应用G3BP1稳转细胞系监测应激状态下的应激颗粒形成

哺乳动物细胞受到应激刺激后，会在细胞中形成致密的颗粒状结构，该结构被称为应激颗粒（stress granules，SG），其中G3BP1是应激颗粒重要的组成成分和标志蛋白。为了动态监测SG的形成情况，构建稳定表达GFP-G3BP1蛋白的HeLa细胞系。首先，扩增G3BP1基因，并将其克隆到慢病毒载体中，从而获得重组质粒Lenti-GFP-G3BP1，利用三质粒慢病毒包装系统包装为表达GFP-G3BP1蛋白的慢病毒颗粒，并感染HeLa细胞，通过嘌呤霉素初步筛选阳性细胞，随后，采用有限稀释法筛选出稳定表达GFP-G3BP1蛋白的HeLa单克隆细胞系，并采用Western blot和直接免疫荧光方法检测细胞系中GFP-G3BP1蛋白的表达及功能。结果发现，在荧光显微镜下可以观察到明显的G3BP1细胞质特异性荧光，Western blot结果显示GFP-G3BP1特异性条带，说明稳定表达GFP-G3BP1的HeLa细胞系构建成功。最后，作者利用亚砷酸钠/热休克/新城疫病毒处理细胞系后对GFP-G3BP1表达形态进行动态监测，证实了细胞受到刺激后，SG逐渐积累的过程。该细胞和相关动态监测方法为后续SG和新城疫病毒的相关研究奠定了基础。     

发酵酒糟对海兰褐蛋鸡生产性能、蛋品质和肠道健康的影响

试验旨在研究饲粮添加发酵酒糟对海兰褐蛋鸡生产性能、蛋品质和肠道健康的影响。600只72周龄体型相近的海兰褐蛋鸡随机分为5个处理,每个处理10个重复,每个重复12只鸡。处理一为对照组,饲喂基础饲粮,其他处理为试验组,分别饲喂在基础饲粮基础上额外添加2%、4%、6%、8%发酵酒糟的试验饲粮,试验期共8周。结果显示:添加发酵酒糟后,试验组平均产蛋率高于对照组(P0.05),料蛋比低于对照组(P0.05),蛋壳颜色值显著提高(P0.05),蛋黄颜色、蛋白高度和哈氏单位高于对照组(P0.05),血清尿酸含量显著降低(P0.05),总胆固醇和甘油三酯含量低于对照组(P0.05),空肠大肠杆菌、沙门菌含量显著降低(P0.05)。说明饲粮添加发酵酒糟能提高海兰褐蛋鸡生产性能,改善鸡蛋品质,降低脂肪沉积,并减少肠道有害菌数量。