宝石鲈肝胰脏蛋白质双向电泳方法的摸索与优化

选取宝石鲈肝胰脏作为样品,通过优化裂解配方及摸索裂解液与样品的最适比例,设计两个等电聚焦程序,建立和优化宝石鲈鱼肝胰脏蛋白质双向电泳实验方法,为宝石鲈肝胰脏内目标蛋白的研究提供参考。结果表明,采用裂解液配方:8 M Urea,2 M Thiourea,0.5%(W:V)CHAPS,40 mMTris-Base,1%DTT,2%(W:V)Pharmalyte pH 3～10,1 mM PMSF;裂解液和样品液比为1∶3时裂解效果较好;等电聚焦程序I(S1:0～500 V,500 V.h;S2∶500 V,500 V.h;S3∶500～3 500 V,10 000V.h;S4∶3 500 V,50 000 V.h,S5∶3 500～5 000 V,8 000 V.h)具有最好的等电聚焦效果。     

四种金属离子对宝石鲈（Scortum barcoo）淀粉酶活性的影响

以酶学分析方法研究了四种金属离子K^＋、Na^＋、Mg^2＋、Ca^2＋对宝石鲈消化器官（胃、幽门盲囊、肝脏、前肠、中肠、后肠）淀粉酶活性的影响。金属离子浓度设置为50～300mmol／L六个梯度。结果表明，K^＋、Na^＋、Mg^2＋对大部分消化器官淀粉酶活性表现为低浓度促进，高浓度抑制的作用（P〈0．05），50mmol／L和100mmol／L时促进作用最大，三者中K^＋促进作用最明显，其次为Na^＋和Mg^2＋；Ca^2＋可明显抑制各消化器官淀粉酶活性（P〈0．05）；四种离子的最大抑制作用出现在250mmol／L和300mmol／L两个高浓度下。淀粉酶在宝石鲈各消化器官的分布为前肠〉幽门盲囊〉胃〉中肠〉肝脏〉后肠。由此得出结论：50—100mmol／L的K^＋、Na^＋、Mg^2＋对宝石鲈淀粉酶活性促进作用最明显，在配合饲料中可适量添加。     

4种金属离子对宝石鲈蛋白酶活性的影响

以酶学方法研究了K+、Na+、Mg2+、Ca2+ 在浓度为50、100、150、200、250、300 mmol/L时,对宝石鲈消化器官(胃、幽门盲囊、肝脏、前肠、中肠、后肠)蛋白酶活性的影响.试验结果表明,K+、Na+对宝石鲈消化器官蛋白酶活性具有一定的促进作用,100 mmol/L时促进作用最明显;Mg2+、Ca2+对蛋白酶活性具有抑制作用,300 mmol/L时抑制作用最大;蛋白酶在宝石鲈各消化器官的分布为前肠＞幽门盲囊＞中肠＞胃＞肝脏＞后肠.宝石鲈配合饲料中添加100 mmol/L的K+、Na+可提高其消化器官的蛋白酶活性.     

饲料可消化糖水平对宝石鲈餐后代谢的影响

以含可消化糖水平为0％、6％、23％和40％的等蛋白、等脂肪饲料饲养宝石鲈（Scortum barcoo）6周，禁食36h后饱食投喂，测定不同时间段血液指标及肝肌糖元的变化。结果表明，投喂Ⅱ组（23％）饲料的宝石鲈生长及饲料利用状况最佳；摄食后血糖、甘油三酯和胆固醇均为先上升后下降，随可消化糖水平升高，血糖和甘油三酯上升幅度显著增大（P〈0．05），总胆固醇上升幅度依次减小，总氨基酸无明显变化；肝糖元除Ⅲ组（40％）外均呈先上升后下降的趋势，肌糖元先上升后下降，最后维持稳定。肝肌糖元含量上升幅度均随可消化糖水平升高而增大。结果显示在饲料可消化糖水平为23％时，宝石鲈的生长及饲料利用状况最佳，过高的可消化糖会对机体产生一定生理负荷及胁迫作用，影响其生长及代谢状况。