蜂胶渣提取物对青枯劳尔氏菌的抑制活性鉴定

青枯劳尔氏菌(Ralstonia solanacearum)是引发桑青枯病的病原细菌。为了寻求防治桑青枯病的天然药剂,以工业提取黄酮化合物剩余的蜂胶渣为原料,经甲醇、乙醇、乙酸乙酯、氯仿及石油醚等溶剂分级浸提获得除蜡蜂胶渣提取物。通过比浊法测试不同极性溶剂提取物对青枯劳尔氏菌5个生理小种菌株均有一定的抑制作用(抑菌率8.36%~99.73%),其中乙醇提取物的抑菌活性显著高于其他溶剂的提取物(P0.05)。0.1 mg/m L除蜡蜂胶渣乙醇提取物对青枯劳尔氏菌RS-5菌株的抑制率达91.61%±4.75%,最低抑菌浓度为0.25 mg/m L,最小杀菌浓度为4 mg/m L,用扫描电子显微镜观察到部分病原细菌发生变形和细胞壁破损,用平板法监测到菌体的泳动性能受到不同程度抑制。基于负离子全扫描模式的LC-MS谱图鉴定除蜡蜂胶渣中主要含有咖啡酸及其酯类化合物(包括咖啡酸丙酯、咖啡酸丁酯、咖啡酸苯乙酯及咖啡酸戊酯),采用选择性反应监测模式外标法检测出其中所含咖啡酸和咖啡酸苯乙酯的质量比为1∶3.3。研究结果表明,除蜡蜂胶渣的乙醇提取物对青枯劳尔氏菌具有良好的抑制活性,发挥抑菌活性的主要成分可能是咖啡酸及其酯类衍生物,该提取物有进一步开发为天然来源的桑青枯病防控药剂的潜力。     

免疫乳中特异性抗体对3种细菌所致小鼠腹泻的被动免疫保护作用

以9株人肠道病原茵(大肠杆茵3株、志贺氏茵3株、沙门氏茵3株)制备的混合抗原对孕牛进行系统免疫，以获得对人致病肠道杆茵具有特异性的牛乳抗体。其免疫初乳中针对9种致病肠道杆茵的特异性IgG效价为2^11-2^12，为非免疫初乳的128-256倍；免疫常乳中针对9种致病肠道杆茵的特异性IgG效价为2^6-2^8。为非免疫常乳的16-64倍。动物实验表明，免疫初乳及效价为1：64的免疫常乳对肠产毒性大肠杆茵、鼠伤寒沙门茵、福氏志贺茵所致小鼠腹泻均有保护作用，这是由免疫乳中特异性IgG所决定的。     

针对9种常见肠道致病菌的免疫乳的研究

以9株人肠道病原菌(致病大肠杆菌3株、志贺氏菌3株、沙门氏菌3株)制备的混合抗原对孕牛进行系统免疫，以获得对人致病肠道杆菌具有特异性的牛乳抗体。对母牛进行系统免疫后，免疫乳和非免疫乳中IgG总含量没有显著变化。但经免疫处理的母牛，其初乳(产犊后24h内)中针对9种致病肠道杆菌的特异性IgG效价为2^10-2^12，而非免疫母牛为2^7-2^10，免疫处理后初乳中特异性IgG效价提高了2—9倍；经免疫处理的母牛，其常乳中针对9种致病肠道杆菌的特异性IgG效价为2^6-2^10，而非免疫母牛为2^1-2^6，免疫处理后常乳中特异性IgG效价提高了8-14倍。对免疫乳中IgG热致变性进行研究，其结果为：经60℃、10min，60℃、30min，70℃、10min，70℃、30min，80℃、10min，80℃、30min加热处理，免疫乳中IgG变性率分别为14．81％、25．20％、76．44％、85、58％、100％、100％。对免疫乳中IgG酸稳定性进行研究，其结果为：经pH2、10min，pH2、30min，pH4．5、60min，pH4．5、120min处理，免疫乳中IgG活性持留率分别为66.69％、56．55％、100％、100％。