荧光定量PCR方法检测禽白血病病毒的研究

根据禽白血病病毒各亚群pol基因序列相对保守的特点,在其保守区内设计了1对引物,进行RT-PCR反应,扩增产物为214 bp,将该产物连接T载体作为Real-time PCR反应的标准品,利用SYBR Green I染料进行Real-time PCR反应,建立了标准曲线,并进行反应灵敏性、特异性和重复性试验。试验结果表明：标准曲线线性关系R值均为0.999以上,检测极限约为8.21E＋01拷贝数质粒DNA,比RT-PCR灵敏100倍以上;特异性分析表明只有禽白血病病毒能检测到特异性的熔解度峰值;批内和批间重复性试验的变异系数均小于5%;用已建立的方法对人工感染SPF鸡的不同组织进行3次重复检测,病毒RNA的检出率为100%。以上结果表明：该方法稳定可靠,为禽白血病的早期诊断建立了特异、灵敏和快捷的方法。     

浅议数控铣床刀具半径补偿

本文阐述了刀具半径补偿的作用和意义、刀具半径补偿的建立过程及使用时的注意事项，并结合具体案例提出如何正确编制加工程序。     

基于“PBL教学方法”的数控加工实训教学设计

本文应用职业教育课程改革中应用广泛的“PBL教学法”对数控操作中级工实训这门课程进行了教学设计，并以其中一个教学模块进行了单元设计作为示例。     

基于“PBL教学方法“的数控加工实训教学设计

本文应用职业教育课程改革中应用广泛的"PBL教学法"对数控操作中级工实训这门课程进行了教学设计,并以其中一个教学模块进行了单元设计作为示例.     

禽多杀性巴氏杆菌PCR诊断方法的建立

随着现代分子生物学和生物信息学的发展,PCR技术已经在病原检测方面得到了广泛的应用.试验旨在利用PCR技术建立一种禽巴氏杆菌病原的快速、特异性强的检测方法.     

优质中熟中粳新品种润稻118的选育及高产栽培技术

润稻118是于2015年选育而成的优质中熟中粳新品种,2016～2017年参加中种公司科企水稻联合体试验,2017年同步生产试验,2018年完成审定试验审定程序后正式定名润稻118,该品种具有产量高、抗性好、灌浆速度快、米质优良等特性,适宜在沿淮及淮北等地区种植。主要介绍了该品种的特征特性、试验及示范种植情况,阐述了该品种高产栽培技术要点,为其大面积推广提供参考。     

CNC雕刻机故障诊断及维修

本文对常见的CNC雕刻机故障现象、产生的原因进行了统计并进行了分析,主要包括机械故障和电气故障,并提出了正确的解决方案.     

CNC雕刻机故障诊断及维修

本文对常见的CNC雕刻机故障现象、产生的原因进行了统计并进行了分析,主要包括机械故障和电气故障,并提出了正确的解决方案。     

靶向Pol基因siRNA抑制J亚型禽白血病病毒复制的研究

为筛选能够有效抑制J亚型禽白血病病毒(ALV-J)复制的siRNA,本研究根据ALV的pol基因保守序列设计合成5对shRNA序列,并将其分别克隆至pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR载体中,构建siRNA表达重组质粒,分别为pcDNA-sh-po1711、pcDNA-sh-po1814、pcDNA-sh-po11016、pcDNA-sh-po11915和pcDNA-sh-po12516.将重组质粒分别转染DF-1细胞6 h后,以100TCID50的ALV-J感染细胞,并利用IFA、western blot和real-timePCR方法评价其对ALV-J复制的抑制效果.IFA和western blot检测结果表明:其中pcDNA-sh-po1711、pcDNA-sh-po1814和pcDNA-sh-po12516可以有效抑制病毒囊膜蛋白的表达.Real-time PCR结果显示:与阴性对照和空载体对照相比,这3种siRNA在mRNA水平对ALV-J的抑制率达29%～86%.本研究在细胞水平上筛选的siRNAs可作为候选siRNAs,为抗鸡ALV-J的研究奠定基础.