林蛙养殖场地土壤菌群结构及潜在病原菌分析

试验旨在了解林蛙养殖场地土壤菌群组成和结构特征、喷洒益生菌后的土壤菌群变化和潜在致病菌的种类与数量。试验设置3个组:养殖场地组、益生菌喷洒组和半人工养殖组,用高通量测序技术进行检测。3个试验组共获得191 588条有效序列,1 369个操作分类单元(operational taxonomic units,OTU),经分类学鉴定分属于438个属,29个门。3组样本菌群数量较大,多样性水平也相对较高。优势菌门为变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、蓝细菌门(Cyanobacteria)、芽单胞菌门(Gemmatimonadetes)、绿弯菌门(Chloroflexi)、放线菌门(Actinobacteria)、酸杆菌门(Acidobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes);优势菌属为黄杆菌属(Flavobacterium)、热单胞菌属(Thermomonas)、Sphingopyxis、紫杆菌属(Porphyrobacter)、蓝细菌纲中未定种类(norank-c--Cyanobacteria)。各分组之间菌群多样性差异不显著,各组菌群结构相似度高。土壤中潜在的红腿病致病菌在属的水平有气单胞菌属(Aeromonas)、柠檬酸杆菌属(Citrobacter)、金黄杆菌属(Chryseobacterium)、假单胞菌属(Pseudomonas)。喷洒益生菌后土壤菌群变化不明显。本研究为全面了解东北林蛙养殖场地土壤微生物组成及变化、发掘有益微生物种类和东北林蛙疾病的预防和治疗提供理论依据。     

脂肪间充质干细胞对小型猪肝缺血再灌注合并肝切除组织细胞焦亡的影响

本研究旨在探究脂肪间充质干细胞(adipose derived mesenchymal stem cells, ADSCs)对小型猪肝缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury, IRI)合并肝切除组织细胞焦亡的影响。将18头巴马小型猪随机平分成3组,每组6头,分别为假手术组(sham组)、模型组(IRI组)、异体移植ADSCs干预组(ADSCs组,剂量为1×10⁶ cells·kg^-1),通过腹腔镜微创技术建立肝IRI合并肝切除损伤模型,于术后即刻分别向IRI组和ADSCs组小型猪肝实质注射生理盐水和ADSCs。于术后1、3和7 d采集血液和肝组织样本。应用ELISA法对血清中促炎因子白细胞介素18(interleukin-18, IL-18)、白细胞介素1β(interleukin-1β, IL-1β)的含量进行测定,应用RT-qPCR技术和Western blot技术对细胞焦亡相关基因与蛋白进行检测。结果显示,术后1、3 d时,相比于sham组,IRI组血清中促炎因子IL-18、IL-1β含量显著增加(P&l...     

林蛙养殖场地土壤菌群结构及潜在病原菌分析

试验旨在了解林蛙养殖场地土壤菌群组成和结构特征、喷洒益生菌后的土壤菌群变化和潜在致病菌的种类与数量。试验设置3个组：养殖场地组、益生菌喷洒组和半人工养殖组,用高通量测序技术进行检测。3个试验组共获得191 588条有效序列,1 369个操作分类单元（operational taxonomic units,OTU）,经分类学鉴定分属于438个属,29个门。3组样本菌群数量较大,多样性水平也相对较高。优势菌门为变形菌门（Proteobacteria）、拟杆菌门（Bacteroidetes）、蓝细菌门（Cyanobacteria）、芽单胞菌门（Gemmatimonadetes）、绿弯菌门（Chloroflexi）、放线菌门（Actinobacteria）、酸杆菌门（Acidobacteria）、厚壁菌门（Firmicutes）;优势菌属为黄杆菌属（Flavobacterium）、热单胞菌属（Thermomonas）、Sphingopyxis、紫杆菌属（Porphyrobacter）、蓝细菌纲中未定种类（norank_c__Cyanobacteria）。各分组之间菌群多样性差异不显著,各组菌群结构相似度高。土壤中潜在的红腿病致病菌在属的水平有气单胞菌属（Aeromonas）、柠檬酸杆菌属（Citrobacter）、金黄杆菌属（Chryseobacterium）、假单胞菌属（Pseudomonas）。喷洒益生菌后土壤菌群变化不明显。本研究为全面了解东北林蛙养殖场地土壤微生物组成及变化、发掘有益微生物种类和东北林蛙疾病的预防和治疗提供理论依据。     

脂肪来源间充质干细胞条件培养基对小型猪腹腔镜肝损伤氧化应激反应的影响

旨在探究脂肪来源间充质干细胞条件培养基（adipose-derived mesenchymal stem cells-conditioned medium，ADSCs-CM）对小型猪肝损伤氧化应激反应的影响，作者选取24头健康小型猪，随机分为4组，每组6只，分别为模型组（IRI）、DMEM对照组（DMEM）、ADSCs-CM治疗组（CM）和ADSCs治疗组（ADSCs）。4组均通过腹腔镜技术建立小型猪肝缺血再灌注（ischemia reperfusion，IR）合并部分肝切除的肝损伤模型，IRI组移植生理盐水，DMEM组移植浓缩的基础培养基，CM组移植浓缩的脂肪来源间充质干细胞培养基，ADSCs组移植脂肪间充质干细胞。各组分别于术前、术后1、3、7 d采集血液与肝组织样本，使用肝功能检测试剂盒对血清中总胆红素（T-BIL）、乳酸脱氢酶（LDH）、总蛋白（TP）进行检测；使用氧化应激检测试剂盒对肝组织中丙二醛（MDA）、髓内过氧化物酶（MPO）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）进行检测。结果显示：术后1、3 d：模型组和对照组肝功能严重损伤，发生明显氧化应激反应，CM和ADSCs治疗组显著促进肝功能的恢复，且氧化应激相应指标较模型组和对照组表达明显下降。术后7 d，各组基本恢复到术前水平。结果显示：腹腔镜肝缺血再灌注合并肝部分切除损伤可致小型猪发生氧化应激反应，脂肪来源间充质干细胞及其条件培养基均可改善肝损伤后的氧化应激反应。     

脂肪间充质干细胞条件培养基对小型猪肝缺血再灌注合并肝部分切除炎症反应的影响

本研究旨在探究脂肪间充质干细胞条件培养基（adipose-derived mesenchymal stem cells-condition medium，ADSCs-CM）对小型猪肝缺血再灌注合并肝部分切除炎症反应的作用。基于腹腔镜技术对24头小型猪建立肝缺血再灌注（ischemia reperfusion，IR）合并肝部分切除模型，根据术后对肝移植4种不同物质：生理盐水、浓缩的基础培养基、浓缩的脂肪间充质干细胞培养基、脂肪间充质干细胞，将小型猪分为模型组（IRI）、DMEM组（DMEM）、ADSCs-CM组（CM）和ADSCs组（ADSCs）4组，每组6只。分别于术前、术后1、3、7 d采集血液与肝组织样本，通过病理组织学炎性细胞的观察，血液常规指标的检测，血清皮质醇（COR）、C反应蛋白（CRP）、透明质酸（HA）的ELISA检测，肝组织炎症相关基因IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10 mRNA的qRT-PCR检测综合评价ADSCs-CM对炎症反应的作用。结果显示：术后1和3 d：IRI组、DMEM组的病理切片出现较多炎性细胞，血常规和炎症相关基因结果也表明术后发生炎症反应，而CM组和ADSCs组显著减少组织中炎性细胞的浸润和血液中白细胞（WBC）、中性粒细胞（NE）、淋巴细胞（LY）的细胞数，降低组织中促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA的表达水平，并提高抗炎因子IL-10 mRNA的表达水平。术后7 d，各组基本恢复到术前水平。综上表明：肝缺血再灌注合并肝部分切除可致炎症的发生，ADSCs-CM和ADSCs均可改善肝缺血再灌注合并肝部分切除的炎症反应，ADSCs-CM移植有潜力成为未来治疗炎症反应的无细胞疗法。