利用乳汁体细胞研究共轭亚油酸钙对奶牛乳腺基因表达的作用

8头泌乳中期的奶牛被随机分为2组，分别是对照组（每头牛：基础日粮＋棕榈酸钙200g／d）和试验组（每头牛：基础日粮＋共轭亚油酸钙200g／d），试验期14d，检测了奶产量、乳成分，分析奶牛的血液变化，并采用荧光定量PCR对乳汁体细胞中脂蛋白脂酶（LPL）、乙酰辅酶A羧化酶（ACACA）的基因表达进行检测。结果显示，与对照组相比，试验组奶牛的乳产量、乳蛋白、乳糖和乳汁体细胞含量没有显著影响，但是显著降低了乳脂肪含量（P〈0．05），对照组和试验组奶牛乳脂肪含量分别为0．0326g／mL和0．0244g／mL。检测血液指标发现，共轭亚油酸钙显著升高了奶牛血液中高密度脂蛋白的含量（P〈0．05）。基因分析发现，试验组奶牛乳汁体细胞中LPL、ACA—CA的基因表达显著下调，表明共轭亚油酸钙抑制了奶牛乳腺细胞脂肪酸合成酶的基因表达。     

生长抑素对大鼠乳腺斯钙素基因表达的影响

将泌乳期大鼠分为对照组、CS组和SS组,利用RT-PCR法对大鼠乳腺组织斯钙素基因进行检测,分析生长抑素对大鼠乳腺斯钙素基因表达的影响。结果表明:乳腺中有STC1表达,无STC2表达。生长抑素对泌乳期大鼠乳腺斯钙素基因表达起下调作用,半胱胺作用相反。以上结果提示生长抑素和半胱胺可能参与乳腺钙代谢的调节,且通过STC1发挥作用。     

CD147基因在家兔肠道的克隆与结构预测

基于电子延伸序列,克隆并分析兔CD147基因.采用兔十二指肠黏膜组织提取总RNA,进行RT-PCR反应,测序并进行结构预测.克隆的兔CD147基因包含一个完整的开放阅读框架,全长为810 bp,编码由270个氨基酸残基组成的CD147前体蛋白,推导的氨基酸序列信号肽为1～16个氨基酸.氨基酸序列与牛、人、褐鼠、野猪的同源性分别为62.5%,65.9%,59.5%和66.3%,三级结构预测表明CD147具有2个免疫球蛋白类似区.试验成功克隆了兔CD147基因,注册到GenBank(Accession.EU650668),并预测其三级结构,为进一步研究其生物学功能奠定基础.     

基于Spyligase技术的禽流感血凝素H5HA10多聚体抗原的高效制备

利用Spyligase技术在H5HA10序列的C端和N端分别加上SpyTag和KTag序列,并分别与His6-ArsC、His6-PAS200、His6-XTEN、His6-PEAT、SiTag3-SUMO、SiTag3-MBP、SiTag3-PAS200、SiTag3-XTEN和SiTag3-ArsC促溶标签相连,成功构建了含9种不同促溶性标签的H5HA10重组表达载体,同时构建了1种含有Cherry标签的Spyligase重组表达载体。将这10种重组载体分别转化至大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达和SDS-PAGE分析,筛选出可以显著促进H5HA10重组蛋白表达的融合标签ArsC。通过优化诱导表达条件,在大量诱导表达、纯化后成功获得了高纯度的H5HA10和Spyligase重组蛋白,最终在PCT缓冲体系中, Spyligase促使H5HA10重组蛋白的蛋白聚合,形成了环化单体、三聚体、六聚体以及九聚体。     

猪硫辛酸合成酶基因的克隆及组织表达

本试验通过电子延伸及RT-PCR技术克隆猪硫辛酸合成酶(lipoic acid synthase,Lias)基因,并进一步研究了该基因在猪体内组织的表达分布。基于电子延伸序列设计1对引物,成功克隆了猪Lias基因(GenBank登录号:JN797612.1),并进行了序列分析,同时利用RT-PCR方法分析了Lias基因的组织表达规律。克隆的猪Lias基因长度为1119 bp,包括1个完整的开放阅读框,编码372个氨基酸;克隆的猪Lias基因与小鼠、褐鼠、人、牛的核苷酸序列同源性分别为71.5%、69.0%、77.3%、70.4%;推导的cDNA编码区(CDS)的氨基酸序列与小鼠、褐鼠、人、牛的同源性分别为91.5%、79.4%、89.4%、88.2%;构建的系统进化树结果显示,猪与小鼠、褐鼠的亲缘关系最近;组织表达分布结果表明,Lias基因在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、十二指肠、空肠、直肠、回肠、脂肪、皮肤和肌肉中都有表达;Gel-Pro软件分析结果表明,Lias基因在肾脏和脂肪组织中表达丰度最高,其次是直肠和回肠。     

一例鸡新城疫与大肠杆菌混合感染的诊断和预防

鸡新城疫主要危害鸡、火鸡和鸭、鹅等禽类,特别是肉仔鸡最易感.临床上常见的病型有:胚胎和幼雏死亡、气囊炎、腹膜炎、急性败血症、心包炎、脐炎、眼球炎、关节滑膜炎、出血性肠炎、输卵管炎等.     

乳中黄嘌呤氧化还原酶的研究进展

黄嘌呤氧化还原酶属于含钼脱氢酶黄素蛋白家族，是组成乳脂肪球膜的主要蛋白，通过硫酸胺分级沉淀和DEAE-Sepharose柱可从乳脂肪球膜中纯化。XOR作为乳脂肪球膜的膜结合蛋白，在脂肪滴的包裹和分泌中起到重要的结构作用，并且在肠道能够起到一定的抗菌作用。     

猪Musclin基因片段克隆与序列分析

【研究目的】克隆并分析猪musclin基因;【方法】肌肉组织提取总RNA,利用设计的引物进行RT-PCR,PCR产物与pMD19-T连接后转化E.coliDH5α,检测阳性克隆并测序;【结果】克隆的猪musclin基因片段与人、大鼠、小鼠同源性分别为86%、78%、75%,预测的氨基酸序列含有“KKKR”结构和与小鼠ANP、BNP、CNP蛋白的同源性区域;【结论】克隆了猪musclin基因片段并注册GenBank(Ac-cession.EF369511)。     

荷斯坦奶牛牛乳中营养成分的相关及回归分析

采集河南省郑州市3个牛场荷斯坦奶牛的生鲜牛乳,检测了多项成分的含量,分析了各成分之间的相关性,并对全脂乳固体和乳脂之间及脱脂乳固体与密度之间进行了回归分析。结果表明:全脂乳固体与乳脂含量呈极显著的正相关;脱脂乳固体含量与密度呈极显著的正相关;密度则主要与蛋白、乳糖的含量相关而与乳脂含量无相关性,回归方程分别为:y(全脂乳固体含量)=8.006+1.107(x脂肪含量),y(脱脂乳固体含量)=-195.638+197.792(x密度)。     

猪Lipin基因克隆及其组织分布的研究

采用逆转录PCR、电泳检测等方法,成功克隆得到了猪的Lipin1、Lipin2和Lipin3基因。这3个基因与小鼠的相应基因均具有较高的同源性,达83．2％～86．7％。组织分布结果显示：Lipin1广泛分布在猪的多种组织中,但Lipin2和Lipin3仅在肌肉、肺、回肠和睥中有分布。