liver and intestine of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) juveniles

The aim of the present study was to evaluate the effects of three formulated diets: wheat gluten protein‐based diets supplemented with Lys–Gly dipeptide (PP) or free lisine and glycine (AA), and a control diet without lysine supplementation (CON), two commercial starters: Aller Futura (AF), Aglo Norse (AN) and frozen Chironomidae larvae (CH) for on the growth and digestive system development of rainbow trout. The experiment lasted 28 days and survival at the end of the experiment was the highest in the group fed AF (87.9±4.2%) and the lowest in the group fed the CON diet (74.0±4.3%). Fish fed the CON diet showed a significantly lower crude protein content, and the AA group had a significantly higher lipid level (P≤0.05) in body carcass compared with the other groups. The highest density of intestinal goblet cells (P≤0.05) was observed in fish fed the CON diet, while the lowest density was seen in the distal intestine in the AF group. The hepatocyte cytoplasm of all fish stored more glycogen than lipids. These results indicate that wheat gluten protein‐based diets supplemented with dipeptide Lys–Gly (PP) or free lysine and glycine (AA) supported growth, protein efficiency rate and intestine epithelium homeostasis. On the other hand, fish fed CON (lysine‐deficient diet) showed lower survival and growth rate, and disturbances of intestine epithelium homeostasis, probably as a result of lysine deficiency.     

全基因组水平蒺藜苜蓿CPP基因家族的鉴定及表达模式分析

CPP （cysteine-rich polycomb-like protein）基因家族是一类小转录因子，广泛存在于除酵母与原核生物外的各种生物体中，在植物生长发育及响应胁迫过程中具有重要作用。截至目前，CPP基因家族已在多个物种中被鉴定和研究，但在豆科模式植物蒺藜苜蓿中还未见报道。本研究采用生物信息学的方法，在蒺藜苜蓿中共鉴定出9个CPP基因。通过与3个物种CPP基因的蛋白序列构建系统发育树，将CPP基因分为3类，MtCPP成员与大豆的亲缘关系更接近。保守结构域分析表明MtCPP转录因子都具有1~2个CXC保守结构域。染色体定位分析得出，9个CPP基因分布在6条染色体上，并鉴定出2对旁系同源基因，均来源于片段重复事件。通过基因芯片技术检测MtCPP基因的表达模式结果显示，MtCPP基因的表达具有一定的时空特异性。MtCPP基因启动子中含有大量与激素以及胁迫相关的顺式作用元件，并且MtCPP2、MtCPP5、MtCPP6和MtCPP7基因具有响应干旱的表达特征，MtCPP2和MtCPP8基因具有响应盐胁迫的功能。该研究可为后期深入解析MtCPP基因家族功能和筛选参与苜蓿抗逆的MtCPP基因奠定基础。