朱顶红叶片提取物抑菌效果的初步研究

为开发利用朱顶红提供依据,研究朱顶红叶片提取物对病原真菌的抑菌作用,以石油醚和丙酮为溶剂对朱顶红叶片中的活性物质进行索氏提取,并对其提取物进行了生物测定。结果表明,其活性物质对4种病原真菌菌丝生长都表现出抑制作用,0.06 g/mL以上浓度的抑菌效果明显。相同浓度下的孢子萌发试验结果显示:活性物质除了对枇杷叶斑病菌(Pes-tulotiopsis funerea)的抑制效果较差外,对其他3种病菌孢子的萌发抑制率均在73%以上。     

不同苗龄朱顶红生长动态的观察与研究初探

为解决朱顶红种球自产及花期调控提供参考。通过对进口朱顶红商品球和二年生播种苗进行生长动态的比较,探讨朱顶红播种苗与商品球的生长习性。开花商品球的叶面积远远大于二年生播种苗的叶面积,在4月~9月间一直在增加,9月初达到高峰。2年生的播种苗8月叶面积最大,9月淤滞持平,10月开始凋落。进口成品球叶片7月达到最多,9月开始降低。二年生播种苗的叶片8月以前一直增长,商品球和二年生播种苗最终叶片数分别为10和8。从叶片存在的时间分布来看,成品球叶片存在的时间长于二年生的叶片。朱顶红幼苗与成品球的生长发育存在一定的差别,国产杂交苗经过两年的生长就可以成为商品球。     

基于朱顶红愈伤组织途径诱导形成原球茎的研究

[目的]研究通过愈伤组织途径诱导形成朱顶红原球茎.[方法]以朱顶红(Hippeastrum vittatum)鳞茎作为外植体,通过愈伤组织途径诱导形成原球茎,并建立再生植株.[结果]诱导愈伤组织最佳培养基为MS +6-BA 2.0 mg/L+ NAA 1.0 mg/L,诱导率达到80％;诱导原球茎增殖的培养基为MS +6-BA 1.5 mg/L+ NAA 0.1 mg/L,诱导原球茎系数达到15 ～20个;诱导原球茎生长最佳培养基为1/2MS+ 6-BA 4.0 mg/L+ NAA 0.1 mg/L+ KH2PO480 mg/L+TIBA 0.5 mg/L;诱导原球茎生根培养基为1/2MS+ IBA0.5 mg/L,生根率可达100％.[结论]建立了朱顶红再生植株,实现了朱顶红快速繁殖目标,为朱顶红的种苗生产提供技术支撑.     

朱顶红幼嫩花梗胚性愈伤组织诱导和高效植株再生

为建立高效的朱顶红植株再生和种苗繁育技术体系，以幼嫩花梗为外植体开展胚性愈伤组织诱导和植株再生研究。对2,4-D和噻苯隆（TDZ）浓度、外植体发育时期及大小进行了筛选，结果表明：将切片厚度为1 mm的幼嫩花梗外植体置于添加0.5 mg ? L-1 TDZ 和2.0 mg ? L-1 2,4-D的MS固体培养基上培养8周，胚性愈伤组织诱导率最高，达85.3%。将胚性愈伤组织转移至相同的培养基上，每月继代1次，平均每月增殖10.6倍。在不含任何生长调节剂的MS培养基上，胚性愈伤组织的植株再生率达98.0%，平均每块愈伤组织可再生出12.3个小植株。经过36次（3年）继代培养后，胚性愈伤组织的增殖和植株再生效率没有显著变化。幼苗移栽至温室驯化，成活率达97.5%。再生植株移栽到田间，没有发现明显的表型变异。对随机选择的再生植株和母株进行简单序列重复区间（ISSR）扩增分析，证实再生植株没有发生DNA水平变异。     

朱顶红实时荧光定量PCR中不同组织器官内参基因的筛选

以朱顶红（Hippeastrum vittatum）不同组织器官为试验材料,通过实时荧光定量PCR技术检测肌动蛋白基因（ACT）、亲环蛋白基因（CYP）、转录延伸因子基因（EF-1α）、甘油醛–3–磷酸脱氢酶基因（GAPDH、GAPDH2）、α微管蛋白基因（TUA）和β微管蛋白基因（TUB）这7个常用的看家基因的表达水平,并利用geNorm、NormFinder和BestKeeper综合评价其表达稳定性。结果表明,EF-1α和GAPDH2的表达水平较高,而且相对稳定;其次为TUB、TUA和GAPDH。geNorm和NormFinder软件分析结果显示,在不同组织器官中CYP和GAPDH2的表达稳定性最高,其次是EF-1α;进一步分析表明,CYP的表达稳定性虽然较高,但是其表达丰度较低,故不适合作为内参基因。BestKeeper分析表明,EF-1α和GAPDH2在不同组织器官中的表达稳定性较好。综合分析表明,EF-1α和GAPDH2在所有样品中表达量较高,稳定性较好。以筛选出来的EF-1α、GAPDH2以及EF-1α + GAPDH2作为内参基因检测朱顶红花器官调控基因PI的表达水平,结果表明,以上述两个基因及其组合为内参基因得到的PI表达模式相同,而且在花器官中的表达高于茎盘和根,基本符合PI调控花模型的机理。因此,EF-1α、GAPDH2或EF-1α + GAPDH2可作为朱顶红的内参基因进行相关基因的表达调控研究。     

杂交朱顶红鳞茎不定芽诱导研究

[目的]寻求杂交朱顶红鳞茎不定芽诱导的最佳配方,以提高杂交朱顶红组培扩繁系数。[方法]以杂交朱顶红鳞茎为外植体,探讨不定芽诱导的最佳部位、最佳激素浓度,并比较不同品种的杂交朱顶红对不定芽产生的影响。[结果]朱顶红鳞茎诱导不定芽最适部位为鳞茎下部,苹果诱导频率为87．12％,杂交后代18号诱导频率为31．55％;不定芽发生最适培养基为MS＋TDZ0．5mg／L＋NAA0．1而g／L,无论是诱导频率还是每外植体诱导不定芽数均为最高,苹果诱导频率为100．0％,杂交后代18号诱导频率为70．1％;不同品种不定芽分化差异较大,杂交后代比国外引进品种更难诱导不定芽。[结论]为朱顶红的种球国产化提供了强有力的技术支持。     

朱顶红栽培技术的研究进展

朱顶红（Hippeastrum vittatum）是石蒜科孤挺花属,多年生草本植物,花朵硕大,花色多而美丽,既可作室内、庭院观赏,又可作礼品花卉,观赏价值和经济价值较高。在欧洲、日本、俄罗斯等地大受欢迎,具有极高的开发前景。目前中国还没有广泛开展针对朱顶红生产与应用方面的研究。文章介绍了朱顶红植物学特性、主要栽培品种及栽培技术与繁殖方法。     

朱顶红品种生物学指标的回归和聚类分析研究

对从国外引种的朱顶红品种的生物学指标进行了回归和聚类分析。结果显示,朱顶红的花期（y）和叶长（x）呈显著相关（R=0.512＊）（P〈0.05）,其回归方程为y=10.907-0.057x;花期与株高、叶宽、茎粗、花朵直径均没有显著性相关（P〉0.05）;花朵直径与株高、叶宽、茎粗也均没有显著性相关（P〉0.05）;根据生物学指标把20个朱顶红品种聚成3大类,并根据各类特点提出应用建议。     

朱顶红品种POD酶活性及生物指标聚类分析研究

对从国外引种的朱顶红品种的POD酶活性进行了测定。结果显示,朱顶红品种间POD酶活性有极显著性差异（P〈0.01）。对朱顶红的指标变量进行了聚类分析,结果表明这些指标可以聚为3类,聚类分析结果为朱顶红进行特征描述和评价提供参考。     

朱顶红转录组De novo数据及功能注释分析

本研究利用Illumina高通量测序技术对PP333处理的朱顶红进行了RNA-seq测序,共获得26.91 Gb的数据,对其进行过滤去冗余后得到Unigene 106 684个,总长度为92 002 803 bp,平均长度为862 bp,N50为1 494 bp,GC含量为42.47%,Q20均达98%以上,表明测序质量较好。根据七大功能数据库比对结果,分别有53 853 (NR:50.48%)、29 732 (NT:27.87%)、35 889 (SwissProt:33.64%)、42 221 (KOG:39.58%)、40 258(KEGG:37.74%)、12 186 (GO:11.42%)以及42 559 (InterPro:39.89%)个Unigene获得功能注释。根据Nr注释结果,可匹配到物种为油棕、海枣、小果野芭蕉、莲等。在KOG注释中通用功能和预测占比最高。按GO功能分类,可分为生物过程、细胞组成、分子功能三类,52个分支,大量Unigene与代谢过程、细胞过程及单生物过程相关。按照KEGG功能分类,分为6类,21个功能组,大量Unigene与代谢相关,占比60.39%。本研究结果为朱顶红的矮化机理研究及其基因挖掘提供依据。