细胞自噬对造血干细胞的影响研究进展

造血干细胞(HSC)是血液系统中的成体干细胞,具有长期自我更新的能力和分化为各类成熟血细胞的潜能。自噬是进化上保守的分解代谢过程,其中胞质成分(包括细胞器和大分子)被隔离成双膜结构并递送到内体和溶酶体,自噬的有效启动和完成对于细胞健康至关重要。随着年龄的增长,造血干细胞失去了再生血液的能力,会促进疾病的发生。越来越多的研究发现,自噬对于维持造血干细胞的特性及调节其分化过程中发挥着重要作用。论文就近年来自噬与造血干细胞之间关系的研究发现进行回顾。     

PRRSV对IFN-γ及其关键信号分子mRNA转录的影响

【目的】为探讨猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)体外感染猪肺泡巨噬细胞(PAMs)后对IFN-γ及其关键信号分子IRF3和IRF7 m RNA转录的影响。【方法】从健康仔猪肺脏中无菌分离PAMs,分为对照组和PRRSV组,于PRRSV感染后的6、12、24、48和60 h收集各组PAMs及其上清液,应用ELISA检测细胞培养上清液中IFN-γ的质量浓度和荧光定量PCR检测不同组中PRRSV、IFN-γ、IRF3和IRF7的m RNA转录情况。【结果】PRRSV组IFN-γ的质量浓度与正常对照组相比无显著性差异;与对照组相比,PRRSV组IFN-γm RNA转录量在24 h和48 h显著升高(P0.01)、48h后降低,IRF3(P0.05)和IRF7(P0.01)m RNA转录水平在60 h显著降低。【结论】PRRSV感染PAMs过程中对IFN-γm RNA的转录呈现先抑制再激活后抑制的现象,在一定程度上是通过调控IRF3和IRF7的转录水平来实现的。     

犬细小病毒昆明流行株的分离鉴定与VP2基因序列分析

为了解昆明市犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)流行及抗原变异情况,有针对性地筛选疫苗及研发新疫苗,本研究从昆明市部分宠物医院收集6份疑似CPV粪便样品进行病毒分离培养,对获得的疑似病毒液进行PCR、免疫荧光试验(IFA)、血凝效价测定、TCID50测定及VP2基因序列分析。结果显示,分离的1株病毒能使F81猫肾细胞产生明显的细胞病变(CPE),PCR扩增产物大小为164bp,IFA鉴定感染的F81细胞出现绿色荧光,血凝效价为1∶512,病毒TCID50为10-4.375/0.1mL,VP2基因PCR扩增条带大小为1 755bp。对分离株VP2结构蛋白进行测序分析,判定该分离株为CPV-2a亚型,与标准毒株存在5个变异氨基酸位点,属于变异株。将测序结果与商品化疫苗株及国内参考株序列进行比对分析,结果显示与弱毒苗Intervet/vaccine/06和Pfizer/vaccine/06核苷酸同源性均为98.7%;与国内参考毒株序列同源性为98.2%～99.5%,与ANTU-1和WH02/06株同源性最高;与ANTU-1株、WH02/06株及BJ01株亲缘关系最近,位于进化树的同一簇。本研究对监测CPV的遗传变异趋势及疫苗的研制具有重要意义。     

同源异体骨髓间充质干细胞移植治疗犬急性肝功能损伤

探讨同源异体骨髓间充质干细胞(BMMSCs)移植对犬急性肝功能损伤的治疗作用,为犬干细胞治疗相关疾病提供理论基础和技术支持。对患急性肝损伤的10只病犬经超声引导腹腔内肝门附近移植BMMSCs,移植后检测血常规、肝功能和肝脏B超,观察同期的症状体征和不良反应情况。结果显示,干细胞移植7天后可使患犬各项肝功能指标明显改善,10d后B超结果显示肝组织回声均匀,无明显异常,14d后患犬的精神、体力、食欲明显好转,干细胞移植21d后血常规各项指标恢复正常,患犬基本康复,移植干细胞的患犬均未发现有不良反应。说明相对于常规治疗,犬BMMSCs同源异体移植治疗急性肝损伤可明显缩短治疗时间,显著提高患犬生活质量。     

干细胞分泌因子对皮肤创伤犬的治疗作用

探讨干细胞分泌因子对犬皮肤创伤的治疗作用,建立犬皮肤损伤模型,观察其治疗犬皮肤创伤的临床效果。将皮肤创面为30mm×30mm的9只损伤模型幼犬,随机分为3组,分别为骨髓间充质干细胞分泌因子(BMSCF)治疗组、常规治疗组和对照组,取BMSCF加于皮肤损伤的犬创面,以平均愈合时间、愈合残留面积为指标,观察各组动物损伤皮肤的修复情况。结果显示,BMSCF治疗组皮肤平均修复时间为27.66d±0.87d,愈合残留面积分别为(8.043±0.124)cm~2/10d、(3.317±0.105)cm~2/20d、0cm~2/30d,相对于其他两组治疗时间明显缩短,创面愈合效果好(P0.05)。皮肤组织切片结果显示,BMSCF治疗组皮肤组织结构愈合完整、快速、瘢痕面积小。结果表明相对于常规治疗,干细胞分泌因子对犬创面愈合治疗效果显著、疗程短,通过干细胞分泌因子治疗临床上犬难愈性创面是一种切实可行的新途径。     

犬细小病毒昆明流行株的分离鉴定与VP2基因序列分析

为了解昆明市犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)流行及抗原变异情况,有针对性地筛选疫苗及研发新疫苗,本研究从昆明市部分宠物医院收集6份疑似CPV粪便样品进行病毒分离培养,对获得的疑似病毒液进行PCR、免疫荧光试验(IFA)、血凝效价测定、TCID50测定及VP2基因序列分析。结果显示,分离的1株病毒能使F81猫肾细胞产生明显的细胞病变(CPE),PCR扩增产物大小为164bp,IFA鉴定感染的F81细胞出现绿色荧光,血凝效价为1∶512,病毒TCID50为10-4.375/0.1mL,VP2基因PCR扩增条带大小为1 755bp。对分离株VP2结构蛋白进行测序分析,判定该分离株为CPV-2a亚型,与标准毒株存在5个变异氨基酸位点,属于变异株。将测序结果与商品化疫苗株及国内参考株序列进行比对分析,结果显示与弱毒苗Intervet/vaccine/06和Pfizer/vaccine/06核苷酸同源性均为98.7%;与国内参考毒株序列同源性为98.2%～99.5%,与ANTU-1和WH02/06株同源性最高;与ANTU-1株、WH02/06株及BJ01株亲缘关系最近,位于进化树的同一簇。本研究对监测CPV的遗传变异趋势及疫苗的研制具有重要意义。