堆型艾美球虫3-1E基因在大肠杆菌中的可溶性表达及鉴定

将堆型艾美球虫（E．acervulina）3-1E基因克隆至pET-32a（＋）载体中。转化大肠杆菌BL21，在37℃下，用终浓度为1.0mmol／L的IPTG诱导表达，得到相对分子质量约为38500的重组蛋白。Western blot检测证实，该重组蛋白可以与特异性抗血清结合。在20℃条件下，以终浓度分别为2．0、1．0、0．5mmol／L的IPTG进行诱导．当IPTG终浓度为0．5mmol／L时，以可溶性形式存在的目的蛋白含量最高。     

鸡马立克氏病防制的现状及其展望

鸡马立克氏病(ＭＤ)广泛流行于世界各地的鸡群中,几乎凡是养鸡的地方,就有马立克氏病的踪迹。由于水平传播是本病广为散播的途径,因此在集约化鸡场,本病流行更为厉害。20世纪50～60年代,在世界上许多养鸡业发达的国家,马立克氏病曾一度居鸡病中死亡的首位或次位,经济损失相当严重。70年代后期起,由于马立克氏病疫苗的较广泛使用,一些大型的养鸡场,基本上控制了本病的流行。但近年来由于马立克氏病疫苗的广泛使用,在鸡群免疫的选择性压力下,马立克氏病病毒(ＭＤＶ)在向毒力增强方面不断演化,马立克氏病的防制再一次面临严峻的挑战。1　ＭＤＶ…     

猪圆环病毒研究进展

自20世纪70年代Tischer等首次发现猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)以来,随着对PCV的了解与研究的逐渐深入,发现由它引发的各种疾病对养猪业的影响越来越大,造成的各种损失日趋严重.     

堆型艾美球虫广东株3—1E基因的克隆与序列分析

根据GenBank中登录的堆型艾美球虫3—1E基因序列，设计了3条引物，以广东株堆型艾美球虫裂殖子总RNA为模板，利用反转录一聚合酶链反应(RT—PCR)扩增获得了3—1E基因部分片段，将这一片段克隆至pGEM—TEasy载体中，经PCR、限制性内切酶分析和克隆片段的序列测定、比较，证实了克隆片段的可靠性。序列比较发现，所克隆的基因片段与Eimeria acervulina美国株(US)、E.acervulina QH株3—1E cDNA的核苷酸同源性分别为99．0％和99．2％，推导氨基酸的同源性分别为98．2％和97．6％。     

伪狂犬病毒粤A毒株TK基因的扩增、克隆与序列测定

以华南农业大学兽医学院传染病教研室分离的伪狂犬病毒粤A毒株（PRV YA）的基因组为模板，利用聚合酶链反应（PCR）扩增TK基因，获得预定大小的片段，将这一自然克隆到PMD18－T载体中。对重组质粒PMD18－TK进行PCR鉴定、限制性内切酶分析和克隆片段的序列测定、比较，证实了克隆片段的可靠性。     

鸡球虫基因工程疫苗研究进展

近年来 ,应用鸡球虫基因工程疫苗预防球虫病的试验报道逐年递增 ,许多保护性抗原陆续被发现。各种研究结果表明 ,动物机体的抗球虫免疫以细胞免疫为主 ,因此能否诱导机体产生细胞免疫是判定虫体蛋白能否作为重组疫苗成分的标准之一 ;此外 ,研究结果也显示 ,孢子或裂裂子生殖阶段的部分抗原可以诱导机体产生抗球虫免疫 ;抗有性生殖阶段抗原的抗体也可以减少攻虫雏鸡的排卵囊量。虽然在试验条件下 ,重组基因工程疫苗可以减轻球虫感染所造成的病理损伤或者减少卵囊在体内的繁殖数量 ,但距离应用于生产还相差较远 ,因此仍然有必要对相关的一系列问题进行更加详细和更深一层的研究 ,以期获得切实有效的鸡球虫基因工程疫苗     

堆形艾美球虫广东株Ea1A基因的扩增与序列测定

根据GenBank上登录的堆形艾关球虫Ea1A基因序列，设计了1对引物，以抽提的广东株的总RNA为模板，利用反转录一聚合酶链反应(RT—PCR)扩增获得了Ea1A基因部分片段，并将此片段克隆至pGEM—T载体中，经PCR、限制性内切酶分析和克隆片段序列测定、比较，证实了克隆片段的可靠性。     

伪狂犬病毒粤A株gE基因真核表达质粒的构建

根据伪狂犬病毒(PRV)NLA-3和Rice株的gE基因序列，设计了1对含有起始密码子和HindⅢ、BarnHI酶切位点的引物，以PRV粤A毒株（PRV-YA)基因组为模板，利用聚合酶链反应(PCR)扩增获得gE基因片段，将这一片段克隆至PMDl8-T载体中，获得重组质粒PMID18-gE；用HindⅢ和BarnHI酶切该重组质粒，回收得到含有以上2个酶切位点粘端的gE基因，将此基因片段克隆至相同酶切、回收后的pcDNA3．1( )真核表达载体中，获得真核表达重组质粒pcDNA3．1-gE，经PCR鉴定、限制性内切酶分析和克隆片段的序列测定、比较，证实了克隆片段的可靠性。     

猪呼吸系统综合征研究进展

猪呼吸系统综合征(PRDC)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、支原体、副猪嗜血杆菌、胸膜肺炎放线杆菌等病原体混合感染引起的猪呼吸道疾病的总称.近年来随着集约化养殖的发展,PRDC表现的越来越突出和严重,造成肉猪成活率减少、体重下降、料肉比上升等.论文综述了上述病原在PRDC中的致病机理,及其相互作用诱导出明显的PRDC症状,并提及伪狂犬病病毒在PRDC中的作用.在做好支原体、蓝耳病和伪狂犬病疫苗的基础上,通过药物控制副猪嗜血杆菌和胸膜肺炎放线杆菌是PRDC防控策略.     

堆形艾美球虫广东株3-1E基因在毕赤酵母中的表达

以重组质粒pGEM-3-1E为模板，扩增了序列两端分别含有EcoRⅠ和XbaⅠ酶切位点的堆形艾美球虫（Eimeria acervulina）广东株3-1E基因（长度为529bp），将3-1E基因克隆至巴斯德毕赤酵母分泌型表达载体pPICZαC中，构建了酵母表达质粒pPICZαC-3-1E。转化毕赤酵母X-33得到含有3-1E基因的重组酵母，甲醇诱导产生的目的蛋白经SDS-PAGE分析和免疫印迹检测，表明毕赤酵母成功表达了3-1E基因。