猪繁殖与呼吸综合征病毒HB-3（cz）杉ORF5基因序列分析及原核表达

从河北沧州分离到1株疑似猪繁殖与呼吸综合征病毒,接种Marc-145细胞,经过4代盲传后,出现细胞病变,经鉴定为PRRSV,命名为H13-3（cz）株。根据GenBank公布的PRRSV CH—1a株ORF5基因的核苷酸序列,设计合成一对特异性引物（P1／P2）,用RT-PCR方法扩增完整ORF5基因,将扩增产物连接到pGM-T载体并转化克隆菌,阳性重组质粒进行序列测定与分析。再设计另一对引物（P3／P4）从重组载体pGM—ORF5中扩增出缺失了N端28个氨基酸残基的tGP5的编码序列tORF5,克隆入原核表达载体pGEX-6P-1,并成功获得表达,经Western-blotting分析表明,表达蛋白与阳性血清发生特异性反应。为研制PRRSV新型疫苗及诊断试剂奠定了基础。     

LRH—A对母驼排卵和受胎效果的影响

为探求LRH—A诱导双峰母驼排卵、受胎效果,应用放射免疫法测定了母驼冷冻精液输精前后外周血清孕酮含量的变化。5峰(头)输精并肌注LRH—A母驼,输精前孕酮值平均为0.15±0.02ng/ml,输精后第3天增加到0.52±0.13ng/ml,第7 天可达1.62 ±0.89ng/ml。怀孕驼第12天孕酮仍维持高水平,为1.72±0.31ng/ml;而未怀孕驼孕酮水平7天开始下降,第12天降为0.32 ±0.06ng/ml(p<0.05)。5峰母驼受胎3峰,产羔3峰。3峰仅输冷冻精液的母驼,输精前后孕酮水平显著低于肌注LRH—A母驼排卵后的孕酮水平(p<0.05),均未受胎,持续发情。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒HB-3(cz)株ORF5基因序列分析及原核表达

从河北沧州分离到1株疑似猪繁殖与呼吸综合征病毒,接种Marc-145细胞,经过4代盲传后,出现细胞病变,经鉴定为PRRSV,命名为HB-3(cz)株.根据GenBank公布的PRRSV CH-1a株ORF5基因的核苷酸序列,设计合成一对特异性引物(P1/P2),用RT-PCR方法扩增完整ORF5基因,将扩增产物连接到pGM-T载体并转化克隆菌,阳性重组质粒进行序列测定与分析.再设计另一对引物(P3/P4)从重组载体pGM-ORF5中扩增出缺失了N 端28个氨基酸残基的tGP5的编码序列tORF5,克隆入原核表达载体pGEX-6P-1,并成功获得表达,经Western-blotting分析表明,表达蛋白与阳性血清发生特异性反应.为研制PRRSV新型疫苗及诊断试剂奠定了基础.     

绵羊肺炎支原体的分离与鉴定

对疑似为患有绵羊肺炎支原体的刚死病羊无菌采取病料,经直接培养与间接培养后分离到可疑绵羊肺炎支原体。然后对培养生长的支原体分别进行形态学观察、各种生化试验、血清学试验以及药物敏感性试验,最后确诊为绵羊支原体肺炎,并分离得到绵羊肺炎支原体。