间接酶联免疫吸附试验检测猪生殖与呼吸系统综合征血清抗体的研究

本研究建立了检测猪生殖与呼吸系统综合征（ＰＲＲＳ）血清抗体的间接酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ），其抗原包被浓度为２μｇ／ｍｌ，血清最适稀释度为１∶１００。试验结果表明：ＥＬＩＳＡ的敏感性高于间接免疫荧光抗体试验（ＩＦＡ），是一种切实可行的诊断方法。     

世界家禽健康状况概述(上)

在澳大利亚悉尼举行的第十届世界禽病学大会上,一些代表回顾和介绍了家禽疾病发生与防制情况,现总结如下。 自30年代以来,已消灭和控制了多种疾病。例如,许多国家通过使用好的诊断方法,配合屠宰淘汰阳性鸡的措施,使鸡白痢、鸡伤寒、禽霍乱以及鸡霉形体病得到控制。40年     

供港澳猪场乙型脑炎血清流行病学调查及与人群感染的关系

流行性乙型脑炎是一种重要的人兽共患病毒病,成年动物和人往往呈隐性感染的带毒状态。为保障供港澳生猪的生产和卫生安全,本文以血净抑制试验调查了供港澳猪场人和猪的乙型脑炎血清抗体水平。结果各场猪群抗体阳性率分别达到57%、2.5%、39%、22%和93%。其中母猪群阳性率最高为87,%仔猪41%。各猪群平均抗体水平为1:38、1:15、1:39、1:20和1:107。同时,这些猪场的饲养人员均有乙型脑炎病毒感染,抗体阳性率分别为20%、11%、3.5%和24,%抗体水平为1:22、1:109、1:16。结果提出排除一些猪场已对猪只和人员进行乙脑疫苗接种的因素,在猪场中以善通存氏乙脑流行。加强乙型脑炎免疫接种的覆盖率,猪群采用细小-乙脑二联疫苗接种,人类特别是儿童要100%免疫接种乙脑疫苗,才能避免人猪间乙脑的相互传播。     

利用重组抗原建立间接酶联免疫吸附试验检测猪传染性胃肠炎血清抗体

随着分子生物学的发展 ,重组抗原用于疾病的血清学诊断的报道越来越多 [3 ] 。周仲芳等报道了采用杆状病毒表达系统生产的TGE病毒纤突蛋白 ( S)建立了一种竞争ELISA检测猪 TGE血清抗体 ,获得了较为理想的特异性和准确性。本文报道了采用同样的重组抗原建立了一种间接 ELISA用于TGE血清抗体的检测 ,同时由于在结果判定中采用终点滴度技术 ( End- titer) ,使得检测结果的判定更直观和迅速。1　材料与方法1.1　 EL ISA操作方法　本研究中的抗原制备和包被方法见周仲芳等 ( 1997)的报道。ELISA板经抗原包被后可立即使用 ,也可保存…     

用地高辛标记的PCR－ELISA技术快速检测转基因鱼

取含有小鼠重金属螯合蛋白（mMT)基因启动子及人生长激素（hGH)基因的鱼样品，以Qiagene核酸纯化技术对鱼组织DNA进行纯化。常规PCR检测显示，mMT启动基因和hGH基因的PCR产物分别为240bp和130bp，与设计相符。PCR产物的核酸测序结果证实其扩增产物具特异性。地高辛-PCR（Dig-PCR)标记反应显示，2个基因均产生1条Dig标记的特异产物带。Dig-PCR-ELISA检测敏感性试验显示，对mMT启动子和hGH基因的检测敏感性可达10^-3，与常规PCR结合琼脂糖胶电泳检测方法相比，检测敏感性可提高至100-1000倍。试验证明，针对mMT和hGH基因所建立的Dig-PCR-ELISA技术特异可靠。     

检测猪乙型脑炎抗体胶体金免疫层析法的建立与初步应用

利用蔗糖密度梯度超速离心浓缩纯化vero细胞培养SA14-14-2株猪乙脑病毒灭活抗原,进行胶体金点样和配比优化,制备GICA试纸条.结果最优浓缩样品配比构成是PBS 1.32 mL、灭活病毒液24 mL、30％蔗糖2.6 mL、55％蔗糖6.6 mL;用于胶体金偶联的抗原浓度约2.80 mg/mL.试纸条能明显区别阴阳性血清,阳性血清稀释1∶256能显示条带,优化后灵敏度达到1∶1024.与猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、Ⅱ型圆环病毒病阳性血清不发生交叉反应.用于检测2群免疫母猪抗体阳性率分别为86％和100％,说明疫苗免疫效果较好;检测未经免疫肉猪出现阳性结果,分别达到38％和24％,说明存在病毒隐形感染.     

广州口岸进口海鱼的异尖线虫幼虫感染情况调查

本刊讯2007年9月20-22日,由我国外交部和亚洲开发银行资助,农业部国际合作与交流中心承办的中亚国家兽医人员禽流感防控技术培训班结束了在北京的首轮培训,移师青岛,在中国动物卫生与流行病学     

用固定细胞阻断酶联免疫吸附试验鉴别诊断猪传染性胃肠炎病毒和猪呼吸道冠状病毒的感染

用固定细胞阻断酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）对来自丹麦猪的１８０份血清进行了猪传染性胃肠炎病毒（ＴＧＥＶ）和猪呼吸道冠状病毒（ＰＲＣＶ）感染的鉴别诊断，共检出了ＰＲＣＶ抗体阳性血清１０７份（５９．４％），ＴＧＥＶ抗体阳性血清０份。同时也检测了一些来自国内不同ＴＧＥＶ感染类型的猪场血清。该鉴别诊断方法在我国的建立和应用为从ＰＲＣＶ阳性国家进口猪的ＴＧＥ的检疫提供了一条有效途径。     

应用荧光RT-PCR技术检测口蹄疫病毒

1　材料与方法1.1　试剂　裂解液 ,DEPC水、carrier RNA、RT-PCR反应液 ,RT- PCR酶颗粒 (Beads)、Taq酶。均由深圳匹基生物工程股份有限公司提供。1. 2　引物设计　上游引物 :5′- TCCACTAGC-GAGTGTTAGTAGC- 3′;下游引物 :5′- GCCTGT-CACCAGTGTTTGAGTA- 3′。1.3　试验材料　进口冻肉、冻猪脚、冻猪耳等。1.4　仪器　荧光 PCR仪 ,L ight cycler(Roche公司生产 )。1.5　操作方法1.5 .1　样本处理　 (1)取 n个 1.5 ml灭菌离心管 (n=样本数 + 1管阴性对照 + 1管阳性对照 ) ,作好标记。 (2 )在各离心管中加入 6 0…     

应用阻断酶联免疫吸附试验检测赤羽病血清抗体

赤羽病(Akabane disease，AKD)又名阿卡斑病，是由布尼病毒科布尼病毒属的阿卡斑病毒引起的牛、绵羊和山羊等动物的一种多型性传染病，主要以流产、早产、死胎及新生儿关节弯曲综合征和积水性综合征为特征。该病首次于1949年在日本群马县赤羽村发生因而得名。世界上很多国家，如澳大利