浅析《动物检疫管理办法》存在的问题及建议

《动物检疫管理办法》是动物卫生监督执法体系建设的重要组成部分,对规范全国动物检疫行为起着重要作用。2010年修订的《动物检疫管理办法》,规定内容更加详细,动物检疫工作的针对性和可操作性都得到有效增强。但《动物检疫管理办法》2010年版自修订施行已有10年之久,在实际动物检疫工作中,问题不断凸显。本文总结了《动物检疫管理办法》中存在的问题并提出解决建议,以期在今后的修订工作中能有所借鉴。     

SC1(pluripotin)对昆明小鼠胚胎干细胞分离培养的影响

比较了在无血清培养体系中分别添加小分子化学物质pluripotin(SCl)和白血病抑制因子(LIF)对昆明小鼠ES细胞未分化状态的维持作用,并探讨了SC1在培养液中的最佳浓度.以小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)为饲养层,以含LIF的添加血清替代品(KSR)的培养基(ESC-SR)为对照,分别用SC1浓度为0.3、1、3μmol/L的ESC-SR培养液对昆明小鼠胚胎进行分离培养.结果显示:胚胎在添加3 μmol/L SC1的ESC-SR培养液中ICM形成率显著高于对照组(P＜0.05),形成的ES集落与对照组形态差异不明显,最高传至第7代,并且在无饲养层条件下可以传至第6代而保持未分化状态.不同浓度SC1培养液中,胚胎在SC1浓度为0.3 μmol/L组的F2代形成率显著高于1 μmol/L组和3μmol/L组(P＜0.05),所分离的细胞AKP染色呈阳性,Oct4、Nanog和Sox2的免疫荧光染色均显阳性,具有ES细胞的特点.结果表明,ESC-SR培养液中SC1可以替代LIF用于小鼠ES细胞未分化状态的维持,并且可以在无饲养层条件下进行昆明小鼠ES细胞的培养.     

河南省病死畜禽无害化集中处理体系建设实践

病死畜禽无害化处理工作事关养殖业安全、公共卫生安全和生态环境安全。河南省2013年实施病死畜禽无害化集中处理体系建设以来,已建成病死畜禽无害化集中处理场100个,日均处理能力1350t,病死畜禽收集点1990个,在政策扶持、机制创新、资金支持、执法监督等方面积累了丰富经验,创设了病死猪无害化处理与保险勘查理赔相挂钩的联动机制——“河南模式”,但也存在体系规划不合理、建设标准不高、政策不完善等问题。本文结合实际,提出制定法律法规、完善扶持政策、加强科技研发、加强宣传引导等建议,以期为深入推进病死畜禽无害化集中处理体系建设提供借鉴。     

成熟培养时间对家猫卵母细胞孤雌激活胚发育的影响

为筛选出最佳体外成熟时间,以乙醇联合6-DMAP激活验证成熟时间对家猫卵母细胞成熟的影响.将家猫卵母细胞分别体外成熟28h,32h和36h后,采用10%无水乙醇激活3min,6-DMAP培养4h,再移入胚胎体外培养液中培养;第二天观察卵裂率,第六天结束培养并用H33342染色,观察不同成熟时间的激活胚胎发育情况.结果表明:成熟32h组的卵母细胞激活率最高,显著高于28h组(60.42%vs 43.16%,0.010.05);经孤雌激活的卵母细胞没有发育至囊胚的,32h组桑椹胚率最高达到15.63%,与其他两组差异不具有统计学意义(7.36%和10.78%,p>0.05).结论:家猫卵母细胞体外成熟培养32h,成熟效果最好.     

红细胞裂解法及不同培养条件对兔骨髓间充质干细胞体外增殖的影响

研究采用红细胞裂解液法从兔骨髓中分离BMSCs,相差显微镜观察其形态,四甲基偶氮唑盐法(MTT法)筛选基础培养液和血清浓度,绘制生长曲线,用流式细胞仪检测细胞周期,免疫细胞化学鉴定表面抗原。分离的细胞在形态学观察与生长动力学上均符合BMSCs特征;在实验范围内DMEM/F12+20%FBS是体外培养兔BMSCs的最佳体系;细胞周期结果显示,BMSCs平均82%处于G0/G1期,18%处于S+G2期;免疫细胞化学结果显示所分离的BMSCsCD90、CD44阳性表达,CD34阴性表达。本研究结果表明,通过红细胞裂解液法分离的兔BMSCs,其具有体外增殖和多向分化的潜能,可以作为组织工程的种子细胞。     

兔骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的研究

旨在研究5-氮杂胞苷(5-Aza)诱导兔骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)向心肌细胞分化的作用及适宜浓度.取兔股骨骨髓,分离并培养骨髓间充质干细胞,用5-Aza定向诱导向心肌样细胞分化.用倒置显微镜、免疫细胞化学法鉴定诱导后的细胞是否能表达心肌特异性蛋白α-横纹肌肌动蛋白(α-actin)和肌钙蛋白T(Cardiac troponin T,cTnT),计算各组细胞向心肌样细胞的诱导分化率.结果,5-Aza诱导MSCs后,细胞明显变宽,诱导1个月后的MSCs呈长杆状,走向趋于一致,相邻细胞间连接较紧密,相互融合.心肌细胞特异性蛋白α-actin和cTnT呈阳性表达,不同浓度的5-Aza诱导的MSCs心肌细胞特异性蛋白的表达率不一样,其中以10 μmol·L-1组表达率最高.5-Aza作用兔MSCs体外培养可以诱导其向心肌样细胞分化,最佳浓度为10μmol· L-1.     

昆明小鼠胚胎干细胞培养体系的优化

为了更高效地分离昆明小鼠胚胎干细胞,本研究从饲养层、胚胎发育阶段和培养液方面进行优化。将3代以内的小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)用丝裂霉素C处理后,分别按1×104、1×105、1×106·mL-1密度接种,以H-DMEM+15%KSR+LIF为培养液,观察不同密度饲养层对昆明小鼠胚胎干细胞(ES细胞)生长的影响,并研究胚胎发育阶段和培养液中分别添加干细胞生长因子(SCF)、SCF+胰岛素对昆明小鼠ES细胞分离克隆的影响。结果显示,胚胎在密度为1×105·mL-1的饲养层上,F1代和F2代ES细胞克隆形成率均显著高于其他2组(P<0.05)。囊胚的F2代ES细胞克隆形成率显著高于桑椹胚(P<0.05),培养液中添加SCF显著提高昆明小鼠胚胎贴壁率(P<0.05),同时添加SCF和胰岛素得到昆明小鼠最高胚胎贴壁率及F1、F2代ES细胞克隆形成率。所分离的ES细胞显示AKP染色强阳性,Oct-4、SSEA-1的免疫荧光检测阳性,具有ES细胞的特点。由此认为,发育至囊胚的胚胎在MEF密度为1×105·mL-1上,培养液中同时添加SCF和胰岛素更适合昆明小鼠ES细胞的分离培养。     

不同成熟培养时间对家猫卵母细胞皮质颗粒分布的影响

对家猫卵母细胞皮质颗粒染色,以检测不同成熟培养时间对猫卵母细胞胞质成熟的影响.将成熟培养24,28,32,36,43 h的家猫卵母细胞,以3.7%的多聚甲醛固定,之后分别对各组卵母细胞进行FITC-LCA和PI染料染色,在激光共聚焦显微镜下观察皮质颗粒(CGs)在卵母细胞胞质中的分布.结果表明,不同培养时间的卵母细胞处...     

河南省一起幼儿内脏利什曼病关联动物的紧急流行病学调查

2020年8月,河南省新安县发生一例人感染内脏利什曼病疫情.为掌握疫病发生原因,追溯疫病来源,评估可能造成的传播风险,当地政府组织动物疫病预防控制中心、动物卫生监督所、公安派出所等部门组成工作组,到患者所在自然村进行紧急流行病学调查.调查认为,导致本次疫情发生的原因极有可能是该村养犬户购进感染犬并通过白蛉进一步传播给动...     

浅谈非洲猪瘟背景下养猪场消毒剂的选择及应用

2018年非洲猪瘟的传入给中国养猪业造成了巨大的损失。切断传播途径是防控非洲猪瘟的关键,选择有效的消毒剂和消毒方式,是切断非洲猪瘟传播的有效手段。笔者结合非洲猪瘟的病原特点,阐述养猪场消毒剂选择和应用的关键,为广大养猪场户提供参考。1非洲猪瘟的特点非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒引起的一种急性、烈性、高度接触性传染病,其强毒力毒株对生猪致病率高,死亡率可达100%。世界动物卫生组织(OIE)将其列为法定报告动物疫病,我国将其列为一类动物疫病。该病主要通过接触非洲猪瘟病毒感染的猪或非洲猪瘟病毒污染物(泔水、饲料、垫草、车辆等)传播,消化道和呼吸道是其最主要的感染途径,也可经钝缘软蜱等媒介传播。非洲猪瘟不是人畜共患病,猪是非洲猪瘟病毒唯一的自然宿主,除家猪和野猪外,其他动物不感染该病毒。非洲猪瘟目前尚无有效疫苗,只能采取扑杀净化措施。