ZD制剂对RAW264.7细胞分泌TNF-α水平及TNF-α诱导L929细胞死亡的影响

[目的]研究ZD制剂对炎症模型细胞中TNF-α含量及对TNF-α诱导小鼠成纤维细胞L929死亡的影响。[方法]通过脂多糖（LPS）刺激小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7细胞系来构建炎症细胞模型,使用5种不同浓度（100、10、1、0.1、0.01μg/m L）的ZD制剂进行试验,并用ELISA法检测ZD制剂干预前后细胞上清液中TNF-α浓度。通过TNF-α刺激小鼠成纤维细胞L929细胞系来构建细胞毒性模型,采用MTT法检测ZD制剂干预前后L929细胞活力。[结果]ZD制剂浓度为100、10、1、0.1μg/m L时,TNF-α浓度与LPS模型组相比,差异极显著（P〈0.01）;ZD制剂浓度为0.01μg/m L时,TNF-α浓度与LPS模型组相比,差异显著（P〈0.05）。经100、10μg/m L ZD制剂干预后的小鼠成纤维细胞L929细胞活力与TNF-α组相比显著提高。[结论]ZD制剂可以通过降低TNF-α的分泌量和降低TNF-α的生物学活性来达到抗炎的目的。     

ZD制剂对马肢蹄软组织损伤部位肌组织形态及VEGF和bFGF表达的影响

ZD制剂为治疗马非开放性软组织损伤的经典验方,为探索其作用机制,通过建立马前肢急性软组织损伤模型,对其进行组织形态学观察,评价ZD制剂对马急性软组织损伤的作用效果,采用免疫组织化学方法检测ZD制剂对VEGF、bFGF在肌肉中表达的影响。用20匹蒙古马随机分为4组,选取左前肢肩部臂部肌肉,制造急性软组织损伤模型。于造模前、后用取样器进行组织取样,制作成石蜡切片,观察其形态学变化,用免疫组织化学方法对阳性细胞分析VEGF、bFGF的表达。结果表明,试验药物组在损伤后的修复能力优于阳性药物组和阴性对照组。表明ZD制剂可通过促进成纤维细胞、毛细血管新生和肌细胞的生成来进行组织的修复再生,试验药物组在损伤后VEGF、bFGF的表达优于阴性对照组和阳性药物组,ZD制剂可能通过提高VEGF、bFGF的表达进行损伤的修复。     

ZD制剂对急性软组织损伤小鼠损伤处caspase-3表达的影响

为了探索ZD制剂对急性软组织损伤修复中caspase-3的表达影响,试验将360只小鼠随机分为空白对照组、阳性对照组、阴性对照组、ZD高剂量组、ZD中剂量组、ZD低剂量组,每组60只,除空白对照组外其余各组采用重物砸伤法建立急性软组织损伤模型,进行组织形态学、caspase-3活性、免疫组织化学检测,观察用药后第2小时及1,3,5,7,9,11,13,15,21天组织损伤修复的情况。结果表明:建模后除空白对照组外其余各组小鼠均出现不同程度的肌纤维断裂、肿胀、出血症状,呈现典型的急性软组织损伤的病理变化,提示建模成功;各组损伤处组织匀浆中caspase-3活性在损伤后第5天达到最大值,ZD高剂量组与阴性对照组比较,第3天差异极显著(P0.01);caspase-3大量表达于受损组织中,且ZD高剂量组在第3天、第5天和第7天均出现强阳性表达。说明ZD制剂的活血化瘀作用可能与其抑制caspase-3在损伤组织中的表达有关。     

马属动物软组织活检技术的临床研究进展

组织取样技术在医学上使用较多,无论是用于临床诊断还是科学研究。临床上用于癌症诊断、液体活检、癌症前期检查、炎症检查。实际操作中活检技术和超声配合使用,提高活组织取样技术的安全性和成功率。随着活检技术的不断改进,现探讨了活组织取样技术在马属动物的应用,介绍对肌肉、皮肤、肝脏、肾脏、蹄小叶、肺脏、脾脏、膀胱、子宫组织的取样部位、取样工具、注意事项及其并发症,以期为临床实际操作和科研试验提供指导。     

ZD制剂对马急性软组织损伤模型的作用

ZD制剂是治疗马非开放性软组织损伤的经典验方,为探索其作用机理,建立马急性软组织损伤模型,应用血清学检测、超声学方法及红外热成像技术,综合评估ZD制剂对马急性软组织损伤的治疗效果。结果表明,早期试验药物组局部温度低于阴性对照组,后期试验药物组的局部温度显著高于阴性对照组,表明ZD制剂对急性软组织损伤早期能够降低局部温度,后期能升高局部温度。ZD制剂对肌肉灰度恢复能力显著优于阳性药物组和阴性对照组,表明ZD制剂对肌肉损伤恢复有良好促进作用。ZD制剂对皮下消肿显著优于阴性对照组。     

ZD制剂对马肢蹄软组织损伤的临床疗效观察

为观察ZD制剂治疗马匹肢蹄软组织损伤的实际疗效,试验选择马匹肢蹄急性软组织损伤病例16例,随机分成两组,即治疗组和对照组,每组8例。治疗组马匹使用ZD制剂,对照组马匹给予按摩乳,药物用法用量同治疗组一样,连续治疗15 d后对马匹疼痛、肿胀和跛行等症状评分进行计算,比较和观察两组药物的疗效。结果表明:治疗后两组马匹患处压痛、肿胀、跛行评分比较差异显著(P0.05),表明两组药物均能明显缓解马匹患处压痛、肿胀和跛行情况。治疗组马匹在患处压痛缓解、肿胀消除和跛行改善三个方面的总有效率分别为100%、87.5%、87.5%,高于对照组的75.0%、62.5%、75.0%。说明ZD制剂在改善马匹急性软组织损伤引起的患处疼痛、肿胀和跛行等方面效果优于按摩乳。     

ZD制剂对小鼠巨噬细胞cAMP、cGMP、PDE含量及cAMP/cGMP的影响

ZD制剂由川椒、茵陈、白芨等12味中草药经研磨、煎煮、浓缩再配以适当佐剂制成,是治疗马属动物肢蹄软组织损伤的经典处方,具有确实的临床疗效。cAMP和cGMP是真核细胞内的炎症反应调节因子,许多致炎因子通过破坏或改变炎症细胞内cAMP/cGMP的值起到致炎或抗炎作用。此次实验,目的:探讨ZD制剂对炎症过程中巨噬细胞中cAMP、cGMP、PDE含量及cAMP/cGMP比值的影响。方法:用脂多糖(LPS)刺激RAW264.7细胞,构建炎性细胞模型。用5种不同浓度的ZD制剂进行实验。采用ELISA法检测ZD制剂干预前后细胞cAMP、cGMP及PDE的变化,并计算cAMP/cGMP比值的变化。结果:ZD制剂可抑制模型细胞中PDE的表达并提高cAMP含量及cAMP/cGMP的比值;对cGMP未见明显影响。表明ZD制剂抗炎机制与抑制PDE表达,高cAMP含量及cAMP/cGMP比值密切相关。     

中药催情散对持久黄体奶牛血清中生殖激素含量的影响

为阐明中药催情散治疗奶牛持久黄体的作用机制,通过直肠及B超检查技术将确诊的36头持久黄体奶牛分为高、中、低剂量组和对照组,试验组灌服不同剂量的催情散,对照组灌服温性自来水,连续灌服4d。统计有效率并用酶联免疫吸附法(ELISA)对用药前及用药后不同时间点试验奶牛血清中促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、雌二醇(E_2)、孕酮(P_4)的含量进行测定,并进行组间及组内比较。结果显示:高、中剂量组总有效率都为70%,低剂量组总有效率为30%,对照组总有效率为16.7%;高、中剂量组总有效率与低剂量组相比差异显著,与对照组相比差异极显著。从激素水平来看,高、中、低剂量组奶牛用药后血清中FSH、LH、E_2水平均呈现升高趋势,P4水平均呈现下降趋势,在个别时间点甚至达到极显著水平,其中高剂量组变化趋势最明显,其次为中剂量组;而对照组奶牛灌服自来水后血清中生殖激素含量在各采样点间差异不显著,但LH和E_2在用药后16~19d有小幅度的升高趋势。以上结果表明,中药催情散通过调节持久黄体奶牛血清中生殖激素水平来达到治疗目的,从4组奶牛血清中生殖激素变化水平、用药后治愈率和有效率来看,高剂量组治疗效果最佳。