产角蛋白酶毕赤酵母工程菌的构建及酶学性质 |
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引用本文: | 许佳惠,尹雅洁,李欣悦,柳 凯,梁运祥,赵述淼,胡远亮.产角蛋白酶毕赤酵母工程菌的构建及酶学性质[J].华中农业大学学报,2019,38(3):71-76. |
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作者姓名: | 许佳惠 尹雅洁 李欣悦 柳 凯 梁运祥 赵述淼 胡远亮 |
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作者单位: | 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室;湖北师范大学生命科学学院/食用野生植物保育与利用湖北省重点实验室 |
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基金项目: | 湖北省自然科学基金项目(2015CFC797);湖北省教育厅中青年人才项目(Q20162501) |
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摘 要: | 将Brevibacillus brevis US575角蛋白酶基因kerUS进行密码子优化,并在毕赤酵母GS115中表达,以提高角蛋白酶产量。结果表明:优化的基因可在毕赤酵母中成功表达,重组角蛋白酶的分子质量约30 ku,最佳反应条件为pH 9.5和60℃,1 mmol/L的Mn~(2+)、Ba~(2+)对角蛋白酶活性有促进作用。此外,重组角蛋白酶易降解干酪素和β角蛋白(羽毛粉),酶促反应最大速度v_(max)=0.019 g/(L·min),K_m=4.64 g/L,比活力=440 U/mg。研究获得的产角蛋白酶重组毕赤酵母具有较好的应用前景。
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关 键 词: | 角蛋白酶 毕赤酵母 密码子优化 重组 表达 |
收稿时间: | 2018/12/11 0:00:00 |
Construction and characterization of recombinant Pichia pastoris strain with keratinase production |
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Abstract: | |
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Keywords: | keratinase Pichia pastoris codon optimization recombinant expression |
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