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1.
为了建立高品质的犬肾(MDCK)单克隆细胞系,使用CRISPR/Cas9技术实现MDCK细胞IFN-β1基因的敲除,构建细胞培养禽流感病毒(AIV)增殖体系。首先,根据CRISPR/Cas9系统的技术要求构建了Cas9表达载体和sgRNA载体;然后,用3种载体共转染MDCK细胞,通过GFP阳性特征分选单细胞克隆,单细胞克隆培养在96孔板中。通过PCR扩增和对IFN-β1靶序列进行测序,确定了阳性MDCK单细胞克隆中IFN-β1的敲除。结果成功构建了具有IFN-β1敲除的MDCK单细胞克隆细胞系,与原始细胞相比,该细胞系的病毒增殖能力提高。 相似文献
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菌根围剂是一种生物活性剂,利用土壤专化真菌与植物报系形成共生联合体──菌根。该菌在林木生长、发育过程中对营养循环有重要作用,当树木主根根系同菌剂结合形成菌根,能扩大吸收养分、水分的面积,如增加辅助报代香树木主根增强了树木抗御干旱、严寒、盐碱及在贫瘠土壤上生存能力,对树木生长起着有效的促进作用。1试验地情况试验地是在敦化市江东苗圃地内,面积500m2,地势平坦,土壤肥沃,为轻壤土,PH值6.5-7.0。2气象条件敦化地属寒温带大陆性湿润季风气候,年平均气温为2.6℃,有效积温2424℃,年平均降水量628mm,无霜期120天… 相似文献
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