梅花鹿的同期发情技术

于2000年9月9日，在吉林松花湖鹿场对30头东北梅花鹿分两试验群进行了同期发情试验，两试验群分别采用不同的试验药物进行处理，第一试验群（共14头）采用了18甲基炔诺酮埋植并配合PMSG、HCG和些二醇的处理方法，其中18甲基炔诺酮采用了高（80mg/头）和低（60mg/头）两剂量进行了对比试验；第二试验群（共16头）采用了PG两次处理同时配合PMSG和HCG的处理方法，其中PG也采用高（600μg/头），低（500μg/头）两剂量进行对比试验，通过试验，第一试验群中；18甲基炔诺酮高，低两剂量组的同期发情率分别为57.14%和0,其中18甲基炔诺酮高剂量组的双仔率为42.86%，产仔时间也较上一年有明显的缩短，平均缩短天数为23d,第二试验群中；PG高，低两剂量组的第一情期同期发情率分别为25%和14.2%，PG低剂量组产仔时间也比上一年缩短了21d。本次试验的两试验群的受胎率均为100%，表明同期发情试验所用药物对受胎无不良影响。     

表达猪细小病毒VP2蛋白的重组干酪乳杆菌诱导小鼠产生特异性抗体

 【目的】研究以干酪乳杆菌作为传递抗原活载体表达猪细小病毒主要免疫保护性抗原VP2蛋白的免疫特性。【方法】将构建的重组猪细小病毒（PPV）VP2基因的细胞表面表达型载体pPG-VP2电转化干酪乳杆菌L.casei 393,获得阳性重组菌pPG-VP2/L.casei 393。重组菌以2%乳糖为诱导物,在MRS培养基中进行诱导,经SDS-PAGE、Western blot及间接免疫荧光分析,目的蛋白获得表达。将重组菌及空质粒菌株分别口服接种Balb/c小鼠,收集粪便及肠黏液样品测定小鼠产生抗VP2的特异性sIgA,采集血液样品测定小鼠产生抗VP2的特异性IgG,并对获得的抗体进行PPV中和活性的测定。【结果】重组干酪乳杆菌pPG-VP2/L.casei393免疫小鼠能够产生明显的抗PPV的sIgA和IgG抗体水平,其对PPV的中和效价分别为1﹕24和1﹕128。【结论】为PPV重组乳酸菌口服疫苗的研制提供了重要的物质基础。     

志贺氏菌属环介导恒温扩增快速检测方法的建立及初步应用

为建立快速检测志贺氏菌属的方法,本研究针对其ipaH基因,建立了志贺氏菌属环介导恒温护增(LAMP)快速检测方法。利用该方法对50株细菌进行检测,结果显示7株志贺氏菌均为阳性,其它菌均为阴性,表明该方法具有高度特异性。灵敏度试验显示,对志贺氏菌纯培养菌的检测灵敏度为28cfu/mL,对污染食品中志贺氏菌的检测灵敏度为35cfu/mL。利用该方法对195份涉及肉类、奶类、豆制品及人工污染样品进行检测,共检出29份阳性样品,与细菌分离鉴定检测结果一致。该LAMP方法操作简便、特异性强、灵敏度高且成本低廉,具有良好的应用前景。     

梅花鹿血液中卵磷脂含量的高效液相色谱法测定研究

研究建立了梅花鹿血液中卵磷脂含量测定的高效液相色谱法。对采集的梅花鹿血液,经3000r/min离心获得血清,血清通过0.45μm的微孔滤膜过滤后进样测定。色谱柱为C18柱(150mm×4.6mm),流动相为甲醇∶乙腈(50∶50),流速为2.0mL/min,紫外检测波长为206nm。结果表明:本方法在浓度为0~159.84μg/mL的浓度范围内峰面积与浓度呈线性相关,r=0.9997,变异系数RSD为0.66%,平均回收率为96.45%,该方法经济、简便、快速、灵敏度高、重现性好,适用于梅花鹿血液中卵磷脂的血药浓度检测。     

肌肉生长抑制素基因在畜禽肌肉发育调控中的研究进展

肌肉生长抑制素(Myostatin)是主要在骨骼肌中特异性表达的肌肉发育负调控因子,和畜禽的生产性能密切相关.本文综述了Myostadn在畜禽肌肉发育调控中的研究进展,并对其应用前景进行了展望和讨论.     

不同饲养时期雄性梅花鹿血中尿嘧啶和次黄嘌呤含量的HPLC分析

采集梅花鹿不同饲养时期的血液,经离心、过微孔滤膜后上HPLC柱,测定尿嘧啶和次黄嘌呤的含量。结果发现,用HPLC测定尿嘧啶线性方程为Y=6478．2x-75．5,r=0．99996;次黄嘌呤线性方程为Y=4372．36x-0．74,r=0．9981;分别计算出待测样品中尿嘧啶、次黄嘌呤的含量。经统计学分析发现,梅花鹿血液中尿嘧啶含量在生茸期和配种期差异不显著,恢复期和生茸前期差异不显著;而生茸期、配种期和恢复期、生茸前期之间具有显著性差异;而不同饲养时期次黄嘌呤含量不存在差异性。     

基于DNA环介导等温扩增技术快速检测溶藻弧菌的研究

溶藻弧菌是引起海产鱼类、虾、贝等细菌性疾病的主要病原之一,严重危害水产养殖业的发展,建立快速、准确的检测方法对防控溶藻弧菌及保障水产养殖安全具有重要意义。本研究引入环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)技术,以溶藻弧菌胶原酶基因为靶基因,建立了溶藻弧菌LAMP快速检测方法,45~60 min内即可完成检测。试验结果显示,该LAMP方法可特异性检测溶藻弧菌,且灵敏度高,对纯培养溶藻弧菌的检测灵敏度约10 CFU/mL,对污染水产品中溶藻弧菌的检测灵敏度为19 CFU/mL。本研究建立的溶藻弧菌LAMP检测方法操作简便、检测快速,具有良好的实用性。     

动物医学专业基础课实验教学体系的改革与实践

针对动物医学专业基础课,对实验教学体系的改革模式进行了构建与实施。在新的实验教学体系中,综合设计性实验,特别是多门课程综合交叉和学生自主设计的实验环节对培养大学生的创新能力具有重要的实践意义。     

不同饲养时期雄性梅花鹿血液中抗衰老活性物质的HPLC分析

采集雄性梅花鹿不同饲养时期的血液,经离心过微孔滤膜后上HPLC柱,测定卵磷脂、尿嘧啶和次黄嘌呤的含量.结果发现,用HPLC测定梅花鹿血液卵磷脂的回归方程和相关系数分别为y=501.114 3+470.550 2x,r=0.999 7;测定尿嘧啶线性方程为y=6 478.2x-75.5,r=0.999 96;测定次黄嘌呤线性方程y=4 372.36x-0.74,r=0.998 1.雄性梅花鹿不同饲养时期血液中卵磷脂的含量测定结果显示:生茸期最高,其次是生茸前期,两者差异不显著;第三是恢复期,最少的是配种期,与生茸期和生茸前期差异极显著.而梅花鹿血液中尿嘧啶含量在生茸期和配种期差异不显著,恢复期和生茸前期差异不显著;生茸期、配种期和恢复期、生茸前期之间具有显著性差异;而不同饲养时期次黄嘌呤含量不存在差异性.结果表明,尿嘧啶的变化与机体代谢活跃与否有相关性,配种期雄性鹿血中的卵磷脂含量减少,会影响到鹿血的药用价值,特别是抗衰老功效.     

分泌型和非分泌型表达猪细小病毒VP2蛋白的重组乳酸菌经口免疫小鼠的效果分析

对比分析在不同细胞部位表达猪细小病毒（PPV）主要免疫保护性抗原VP2蛋白的重组干酪乳杆菌系统作为口服疫苗的免疫效果。将构建的细胞表面表达和分泌表达猪细小病毒VP2蛋白的重组干酪乳杆菌分别经口免疫BALB／c小鼠，免疫分3次进行，时间间隔为2周，每次连续接种3d，每只小鼠每次接种100μL10^10CFU／mL的菌量，对照组小鼠接种相同剂量的PBS。初免后不同时间收集免疫小鼠粪便及肠黏液样本测定小鼠产生抗PPV的特异性sIgA抗体水平，采集小鼠血液样本测定其血清中抗PPV的特异性IgG抗体水平。间接ELISA检测结果表明，两种表达系统均能诱导小鼠产生黏膜及系统免疫应答，分泌型的重组菌系统免疫小鼠诱导机体产生的抗PPV的特异性sIgA和IgG抗体水平高于细胞表面表达型的重组菌系统的免疫效果，表明分泌型的重组乳酸菌作为活菌疫苗具有更好的免疫性。