大豆蛋白发酵降解多肽在养殖中的应用

现代科学技术的发展。对大豆深加工以高效利用大豆蛋白资源的新产品，如膨化大豆、大豆浓缩蛋白等已经在养殖业中大量应用。大豆多肽(Soy Peptide)是大豆浓缩蛋白的酶解产物，因其产品较大豆蛋白更易消化吸收。能迅速供给机体能量。且无蛋白质变性、豆腥味等特性。作为现代     

饲料中添加不同益生菌对鸭垫料中氮、磷含量的影响

<正>以往的研究表明,益生菌能提高饲料中营养物质的利用率,并能有效减少动物排泄物中氮、磷营养物质损失及对环境的污染。本试验研究了饲料中添加4种益生菌对樱桃谷鸭垫料中氮、磷含量的影响,初步评估这4种益生菌在减少污染物排放方面的作用。1材料和方法1.1材料1.1.1菌种:农业微生物学国家重点实验室保藏的凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、丁酸梭菌     

酵母β-葡聚糖对受免异育银鲫免疫应答的增强作用

在饲料中添加定量的酵母 β -葡聚糖 ,投喂经注射接种福尔马林灭活的嗜水气单胞菌 (Aeromonashydrophila)菌苗的异育银鲫 (Carassiusauratusgibelio) 2 8d后 ,通过测定供试鱼的增重量、血清中凝集抗体效价、溶菌酶活性、谷丙转氨酶活性 (SGPT)、血清总蛋白含量、白细胞吞噬活性以及活菌攻毒后的免疫保护率 (RPS) ,探讨了酵母 β -葡聚糖对受免异育银鲫免疫应答的增强作用。结果表明 ,投喂添加 2 0 0 .0mg/ (kg·d)酵母 β -葡聚糖的饲料 ,不仅可以提高受免异育银鲫对灭活嗜水气单胞菌的免疫应答水平 ,增强抵抗嗜水气单胞菌人工感染的能力 ,而且还具有一定的促进生长和改善肝功能的作用。     

产低温脂肪酶假单胞菌的选育及产酶条件的优化

从取自华中农业大学的土样和长江流域及桂林桃花江水样中筛选到一株产低温脂肪酶的适冷菌,初步鉴定为假单胞菌,命名为Pseudomonas sp.YT34-8.对其产酶条件进行优化,得到其最佳发酵条件为:玉米浆2.00%,豆饼粉2.50%,蔗糖1.00%,橄榄油0.57%,MgSO4·7H2O0.05%,K2HPO4 0.10%,发酵温度8℃,初始pH值7.0,发酵时间48 h,250 mL摇瓶装液量21 mL;摇瓶转速182 r·min-1.在此条件下,其发酵酶活力可达到7.833 U·mL-1.对其所产低温脂肪酶进行初步研究,其最适作用pH值为8.0,最适作用温度为30℃,在pH值5.0～10.0范围内、40℃以下酶活力较稳定.     

耐胃肠道环境及肠道病原菌拮抗的猪源乳酸菌的分离与筛选

从健康猪粪便筛选分离到对肠道致病菌有较强抑制特性的3株乳酸菌,分别鉴定为屎肠球菌(Enterococcus faecium)、粪肠球菌(Enterococcus faecalis)和干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)。体外益生特性研究表明:3株乳酸菌能耐受胃肠道环境,能黏附猪小肠表面粘液,对猪源产肠毒素型大肠杆菌(Escherichia coli O139,E. coli O139)、E. coli C83905、E. coli C83524、E. coli C83529、伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium O4Hi,ST O4 Hi)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)均有较强的抑制特性。对小白鼠肠道大肠杆菌的数量进行研究,结果证明对照组大肠杆菌数量没有明显降低,而添加乳酸菌组大肠杆菌数量明显降低。对小白鼠腹腔注射E. coliC83905,乳酸菌组死亡率明显小于对照组。结果证明3株乳酸菌在猪饲料添加剂方面有较好的应用前景。     

利用PCR介导的基因置换技术构建阿维链霉菌bkdF-突变株

PCR介导的基因置换技术是一种利用λ噬菌体Red重组系统在微生物中进行基因中断的新方法。实验利用该方法快速构建基因中断载体，并成功地置换了阿维链霉菌（Streptomyces avermitilis）bkdF基因。先合成1对长度分别为58和59nt的引物，其5’端的39nt序列分别与bkdF基因两侧同源，3’端则分别与安普霉素抗性标记盒（aac（3）Ⅳ＋onT）两侧序列一致。以该引物扩增的PCR产物电转化能表达λRed重组酶且含有目标质粒的大肠杆菌（Eschcrichia．coli）菌株BW25113／pU790／pXW1224，获得了阳性重组质粒pXW1230。将该质粒中的大小为4．0kbBglⅡ目的片段插入基因置换载体pHZl35l，再接合转移至阿维链霉菌BJBM9903，筛选得到表型为Apma^RThio^S的接合子。PCR验证并对发酵产物进行HPLC和MS分析，证实该接合子为敞dkdF^-突变株。     

冰岛硫化叶菌xpb基因缺失突变体的构建及遗传学分析

为在体内研究古菌核苷酸切除修复(nucleotide excision repair,NER)机制,利用基因敲除的方法,对泉古菌核苷酸切除修复机制进行研究,构建了冰岛硫化叶菌编码真核生物NER解旋酶XPB同源蛋白的基因xpb1和xpb2单缺失突变体,从而在体内分析xpb1和xpb2基因的功能。结果表明:基因xpb1或xpb2不是冰岛硫化叶菌存活的必需基因。表型分析发现,xpb1和xpb2基因单缺失突变体相较野生型菌株REY15A,对DNA损伤试剂4-NQO 4-硝基喹啉-1-氧化物(4-nitroquinoline 1-oxide,4-NQO)分别表现出轻微敏感性和不敏感性,暗示NER解旋酶功能在冰岛硫化叶菌体内存在多重冗余。     

酿酒酵母固态发酵白酒糟生产蛋白饲料的研究

以廉价的白酒糟为主要基质,接种酿酒酵母,开展酵母高密度固体发酵的研究。最终确定了在实验室条件下以白酒糟为基质进行酵母高密度固体发酵的工艺流程为:250 ml三角瓶装入干白酒糟10 g,并补加混合营养液2 ml(以干糟质量的8%添加糖蜜,以0.5 gN/kg干糟的量添加尿素),摇匀分散,加入干糟质量4%的复合酶制剂,调整酒糟的含水量为45%~50%,按0.7亿/g干糟接种后于30℃恒温箱中发酵培养72 h,酵母总数约30亿/g干糟,烘干粉碎即可制得酵母蛋白饲料。     

发酵豆粕饲料对异育银鲫非特异性免疫功能的影响

经微生物混菌发酵的豆粕与未经发酵的豆粕依不同比例混合, 按 30 0%的比例添加在某种市售鲫鱼饲料中, 连续投喂异育银鲫 (Carassiusauratusgibelio) 30d后, 通过测定供试鱼的增重量、血清中溶菌酶活性、谷丙转氨酶活性 (SGPT)、血清总蛋白含量和白细胞吞噬活性, 比较不同添加量的发酵豆粕对异育银鲫非特异性免疫功能的影响。结果表明, 随着饲料中发酵豆粕添加量的上升, 供试异育银鲫不仅增重量有所提高, 各项非特异性免疫指标也有所改善, SGPT的活性出现下降趋势。与未经过发酵的豆粕相比, 发酵豆粕具有一定的促进生长、增强非特异性免疫功能和改善肝功能的作用。     

产角蛋白酶毕赤酵母工程菌的构建及酶学性质

将Brevibacillus brevis US575角蛋白酶基因kerUS进行密码子优化,并在毕赤酵母GS115中表达,以提高角蛋白酶产量。结果表明:优化的基因可在毕赤酵母中成功表达,重组角蛋白酶的分子质量约30 ku,最佳反应条件为pH 9.5和60℃,1 mmol/L的Mn~(2+)、Ba~(2+)对角蛋白酶活性有促进作用。此外,重组角蛋白酶易降解干酪素和β角蛋白(羽毛粉),酶促反应最大速度v_(max)=0.019 g/(L·min),K_m=4.64 g/L,比活力=440 U/mg。研究获得的产角蛋白酶重组毕赤酵母具有较好的应用前景。