| TMV蚕豆株系CP基因及3′端非编码区序列分析与表达 |
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| 引用本文： | 刘勇,周雪平,李德葆,刘志敏.TMV蚕豆株系CP基因及3′端非编码区序列分析与表达[J].湖南农业大学学报(自然科学版),1997(1). |
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| 作者姓名： | 刘勇 周雪平 李德葆 刘志敏 |
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| 作者单位： | 湖南省蔬菜研究所，浙江农业大学生物技术所，湖南农业大学园艺系 |
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| 摘 要： | 根据烟草花叶病毒Ｕ１株系ＴＭＶ－Ｕ１序列，人工合成引物，通过ＰＣＲ扩增并克隆了烟草花叶病毒蚕豆株系（ＴＭＶ－Ｂ）的外壳蛋白（ＣＰ）基因和３′端非编码区．ＤＮＡ全序列测定结果表明，外壳蛋白基因全长４５９个碱基，编码１５１个氨基酸，３′端非编码区全长２２４个碱基．与ＴＭＶ－Ｕ１株系相比，ＴＭＶ－Ｂ仅在ＣＰ基因上有一个碱基缺失，并导致ＣＰ基因提前终止，使其编码的氨基酸少７个．将ＣＰ基因及３′端非编码区插入ｐＧＥＭＥＸ－１的Ｔ７基因１０中，转入Ｅ．ｃｏｌｉ后诱导表达，聚丙烯酰胺凝胶电泳分析呈现一特异的蛋白带．Ｗｅｓｔｅｒｎ免疫检测证明，该特异带与ＴＭＶ抗血清呈阳性反应．将ＣＰ基因正向插入植物表达载体ＰＢⅠ１２１中，置于花椰菜花叶病毒３５Ｓ启动子控制之下，获得了植物表达载体ｐＺＬ５
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| 关 键 词： | 遗传工程 烟草花叶病毒 序列 分析／外壳蛋白基因 3′端非编码区 表达 |
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