H3N2犬流感病毒M1蛋白的原核表达及鉴定

为制备犬流感病毒(H3N2) M1蛋白纯品,针对M1基因序列设计引物,用聚合酶链式反应(PCR)扩增目的基因片段,扩增产物克隆至表达载体pET-SUMO中并转化至宿主菌BL21(DE3),诱导表达目的蛋白,探索纯化工艺,制备目的蛋白,并用Western blot检测纯化的M1目的蛋白。通过PCR成功扩增出大小为771 bp的M1基因,成功构建p ET-SUMO-M1表达载体,表达的融合蛋白相对分子量为41 kD,主要以可溶形式表达,纯化后获得蛋白纯品,Western blot检测显示用M1蛋白(28 k D)免疫小鼠制备的多抗能与制备的蛋白纯品发生特异性反应,从而证明蛋白纯品为M1目的蛋白。试验制备出的M1蛋白纯品可为进一步制备通用型抗犬流感病毒抗体提供纯品抗原。     

加大森林资源保护 促进林业快速发展

森林资源保护工作要按照发展要有新思路、改革要有新突破、开放要有新局面、各项工作要有新举措的要求，紧紧围绕林业生态建设这个中心，从而实现林业跨越式发展。     

绿脓杆菌外毒素A与人组蛋白H4嵌合蛋白基因克隆及其原核表达载体的构建

设计引物以pCDPT2质粒(含PEA全序列)为模板亚克隆获得PEA功能区Ⅰa及功能区Ⅱ基因片段(1100 bp); 提取人染色体DNA作为模板,利用一对设计引物扩增获得了人组蛋白H4基因片段(316 bp);将两基因片段连接,构建了融合基因中间载体pMD-18T-PEA-H4;融合基因经NcoⅠ及XhoⅠ酶切,以正确阅读框架插入相同酶切的pET-28A中,经酶切分析及PCR扩增检测,筛选到阳性克隆,其质粒测序结果表明成功地构建了毒性基因缺失的PEA与人组蛋白H4融合基因的原核表达载体,为进一步表达并获得大量的融合蛋白奠定了基础。     

木材生产管理信息系统设计

介绍了通过信息化管理手段,对采伐、打枝、造材、集材、清林、归楞、装车等木材生产环节进行管理,控制木材流失的科学有效方法,以及3S技术、数据库技术在木材生产管理信息系统中的应用情况。     

草莓连作问题及解决途径

草莓也象其它作物一样,若在同一场所连续多年栽培,不仅产量明显下降,而且品质也会大大降低。所以,草莓也该进行合理轮作,而多年连作发生的问题很多。最主要的就是病害问题。连作田的土壤传染性病害以及与其有关的病害较为严重,相反,对其没有不良影响的细菌和放线荫等数量却明显降低,造成土壤中微生物各相的不平衡。影响草莓正常生长和发育。据日本材料     

木材生产管理信息系统设计

介绍了通过信息化管理手段,对采伐、打枝、造材、集材、清林、归楞、装车等木材生产环节进行管理,控制木材流失的科学有效方法,以及3S 技术、数据库技术在木材生产管理信息系统中的应用情况。     

根据新梢皮层内花色素含量鉴定苹果树的抗寒性

目前,在鉴定果树抗寒性时,为了提高育种过程的效率,广泛采用在实验室致冷间内直接冷冻的方法。为此目的,已研制出根据生物物理学和生物化学指标预测果树抗寒性的间接方法。植物在抗寒锻炼期间对低温的反应,可以作为制定这些方法的基础。     

朊病毒及生态学意义

朊病毒(Prion)是1982年美国生理学家Prusiner及其同事在大量实验的基础上,突破经典病毒学理论而提出的〔1〕,认为绵羊瘙痒病的病原体是一种尚未证实有核酸结构的蛋白质侵染颗粒,将其称为朊病毒蛋白(Prion),简称PrP,其传染性高,抵抗力强,可引起人和动物的传染性神经退行性疾病(T     

玉米机械化栽培增产技术的推广应用

在分析玉米机械化栽培增产技术优势的基础上，介绍此项技术的实施要点及应采取的推广方式，以玉米人工栽培技术为对照，计算此项技术产生的经济效益，为实现玉米生产节本增效提供技术参考。     

白喉毒素DAB_(389)-αMSH重组毒素的构建及表达

利用含有白喉毒素N端序列的基因作上游引物、含有αMSH全序列作下游引物,以pET28a/DAB389-EGF为模板,PCR扩增DAB389-αMSH基因片段,用限制性内切酶EcoR I和NcoI酶切,并插入原核表达载体pET28a的相应位点,构建了重组表达载体pET28a/DAB389-αMSH,在大肠杆菌中表达重组融合蛋白DAB389-αMSH,转化菌经1 mmol/L IPTG、30℃诱导5 h,用SDS-PAGE和Western blot鉴定表达的重组毒素。结果表明扩增的片段与理论值一致,重组质粒的DNA序列分析正确;SDS-PAGE表明重组毒素相对分子量为43.76 KD,且表达量达菌体总蛋白量的31.6%。Western blot分析显示,重组毒素能特异性地与抗白喉抗体结合,表明已成功构建表达了重组DAB389-αMSH的工程菌株,并获得表达蛋白。