应用酶联免疫吸附法的实验不确定度分析

酶联免疫吸附法(ELISA)是结合了抗原抗体的特异性反映和酶的高效催化显色反映而形成的一种新型检测方法，近年来在饲料理化分析中得到了广泛应用。该方法具有特异性好、灵敏度高、操作简便等优点，适合于批量样品的筛选检测，又因其所需设备少，操作简单易学，成本低廉，也很适合基层饲料检测部门使用。     

微囊藻毒素(MC-LR)ELISA检测方法的改进及误差分析

针对间接竞争ELISA检测微囊藻毒素(MC-LR)方法,利用微振荡免疫反应可缩短整个检测时间约60min.同时考察了水样中盐分、金属离子和pH值对测定结果的影响,并提出了可以利用稀释法减少甚至消除这些误差影响.     

螯合剂在ELISA检测饲料中黄曲霉毒素B_1上的应用研究

<正>在饲料生产上,以无机盐形式添加来满足畜禽的微量元素需要仍为主要手段。目前必需微量元素添加剂的不科学补充主要表现为超量添加,尤其在配合饲料中使用高铜、高锌和高铁制剂。由此带来的霉菌毒     

酪酸菌的微胶囊化研究

[目的]采用微胶囊化包埋酪酸菌,提高其作为饲料添加剂的使用效果.[方法]采用正交试验,选择不同浓度的海藻酸钠、明胶、淀粉混合物作为壁材,制备微胶囊颗粒.研究不同包埋剂颗粒内酪酸菌的生物相容性、容量、稳定性以及增殖效果,在模拟胃肠液的环境中进行耐酸性和肠溶性试验以及耐高温、胆盐试验.[结果]壁材对酪酸菌具有较好的生物相容性,增殖效果好.酪酸菌在包埋剂3内的活菌数由1.3×108CFU/mL增殖至1.3×1010CFU/mL,包埋率为83.4%;包埋剂4内的活菌数由3.3×108CFU/mL增殖至4.9×109CFU/mL,包埋率达99.5%.优选得出包埋剂4,其微胶囊颗粒的稳定性及耐热性好,微胶囊化酪酸菌经人工胃液处理2 h后,透光率仍为99.5%,后经人工肠液处理2 h,透光率降为29.7%,说明微胶囊具有较好的肠溶性.耐酸性及耐胆盐性试验结果显示,微胶囊内酪酸菌的活菌对数值分别降低了1.1%和1.5%,试验前后活菌教量差异均不显著(P＞0.05),其耐胃酸性及耐胆盐性较未包埋的对照组显著提高.[结论]酪酸菌经过包埋后显著提高了菌体的存活率,并具有良好的增殖效果及稳定性.     

微生态制剂的研究及其在水产养殖中的应用

近年来水产养殖业发展迅猛,集约化高密度养殖规模不断扩大,在一定程度上推动了社会经济的发展,然而这种为增加单位面积产量而应用的集约化高密度养殖导致养殖生态环境遭到了破坏,并且极大地增加了水产动物间病原体交叉感染的机会.为此,各类鱼病多发,甚至造成水产动物大面积死亡,养殖水体环境也随之恶化.针对鱼病的防治,传统的方法主要是大量使用抗生素和某些化学合成药物作为饲料添加剂或渔药.长期大量使用抗生素和化学合成药物,不但破坏和干扰养殖环境的正常微生物区系,导致微生物的生态失调,且导致抗生素和化学合成药物在水产品中残留量过多,通过食物链进入人体而富集,对人类健康造成潜在的危害,同时也造成我国水产品出口受阻.因此,世界各国都在积极研究抗生素等化学药品的替代品,微生态制剂具有高效、绿色和环境友好等优点,克服了应用抗生素造成的菌群失调、二重感染和耐药性菌株增加等缺点,是抗生素和某些化学药品的理想替代品.微生态制剂通过净化养殖水体、提高动物免疫力和改善养殖环境,来达到防治病害的目的,是一种新兴的技术手段,对保障水产品安全、保持水产养殖业健康和可持续发展具有重要的意义.     

螯合剂在EUSA检测饲料中黄曲霉毒素B1上的应用研究

在饲料生产上,以无机盐形式添加来满足畜禽的微量元素需要仍为主要手段.目前必需微量元素添加剂的不科学补充主要表现为超量添加,尤其在配合饲料中使用高铜、高锌和高铁制剂.由此带来的霉菌毒素检测时,样品提取液中含有大量的金属离子,高浓度的重金属盐对EUSA检测体系中的辣根过氧化物酶(HRP)造成变性,抗体效价降低甚至失活.     

有机相萃取法消除ELLSA检测AFB1假阳性的研究

近年来,饲料质量检验部门广泛采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测饲料中黄曲霉毒素B1(AFB1)(GB/T17480-1998),但由于目前的饲料产品中添加了一定量的重金属离子及其它营养增强剂,采用国标中的提取方法易出现假阳性结果.利用有机相萃取法可有效地消除假阳性.     

螯合剂对ELISA检测饲料中黄曲霉毒素B_1的应用研究

针对饲料中大量添加无机微量元素造成黄曲霉毒素B1检测结果假阳性的问题,在样品提取液中添加一定量的3种金属离子螯合剂[乙二胺四乙酸二钠(Ⅰ)、柠檬酸铵(Ⅱ)和二异丁基二硫代磷酸钾(Ⅲ)],分别讨论其对4种金属离子(Cu2+、Fe2+、Mn2+和Zn2+)的消除能力及处理后对EusA检测体系的影响.研究表明,3种螯合剂的作用离子效果依次为IⅡ>I>Ⅱ,并且3种螯合剂对ELISA测定的影响小,在(2～8)×103 mg/kg浓度下,无显著差异;3种螯合剂混合进行样品提取时,样品加标平均回收率为97.8%;使用该方法测定30份不同饲料样品,阳性率仅为6.67%.     

有机相萃取法消除ELISA检测AFB_1假阳性的研究

近年来,饲料质量检验部门广泛采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测饲料中黄曲霉毒素B_1(AFB_1)(GB/T17480—1998),但由于目前的饲料产品中添加了一定量的重金属离子及其它营养增强剂,采用国标中的提取方法易出现假阳性结果。利用有机相萃取法可有效地消除假阳性。     

玉米副产物中玉米赤霉烯酮的ELISA测定

通过试验研究了酶联免疫吸附法在玉米及其副产物中玉米赤霉烯酮检测的应用。在优化了样品前处理后,其方法灵敏度为1.0ng/ml,线性范围为0～20ng/ml,回收率为70.3%～90.9%,并用该法测定了24份玉米副产物样品,检出率达100%,阳性率为37.5%,其结果表明该方法快速、灵敏、准确,有较好的实用性。