拮抗细菌Enterobacter cloaeae B8的一株抗菌素抗性突变体(英文)

为了研究拮抗细菌Enterobacter cloacae B8在野外水稻叶面上的定殖情况及拮抗作用,由自然选择和Tn5诱变从B8产生了一株抗菌素抗性突变体BX8.BX8能在含利福平达400μg/ml或卡那霉素达300μg/ml的LB培养基中生长.实验表明该抗菌素抗性的产生没有降低BX8的拮抗活性.该抗性比较稳定,在无抗菌素培养基中培养.BX8至少分裂生长60代内抗性不变.     

包心菜无菌苗子叶及叶片原生质体高频分裂和高频植株再生

以包心菜子叶和叶片原生质体为材料。经不同液体培养基(Bp1,Bp2,B1)浅层培养,再生细胞高频分裂并形成愈伤组织。愈伤组织经扩增后转移到分化培养基上诱导植株分化,从这两种原生质体中获得了再生植株。在原生质体培养过程中,原生质体及细胞团的褐化程度与培养基中的有机成分的多少有关。原生质体的分化频率与培养基中植物激素种类关系甚大。在植株分化时,谷氨酰胺和腺嘌呤对植株分化有很大促进作用。另外,原生质体的来源及原生质体培养基对原生质体植株分化能力均有不同的影响。     

枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）S9对植物病原真菌的溶菌作用

本研究共分离了976株细菌分离物，发现来自甘蔗根围的1株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)S9对立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、终极腐霉(Pythium ultimum)和西瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.niveum)在PDA平板的对峙培养过程中不形成抑菌圈，但4d后可使上述植物病原真菌的菌丝溶解。扫描电镜观察发现S9菌株在待测的立枯丝核菌表面形成了溶菌斑。S9菌株对立枯丝核菌的作用过程是通过吸附在病原真菌的菌丝上，并随菌丝生长而生长，而后产生溶菌物质消解菌丝体。液体共培养测定也证明了S9菌株具有上述作用。本研究还发现，S9菌株对植物病原真菌的拮抗真菌绿色木霉(Trichoderma viride)、鲜红毛壳菌(Chaetomium cupreum)和球毛壳菌（Chaetomium globosum）的生长没有影响。盆栽试验证明了S9菌株可有效地控制立枯丝核菌(R．solani)引起的番茄苗期病害。S9菌株与其它拮抗真菌混合具有促进防治植物病原真菌引起的植物病害的潜力。     

植物病原真菌附着胞形成及其基因表达调节

植物病原真菌附着胞形成及其基因表达调节林福呈李德葆（浙江农业大学生物技术研究所，杭州３１００２９）ＡＰＰＲＥＳＳＯＲＩＵＭＦＯＲＭＡＴＩＯＮＢＹＰＬＡＮＴＰＡＴＨＯＧＥＮＩＣＦＵＮＧＩＡＮＤＴＨＥＲＥＧＵＬＡＴＩＯＮＯＦＧＥＮＥＥＸＰＲＥＳＳＩＯＮ...     

以冻融法快速纯化高活力基因工程Taq DNA聚合酶

用含有TaqDNA聚合酶基因的pTaq表达质粒转化E.coli DH5α菌株，IPTG诱导表达Taq DNA聚合酶，利用该酶的热稳定性，反复2次－70℃，75℃交替冻融以裂解细胞释放胞浆；以高速离心除去冻融变性的细胞碎片及核酸蛋白的复合物以达到快速纯化Taq DNA聚合酶的目的。PCR扩增反应和SDS－PAGE分析表明所制备的Tap DNA聚合酶的纯度，活力，敏感性，特异性均达到试验要求。该方法具有快速简便的优点。     

激发标签技术用于水稻功能基因组的初步研究

近年来,一种新的构建植物突变体的方法一激发标签技术(Activationtagging)已有效地用于功能基因的鉴定与克隆.此方法已在拟南芥等植物中分离了多个功能基因.该方法与其它创造突变体方法相比有以下优势:①插入位点上下游基因超表达后产生功能获得突变;②可用于QTL基因的鉴定与克隆;③T-DNA插入基因所引起的功能丧失突变;④用质粒挽救的方法直接从基因组DNA中克隆功能基因,避免了T-DNA或转座子突变分离功能基因的不便.另一方面,大部分重要的农艺性状包括抗病、抗逆、高产、优质等受QTL所控制.     

杭州郊区油青菜上一个车前草花叶病毒的分离物

1977年底,于杭州郊区四季青公社青春大队油青菜花叶病株上分离到一个病毒浓度高、传染力强的31号分离物。特别是接种大白菜,叶片上出现大块灰白色不规则坏死区。接种农特400号、黄苗榆、三生烟、三十八号烟,造成系统蚀纹斑和蚀纹点刻坏死。在心叶烟、白兰烟、曼陀罗、辣椒、豇豆上引起接种叶局部坏死斑,在苋色藜上引起局部黄斑。接种千日红,起初在接种叶上产生坏死斑。以后发展成系统花叶。不侵染番茄、四季豆。分离物稀释终点10~6—10~8,致死温度95℃,体外保毒期22个月。电镜检查为密集排列整齐的棒状粒子,制备得到具有一定效价的抗血清。因此,初步认为31号分离物为车前草花叶病毒株系之一。     

雪莲凝集素(GNA)基因的载体构建及在水稻中的整合表达

雪莲凝集素（ＧＮＡ）基因的载体构建及在水稻中的整合表达傅向东１李德葆１ＰａｕｌＣｈｒｉｓｔｏｕ２（１浙江农业大学生物技术研究所，杭州３１００２９；２ＪｏｈｎＩｎｎｅｓＣｅｎｔｒｅ，ＮｏｒｗｉｃｈＲｅｓｅａｒｃｈＰａｒｋ，ＮｏｒｗｉｃｈＮＲ４７ＵＨ，Ｕ...     

培养条件对大白菜无菌苗叶肉原生质体培养的影响

以市售栽培品种城青2号、高脚白大白菜无菌苗叶肉原生质体为材料,分别就激素、原生质体的培养密度、培养方式、多胺类物质对细胞分裂频率以及后期发育的影响进行了系统的研究.还探讨了在原生质体培养10天后加入提高了pH值的培养液来控制细胞褐化的可能性.     

TMV蚕豆株系CP基因及3′端非编码区序列分析与表达

根据烟草花叶病毒Ｕ１株系ＴＭＶ－Ｕ１序列，人工合成引物，通过ＰＣＲ扩增并克隆了烟草花叶病毒蚕豆株系（ＴＭＶ－Ｂ）的外壳蛋白（ＣＰ）基因和３′端非编码区．ＤＮＡ全序列测定结果表明，外壳蛋白基因全长４５９个碱基，编码１５１个氨基酸，３′端非编码区全长２２４个碱基．与ＴＭＶ－Ｕ１株系相比，ＴＭＶ－Ｂ仅在ＣＰ基因上有一个碱基缺失，并导致ＣＰ基因提前终止，使其编码的氨基酸少７个．将ＣＰ基因及３′端非编码区插入ｐＧＥＭＥＸ－１的Ｔ７基因１０中，转入Ｅ．ｃｏｌｉ后诱导表达，聚丙烯酰胺凝胶电泳分析呈现一特异的蛋白带．Ｗｅｓｔｅｒｎ免疫检测证明，该特异带与ＴＭＶ抗血清呈阳性反应．将ＣＰ基因正向插入植物表达载体ＰＢⅠ１２１中，置于花椰菜花叶病毒３５Ｓ启动子控制之下，获得了植物表达载体ｐＺＬ５