抗牛传染性鼻气管炎病毒囊膜gD糖蛋白的单链抗体在昆虫细胞中表达及活性检测

为了获得具有生物学活性的牛传染性鼻气管炎病毒（infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV） gD蛋白特异性单链抗体,试验采用PCR方法扩增杂交瘤细胞的cDNA单链抗体重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）基因,通过重叠延伸PCR及Linker序列获得完整的单链抗体基因,将单链抗体基因克隆至杆状病毒载体pFB-LIC-Bse中,构建重组转移载体pFB-VH-VL,将其转化至大肠杆菌DH10Bac感受态细胞中制备重组杆粒rBacmid-VH-VL,将重组杆粒rBacmid-VH-VL转染至Sf9细胞中获得携带单链抗体基因的重组杆状病毒。该重组杆状病毒在Sf9细胞中表达了分子质量约为30 ku的单链抗体蛋白。Western blotting结果显示,重组单链抗体蛋白能被His标签抗体特异性结合,也能特异性结合gD蛋白。间接免疫荧光试验结果显示,该单链抗体蛋白能够识别感染牛肾细胞MDBK中的IBRV。本研究在昆虫细胞中成功表达了具有识别IBRV的gD蛋白特异性单链抗体,为牛传染性鼻气管炎的诊断与治疗奠定了基础。     

山东省菏泽市畜禽粪污土地承载力时空特征分析

为了解菏泽市畜禽粪污土地承载力空间分布特征及近十年来的变化情况，及时调整种植业规划、合理利用畜禽粪污资源、优化畜禽养殖结构，以期为菏泽市畜牧业合理规划布局和粪污资源化利用提供科学依据，进一步推动种养结合绿色发展，选取2012～2021年菏泽市年鉴数据，依据农业农村部印发的《畜禽粪污土地承载力测定技术指南》,对植物粪污养分需求量、畜禽粪污养分供给量进行测算，从而对菏泽市畜禽粪污土地承载力指数时间和空间变化趋势进行分析。从空间上来看，虽然各县区畜禽粪污土地承载力均小于1,但畜禽粪便污染风险存在差异，其中以N为基准的畜禽粪污土地承载力指数，郓城最高为0.32,单县最低为0.17,差了将近一倍。从时间上来看，近年来植物粪污养分需求量整体表现为增长趋势，由于受到非洲猪瘟、新冠肺炎疫情以及中美贸易摩擦等国内外多重不确定性因素，养殖规模发生波动，但畜禽粪污养分供给量整体表现为下降趋势，其中以N、P为基准的养分供给量分别下降39.04%、38.89%,以N、P为基准估算的畜禽粪污土地承载力指数均呈逐年下降趋势。研究表明，各县区植物粪污养分需求量与畜禽养殖粪污供给量在一定程度上存在错位现象，应进行合理调...     

牛传染性鼻气管炎病毒致病机制研究进展

牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)主要引起牛的呼吸道、生殖道等炎症反应,也可以引起呼吸困难及流产。IBRV的致病机制尚不清楚,目前发现IBRV的非结构蛋白和结构糖蛋白与病毒毒力相关,不但影响病毒的复制及对宿主细胞的感染,同时也与病毒的免疫逃逸密切相关。除此之外,IBRV通过诱导宿主细胞凋亡造成持续性感染及激活炎症复合体诱导严重的炎症反应,造成宿主广泛病理反应的发生。因此,探索IBRV毒力蛋白结构功能、IBRV感染诱导的细胞凋亡及宿主炎性复合体激活的分子机制,将成为未来IBRV研究的热点。