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为制备犬流感病毒(H3N2) M1蛋白纯品,针对M1基因序列设计引物,用聚合酶链式反应(PCR)扩增目的基因片段,扩增产物克隆至表达载体pET-SUMO中并转化至宿主菌BL21(DE3),诱导表达目的蛋白,探索纯化工艺,制备目的蛋白,并用Western blot检测纯化的M1目的蛋白。通过PCR成功扩增出大小为771 bp的M1基因,成功构建p ET-SUMO-M1表达载体,表达的融合蛋白相对分子量为41 kD,主要以可溶形式表达,纯化后获得蛋白纯品,Western blot检测显示用M1蛋白(28 k D)免疫小鼠制备的多抗能与制备的蛋白纯品发生特异性反应,从而证明蛋白纯品为M1目的蛋白。试验制备出的M1蛋白纯品可为进一步制备通用型抗犬流感病毒抗体提供纯品抗原。 相似文献
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对妊娠中、晚期玩赏母犬的流产病进行治疗试验 ,结果表明 ,出现流产征兆的 6只母犬 ,均按预产期产仔。共产仔 2 1只 ,除其中 1只于生后第 3d死亡外 ,其余全部成活 相似文献
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本试验探索了使用ELISA诊断牛东毕吸虫病的方法,并对78份阴性血清,55份阳性血清进行了检测。试验结果表明,阳性符合率达93.7%,阴性符合率达98.4%。与IHA等方法的比较表明,ELISA检出率最高. 相似文献
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东北大豆蛋白质与含硫氨基酸的含量及其相关分析 总被引:1,自引:0,他引:1
研究结果表明:东北地区大豆资源的蛋白质和含硫氨基酸含量都比较高,变异水平也比较高,胱氨酸和蛋氨酸的变异系数分别为10.04%和9.05%,大于其它地区的大豆资源,本地区拥有高蛋白和高含硫氨基酸含量的种质,吉林省的资源尤占优势。蛋白质与含硫氨基酸含量呈极显著负相关,r=-0.3112;胱氨酸、蛋氨酸及两者含量总和之间均为极显著正相关r=0.8161、0.4568和0.8869。大豆蛋白质和含硫氨基酸同步提高的品质育种难度颇大,但从筛选二者高含量的种质入手,通过育种程序,逐步提高含量改进品质的可能性较大。 相似文献
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利用含有白喉毒素N端序列的基因作上游引物、含有αMSH全序列作下游引物,以pET28a/DAB389-EGF为模板,PCR扩增DAB389-αMSH基因片段,用限制性内切酶EcoR I和NcoI酶切,并插入原核表达载体pET28a的相应位点,构建了重组表达载体pET28a/DAB389-αMSH,在大肠杆菌中表达重组融合蛋白DAB389-αMSH,转化菌经1 mmol/L IPTG、30℃诱导5 h,用SDS-PAGE和Western blot鉴定表达的重组毒素。结果表明扩增的片段与理论值一致,重组质粒的DNA序列分析正确;SDS-PAGE表明重组毒素相对分子量为43.76 KD,且表达量达菌体总蛋白量的31.6%。Western blot分析显示,重组毒素能特异性地与抗白喉抗体结合,表明已成功构建表达了重组DAB389-αMSH的工程菌株,并获得表达蛋白。 相似文献
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摘要:利用含有白喉毒素N端序列的基因作上游引物、含有aMSH全序列作下游引物,以pET28a/DAB389-EGF为模板,PCR扩增DAB389-aMSH基因片段,用限制性内切酶EcoR I和Nco I酶切,并插入原核表达载体pET28a的相应位点,构建了重组表达载体pET28a/DAB389-aMSH,在大肠杆菌中表达重组融合蛋白DAB389 -aMSH,转化菌经1mmol/L IPTG、30C诱导5h,用SDS-PAGE 和Western blot 鉴定表达的重组毒素质。结果表明扩增的片段与理论值一致。重组质粒的DNA序列分析正确。SDS-PAGE表明,重组毒素相对分子量为43.76KD,且表达量达菌体总蛋白量的31.6%左右。Western blot分析显示,重组毒素能特异性地与抗白喉抗体结合,表明已成功构建表达了重组DAB389-aMSH的工程菌株,表达产物具有生物学活性。 相似文献